Резидент-нарушителя парадигма: стандартизированный тест для агрессии, насилия и социального стресса

Общая цель данной процедуры заключается в надежном вызывании наступательного агрессивного поведения у самцов крыс. В лабораторных условиях на первом этапе взрослого самца крысы содержат вместе со стерилизованной самкой в течение как минимум одной недели. В день тестирования устанавливается оборудование для видеозаписи с целью фиксации социального взаимодействия.

Затем, по мере готовности, из клетки удаляют самку-компаньонку, в клетку к резидентному самцу вводят незнакомого самца крысы, и им позволяют взаимодействовать в течение 10 минут. В конечном счете данная процедура направлена на создание и поддержание резидентным самцом территории, которую он готов защищать от вторжения. Преимуществом этого метода является возможность анализа естественного социального поведения в лабораторных условиях не только у резидентного самца, но и у пришлого животного.

Данный метод может помочь в поиске ответов на ключевые вопросы о нейробиологии и нейрофармакологии или биологических функциях агрессии, а также о насилии как патологии агрессии. Эту методику можно использовать для изучения последствий острого или хронического социального стресса у животного-интрудера. Пожалуйста, обратите внимание, что парадигма «резидент-интрудер» не лишена этических проблем.

Самка-интрудер может подвергнуться серьезным страданиям. Степень страданий животных всегда должна быть сбалансирована с основными научными целями эксперимента. Наступающая агрессия представляет собой высокоактивное поведение, поэтому для ее полного проявления требуется достаточное пространство.

Для достижения оптимальных результатов используйте клетки для резидентных животных площадью пола не менее половины квадратного метра, чтобы способствовать формированию территориального поведения и снизить социальную изоляцию. Содержите каждого резидента вместе с самкой в течение как минимум одной недели до начала эксперимента. В качестве компаньонов используйте стерильных самок с сохраненным гормональным фоном.

Это обеспечит восприимчивость самки без наступления беременности и развития материнской агрессии. Поскольку территориальное поведение в значительной степени основано на наличии ольфакторных стимулов, не меняйте подстилку в клетке до или во время тестирования. Животное-интрудер, используемое в последующих исследованиях, должно быть из неагрессивной линии и иметь массу тела немного меньшую, чем у резидента-самца.

Хотя агрессия может проявляться в любое время суток, тестирование лучше всего проводить в темную фазу, когда крыса наиболее активна. За один час до тестирования удалите самку-компаньона из клетки резидента. Установите чувствительную к свету видеокамеру для записи поведения резидента с целью последующего анализа.

Для начала теста поместите незнакомого самца-интрудера в домашнюю клетку резидентного животного. Наблюдайте за их поведенческим взаимодействием в течение 10 минут. Регистрируйте проявления агрессивного и социального поведения.

Здесь продемонстрированы поведение при поднятии туловища и поведение при движении вперед. Это боковая угроза. Это атака с захватом, а здесь показано преследование.

Здесь представлен период социального исследования, за которым следует атака с захватом. Наблюдается обнюхивание аногенитальной области. Теперь одна крыса приближается к другой.

Это поведение прижимания к земле. Здесь представлена вертикальная поза. Данное поведение представляет собой латеральную угрозу.

Обратите внимание на приподнятую шерсть или пилоэрекцию у резидентного самца, за которой следуют вертикальная поза и некоторое несоциальное исследовательское поведение. По окончании тестирования удалите самца-интрудера из клетки и снова соедините резидентного самца с самкой-компаньоном. Данные анализируются путем воспроизведения видеозаписи и подсчета поведенческих актов с помощью специализированного программного обеспечения для измерения агрессивного поведения.

Введите особь-интрудера, как показано ранее, и определите латентный период атаки резидентского самца. Очень короткий латентный период является первым индикатором агрессии. Укусы, направленные на уязвимые части тела, такие как горло, живот и лапы, также свидетельствуют о насильственном характере нападения.

Направленность действий на рыло оппонента указывает на оборонительное поведение субъекта. В случае получения серьезного ранения в уязвимых частях тела эксперимент следует прекратить, в зависимости от степени тяжести травмы.

Это может рассматриваться как гуманная конечная точка, либо интрудеру следует оказать соответствующую медицинскую помощь. Кроме того, агрессивное поведение проявляется, когда резидентский самец атакует анестезированного самца-интрудера. Тест с анестезированным самцом можно прекратить сразу после того, как резидент совершит атаку.

Агрессивное поведение резидента также можно протестировать в новой обстановке. Отсутствие изменений в уровне агрессии по сравнению с домашней клеткой является признаком жестокости. Для начала выберите хорошо обученного, высокоагрессивного, не проявляющего жестокости самца-резидента и следуйте протоколу, продемонстрированному ранее.

Наблюдайте за поведением интрудера. После периода неสังคมного исследования один рептилий отходит от другого, ведет себя покорно и убегает. Здесь показана защитная вертикальная поза.

После тестирования верните животное-интрудера в его домашнюю клетку и рассчитайте общий показатель защиты, который представляет собой сумму времени, затраченного на бегство, оборонительную вертикальную позу, подчинение и замирание. Социальный стресс достигается путем выполнения этого же протокола для хронического социального стресса.

Держите интрудера в клетке резидента, но отделяйте его от резидента перфорированной перегородкой. На этом рисунке показано частотное распределение показателей наступательной агрессии у лабораторной линии, которая изначально была диким типом, и у более распространенной линии лабораторных крыс; в линии дикого типа около трети животных проявляют крайнюю агрессивность, тогда как высокоагрессивный фенотип отсутствует у крыс линии Wistar. Данный пример демонстрирует распределение различных поведенческих категорий в парадигме «резидент-интрудер» с использованием крыс линии WTG в качестве резидентов и крыс линии Wistar в качестве интрудеров.

В данной работе парадигма «резидент-интрудер» используется в сочетании с поведенческой фармакологией. Селективный агонист серотониновых рецепторов 1A Alna spiron вызывает дозозависимое снижение наступательной агрессии, что сопровождается дозозависимым увеличением социального исследования. У некоторых особей наступательная агрессия может перерасти в насильственную форму агрессии.

Насильственная форма агрессии характеризуется очень короткими атаками, латентным периодом до начала атаки на анестезированную самку или самца, нанесением серьезных ран и очень низким соотношением угроз к атакам. При использовании данной процедуры для моделирования социального стресса важно использовать агрессивную линию крыс в качестве резидентов.

Необходимо отобрать особей, проявляющих наступающую агрессию в течение как минимум 30% времени тестирования. После просмотра этого видео вы сможете правильно идентифицировать все формы поведения как резидента, так и интрудера. Кроме того, вы сможете распознать проявления насилия.

Не забывайте, что использование парадигмы «резидент-интрудер» не лишено этических проблем. Страдания самца-интрудера всегда должны иметь четкую связь с основными целями эксперимента.