Методы Выполнение Кресты в Setaria виридис, Система Новая модель для трав

Общая цель данной процедуры состоит в том, чтобы продемонстрировать, как выполнять скрещивание для cter verus по новой модели системы для трав. Это достигается путем предварительного выбора, обрезки и маркировки вершины. Второй шаг – выхолостить подстриженную метелку, опустив ее на водяную баню при температуре 48 градусов Цельсия.

Далее обрезанная вершина используется в качестве самки для опыления вершиной, которая сбрасывает пыльцу. Завершающим этапом является сбор семян через две недели после перекрестного опыления. В конечном счете, окрашивание предполагаемых гибридных семян методом Гаса используется для демонстрации эффективности метода.

Основное преимущество этой методики перед существующими методами, такими как физическая кастрация, заключается в том, что она менее инвазивна и относительно проста в лабораторных условиях. Этот метод поможет ускорить принятие cter verus в качестве генетической модели, упростив выполнение скрещиваний. Для начала удалите одну ячейку для полива, а затем заполните лоток четырьмя на девять ячеек с помощью metro Mix 360.

Далее слегка опрыскайте ячейки и посейте семена на поверхность почвы, по одному семени на ячейку. Затем засыпьте семена слоем грунта, толщиной 0,5 сантиметра распылите поверхность почвы, чтобы увлажнить их, а затем полейте плоские участки со дна. Продолжайте поливать клетки снизу один-два раза в день после посева семян, стараясь не переливать.

Установите условия в камере роста на 31 градус Цельсия днем и 22 градуса Цельсия ночью с обработкой преда 15 градусов Цельсия с 8:30 до 9:00 утра. Также поддерживайте 12-часовой график светлой темноты и установите относительную влажность на уровне 50% в этих условиях. Satter verus a 10.1 зацветет через 21-22 дня после посева семян. В идеале кастрация проводится во второй половине дня или вечером.

Выберите основной пентакль на каждом растении, которое имеет от одного до пяти цветков. Затем отрежьте кончик пентакля и удалите все цветы в нижнем отделе проксимального среднего и нижнего отделов с помощью тонких щипцов. Если цветет только от одной 10-й до одной пятой цветков.

Для того чтобы сохранить нижний срез дистального, среднего и верхнего срезов проксимального отдела середины для дальнейшей обрезки, срежьте верхушку и обрежьте цветки от основания метелки. Если на метелке цветет от одной четверти до половины цветков, оставьте проксимальную среднюю часть для дальнейшей обрезки и отрежьте дистальную среднюю часть. После того, как пентакль будет срезан, с помощью хирургических ножниц слегка подрежьте щетину.

Позаботьтесь о том, чтобы щетина оставалась в регионе, который будет опыляться, чтобы защитить соцветия от возможного теплового повреждения. Для каждого колоска сохраните самый верхний зрелый соцветий. Самый верхний цветок будет иметь более высокую вероятность цветения в момент опыления.

Затем удалите все цветы, которые распустились, и все незрелые цветы, оставив примерно от 20 до 30 цветков на вершине, которые равномерно распределены. Затем отметьте одну сторону каждого цветка красным перманентным маркером. И запишите количество соцветий на вершине флажка вершины со следующей информацией: дата кастрации, продолжительность и температура, при которой производится кастрация.

После того, как метелка будет обрезана, удалите все культиваторы каждого растения, чтобы обеспечить перераспределение большего количества ресурсов на развитие главной вершины. За час до кастрации установите водяную баню на 48 градусов Цельсия для термической обработки. После предварительного нагрева аккуратно согните обрезанные пентакли и опустите по три-четыре за раз в теплую воду на три-шесть минут.

Соблюдайте осторожность, чтобы не сломать стебель пентакля. Флажковый лист, которым подразделяется пентакль, не должен соприкасаться с теплой водой. Это необходимо для предотвращения теплового повреждения тканей листа.

Как только кастрация будет выполнена на нужную продолжительность, снимите метелки с водяной бани и аккуратно стряхните воду с метелки. Затем полностью накройте выхолощенную метелку специальным микроперфорированным пакетом для хлеба и закрепите его завязкой. Пакеты для хлеба с микроперфорацией могут быть изготовлены по индивидуальному заказу в соответствии с размером метелки.

Наконец, поместите растения обратно в камеру роста до следующего дня. В 9:00 утра на второй и третий день переместите кастрированных самок и некастрированных родителей мужского пола из камеры роста в лабораторию для проведения скрещивания, наблюдения и добавления еще одного красного. к цветкам, которые распустились или распускаются.

С помощью красного перманентного маркера запишите общее количество распустившихся цветков на метелке. Затем запишите дату опыления и имя родителя-самца на бирке, чтобы отслеживать, какие скрещивания были выполнены. Наблюдайте за временем пика антитезы у родителей-мужчин в наших лабораторных условиях, цветы на пентаклях родителя-мужчины начинают синхронно раскрываться около 10:10 утра После открытия, полное напряжение пыльника и выброс пыльцы произойдет через 20 минут.

Приступайте к опылению сразу при желтоватом цвете. На цветках мужского родителя видны белые пыльники. Опыление осуществляется на второй и третий день с помощью опыления метелкой в метелку или опыления пыльником в рыльце.

Используя одну отделенную метелку в качестве самца, осторожно потрите метелку вместе с выхолощенной метелкой, чтобы облегчить опыление, и выбросьте мужскую метелку, чтобы избежать загрязнения, повторяйте процесс опыления до тех пор, пока каждая выхолощенная вершина не будет опыляться двумя-тремя пентаклями. Наиболее эффективным методом является опыление пыльником до рыльца с помощью щипцов. Сорвите цветок, который цветет желтовато-белыми пыльниками или сорвите пыльники и физически прикоснитесь к рыльцу цветка на женском родителе.

Используйте один цветок от мужского родителя для опыления одного цветка на выхолощенной метелке между опылением разных мужских родителей. Окуните щипцы в 95% этанол, а затем протрите салфетками Кима, чтобы избежать загрязнения из-за переноса пыльцы между разными скрещиваниями. После того, как опыление будет выполнено, накройте метелку родительской самки специальным микроперфорированным пакетом для хлеба и закрепите его у основания с помощью завязки.

После опыления и до сбора семян соберите семена через 14-16 дней после дня опыления и поместите бирку в тот же конверт, что и семена. Семена с красной маркировкой с обеих сторон представляют собой семена, полученные в результате контролируемого генетического скрещивания. Выбросьте все семена без красной маркировки, так как они представляют собой семена, полученные из недавно развившихся цветов.

После кастрации семена с красными отметинами, только с одной стороны, скорее всего, будут представлены семена, полученные в результате самоопыления. Наконец, просушите семена при температуре 30 градусов Цельсия в течение двух дней. Храните высушенные семена в лаборатории или, в идеале, в семенной камере.

Когда все будет готово к дальнейшему анализу, при необходимости удалите физику. Методы, описанные в этом видео, стали результатом многочисленных испытаний с использованием различных температур и времени обработки для оптимизации процесса кастрации. Успех этого процесса измерялся количеством полученных гибридных семян.

Шесть семян от одного из тестовых скрещиваний, где самец родителя нес репортера. Здесь показаны гены, кодирующие бета-глюкуронидазу. Репортерный ген заставляет семя становиться синим при окрашивании, что делает количество гибридных семян легко подсчитываемым После освоения можно скрещивать до 15 пентаклей в день, если процедура выполнена правильно.

После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как выполнять кроссы в Aria verus.