Широкое поле флуоресцентной микроскопии и флуоресцентной проточной цитометрии изображений на сотовый телефон

Общая цель этой процедуры заключается в преобразовании камеры мобильного телефона в платформу флуоресцентной микроскопии или флуоресцентный цитометр для визуализации. Во-первых, флуоресцентное излучение собирается с помощью прикрепленной линзы, которая была помещена между мобильным телефоном, камерой и интересующим образцом. Затем простой пластиковый фильтр внутри насадки отклоняет рассеянный возбуждающий свет, который создает темный фон для флуоресцентной визуализации, превращая камерофонный телефон в флуоресцентный микроскоп или цитометр для визуализации.

На последнем этапе с помощью камеры в ночном режиме делается снимок или видео интересующих флуоресцентных частиц. В конечном счете, флуоресцентные шарики или клетки могут быть изображены и охарактеризованы камерой мобильного телефона. Основное преимущество этого метода по сравнению с существующими массами, как и при использовании обычного флуоресцентного микроскопа, заключается в том, что микроскоп на основе сотового телефона компактен, легок и экономичен, а также имеет потенциал для использования в диагностике на месте оказания медицинской помощи.

В условиях ограниченных ресурсов, где традиционные медицинские услуги недоступны Чтобы собрать оптический широкопольный флуоресцентный микроскоп, начните с помещения выпуклой линзы Plano в оптическую насадку в соответствии с ее конкретным положением держателя линзы. Затем поместите пластиковый фильтр на поддон для фильтра и вставьте его в насадку. Далее вставьте лоток со светодиодом в насадку.

Поместите предметные стекла для образцов в лоток для образцов, а затем вставьте лоток для образцов в насадку. После направления светодиодов в сторону зажима для образца собранная оптожидкостная широкопольная флуоресцентная микроскопия прикрепляется к мобильному телефону таким образом, что дополнительная линза находится в непосредственном контакте с объективом камеры мобильного телефона. Теперь с помощью переключателя на насадке включите светодиоды и сделайте снимок интересующего вас образца с помощью камеры мобильного телефона.

В ночном режиме. Когда возникает необходимость скрининга больших объемов жидких образцов для выявления редких событий, можно собрать устройство оптожидкостной проточной цитометрии. Начните с установки сферической линзы А в насадку.

Затем прикрепите пластиковый абсорбционный фильтр к объективу камеры и вставьте микрофлюидную камеру в насадку. Теперь закрепите собранную оптожидкостную насадку для флуоресцентной цитометрии на сотовом телефоне так, чтобы дополнительная линза находилась непосредственно в контакте с объективом камеры сотового телефона, и используйте переключатель на насадке для включения светодиодов. Затем подсоедините микрофлюидный канал к шприцевому насосу и подайте жидкий образец в микрофлюидное устройство с постоянной скоростью потока.

Затем, используя видеорежим камеры мобильного телефона, снимите фильм о флуоресцентных клетках, протекающих через микрофлюидный канал, чтобы подготовить образцы флуоресцентных микрочастиц. Сначала смешайте 10 микролитров зеленых флуоресцентных шариков и 10 микролитров красных флуоресцентных шариков с 40 микролитрами деионизированной воды. С помощью микропипетки нанесите 10 микролитров смеси шариков на предметное стекло.

Затем с помощью другого предметного стекла сделайте сэндвич-структуру. Наконец, вставьте сэндвич-конструкцию в лоток для образцов широкопольной насадки для флуоресцентной микроскопии и вставьте ее в насадку для мобильного телефона. Чтобы получить образец лейкоцитов с флуоресцентной меткой, сначала перенесите 200 микролитров образца цельной крови из пробирки для сбора крови ЭДТА в 1,5-миллилитровую полистирольную пробирку.

Затем добавьте один миллилитр буфера для лизирования эритроцитов в образец цельной крови объемом 200 микролитров и тщательно перемешайте через пять минут, центрифугируйте образец лизированной крови. Затем удалите надосадочную жидкость ресуспенд, гранулу лейкоцитов в 200 микролитрах PBS, и аккуратно перемешайте клетки после центрифугирования. Снова удалите надосадочную жидкость и снова присунзируйте в PBS.

Далее добавьте пять микролитров одного миллимолярного раствора цито 16 к лейкоцитам и инкубируйте образец в алюминиевой фольге в течение 30 минут. Затем, после вращения образца, снова суспендируйте меченую гранулу лейкоцитов в большем количестве PBS и перенесите от 5 до 10 микролитров образца клетки на покровную пленку. Поместите вторую защитную крышку на верхнюю часть образца, а затем вставьте многослойную крышку в лоток для образцов.

Сделайте изображение образца с помощью флуоресцентного микроскопа для мобильного телефона. В качестве альтернативы меченые элементы могут непрерывно подаваться через микрофлюидный канал с помощью портативного автоматического шприцевого насоса с питанием от аккумулятора. Затем с помощью камеры мобильного телефона в режиме видео можно сделать флуоресцентный микроскопический фильм о протекающих клетках.

Флуоресцентные клетки или частицы могут быть визуализированы в статическом режиме, так что без какого-либо потока жидкости можно наблюдать очень большое поле зрения образца с пространственным разрешением около 10 микрометров. Например, на этом рисунке изображены зеленые и красные флуоресцентные бусины. Достойное качество изображения достигается при поле зрения около 81 миллиметра, квадратном по направлению к краям центрального поля зрения.

Тем не менее, здесь есть аберрированные области, показаны изображения с мобильного телефона флуоресцентно меченых белых кровяных телец. На этой врезке показано изображение с мобильного телефона с цифровым масштабированием флуоресцентно меченных белых кровяных телец, обрезанных по основному изображению. На этой врезке показаны результаты сжатого декодирования для первой вставки: декодированное изображение демонстрирует такой же уровень четкости, как и тот же образец клетки, рассматриваемый на 10-кратном объективе с помощью обычного флуоресцентного микроскопа с тем же полем зрения.

Приступая к просмотру этого видео, вы должны иметь хорошее представление о том, как превратить свой мобильный телефон в криминалистический микроскоп или цитометр, позволяющий визуализировать характеристики и содержание судебно-медицинских шариков или клеток.