RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ru_RU
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/50201-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Мы описываем метод количественной оценки активности K+-контртранспортирующих АТФаз P-типа путем гетерологичной экспрессии ферментов в ооцитах Xenopus и измерения поглощения Rb+ или Li+ отдельными клетками с помощью атомно-абсорбционной спектрофотометрии. Этот метод является чувствительной и безопасной альтернативой экспериментам с радиоизотопным потоком, облегчающей сложные кинетические исследования.
В процедуре используются циты лягушки в качестве системы экспрессии in vivo. Чтобы количественно оценить транспортную активность калия, транспортирующего P-тип A, TP, ais или другие мембранные транспортеры микроэлементов, сначала экспрессируют белок-транспортер в Zap lavis. Затем циты индуцируют поглощение катионов путем инкубации клеток в растворе флюса, содержащем определенную концентрацию транспортируемого катиона, в течение фиксированного времени и температуры.
В качестве альтернативы можно провести эксперимент по поглощению при контроле мембранного потенциала с использованием метода двухэлектродного зажима напряжения. После промывки клетки гомогенизируют, отдельные ооциты в одном миллилитре миллипористой воды. Затем измерьте образцы на атомно-абсорбционном спектрофотометре, оснащенном печью для распыления графита с поперечным нагревом.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
10:57
Related Videos
19K Views
13:14
Related Videos
11.8K Views
07:38
Related Videos
9.7K Views
13:30
Related Videos
12.6K Views
09:24
Related Videos
11.1K Views
11:51
Related Videos
7.5K Views
07:16
Related Videos
14.3K Views
10:28
Related Videos
10.4K Views
08:33
Related Videos
2.3K Views
10:08
Related Videos
2.6K Views