Почечная капсула ксенотрансплантации и подкожной гранулы Имплантация по оценке простаты канцерогенеза и доброкачественной гиперплазии предстательной железы

Методики, проиллюстрированные в этом видео, полезны в экспериментах по оценке гормональной регуляции канцерогенеза и доброкачественного роста предстательной железы. Сначала апелляционные прессы использовались для изготовления гормональных гранул, которые позволят осуществлять непрерывное введение. Далее готовятся стеклянные пипетки с закругленными кончиками после того, как почка будет экстериоризирована.

Наконечник пипетки используется для помощи при введении трансплантата. Затем сжатые гормональные гранулы имплантируются подкожно. В конечном счете, получены результаты, которые показывают влияние гормонального лечения на рост доброкачественных тканевых ксенотрансплантатов.

Техники, представленные в этом видео, просты в исполнении и воспроизводимы. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в этой области, например, как гормоны участвуют в трансформации доброкачественных клеток в злокачественные, а также как доброкачественный рост простаты регулируется гормонами. Применение этого метода распространяется на потенциальные новые методы лечения и стратегии профилактики доброкачественной ортопедической гиперплазии и рака предстательной железы.

Как правило, люди, которые являются новичками в этой технике, будут испытывать трудности с техническим аспектом почечной капсулы. Гранулы ксенотрансплантата готовятся в капюшоне химической безопасности при ношении надлежащего защитного снаряжения, чтобы начать тщательную очистку оборудования для производства гранул 70% этанолом для предотвращения перекрестного загрязнения. Затем взвесьте желаемое количество гормонального порошка, учитывая примерно 5% дополнительного материала для компенсации потерь во время прессования.

Для некоторых гормонов требуется связующее вещество или наполнитель, который подмешивают перед изготовлением гранул. Здесь эстрадиол сочетается с холестериновым наполнителем, в результате чего получается гранула весом 25 миллиграммов. После того, как все будет взвешено и объединено, переложите порошок в дсет.

Поместите краситель под пресс и сильно нажмите на рычаг, чтобы сжать гранулу. Используйте постоянное давление для поддержания постоянного отношения площади поверхности к объему. Затем переверните держатель красителя и снова нажмите рычаг вниз, чтобы выпустить гранулу.

Осмотрите гранулу на целостность и определите, находится ли конечная масса в желаемом диапазоне. Пеллеты могут быть изготовлены до операции и храниться в соответствии со стабильностью используемого гормона или препарата при ношении соответствующей защиты. Пропустите кончик стеклянной кондитерской пипетки через пламя, горелку Бунзена, чтобы создать отполированный огнем, закругленный кончик.

Поддерживайте постоянное и небольшое движение пипетки, чтобы избежать появления горячих точек. Затем поместите пипетку в пламя под углом примерно 60 градусов, чтобы получился изогнутый закругленный кончик. Этот наконечник будет использоваться для создания кармана для трансплантата под почечной капсулой.

Перед началом хирургической процедуры простерилизуйте все необходимые инструменты и подготовьте рабочую зону. После того, как животное будет должным образом обезболито, продезинфицируйте место операции с помощью повторных применений бетадина и спирта. После наложения стерильных простыней на эту область выполняется разрез по средней линии спины в два-три сантиметра.

Далее отделите нижележащую дерму от стенки тела. Отделите обе стороны разреза для двусторонней трансплантации или только одну для односторонней трансплантации. После отделения поместите мышь в боковое положение и найдите почку, наблюдая за профилем почек через мышечную стенку.

Мягкое надавливание большим и указательным пальцами может помочь визуализировать внутренние органы с помощью тонких ножниц радужной оболочки глаза и избежать крупных сосудов и спинномозговых нервов. Сделайте разрез в один сантиметр в стенке тела параллельно позвоночнику. Расширяйте этот разрез до полутора-двух сантиметров, аккуратно развернув ножницы пошире.

После их размещения в первоначальном разрезе выведите почку наружу, оказывая легкое давление снаружи мышечной стенки по обе стороны от почки. Затем подверните края кожи ниже наружной почки, которая будет опираться на стенку тела. Если присутствуют и другие структуры, их можно аккуратно подправить, пока почка находится снаружи.

Поддерживайте гидратацию почечной капсулы с помощью стерильного физиологического раствора. Аккуратно приподнять капсулу почки и сделать разрез на два-четыре миллиметра. Размер разреза определяется размером трансплантата, но должен быть сведен к минимуму, чтобы сохранить целостность капсулы.

Вставьте закругленный закрытый конец подготовленной ранее пипетки под капсулу по касательной к поверхности почки. После вставки аккуратно откройте небольшой карман для трансплантатов, проявляя большую осторожность, чтобы не повредить почку. Трансплантаты паренхиматозной ткани получают из свежей ткани предстательной железы, полученной в ходе хирургической резекции.

Приподнимите срезанный край капсулы почки и вставьте трансплантат в карман. С помощью наконечника пипетки можно поместить несколько графтов под капсулу почки и равномерно расположить их на поверхности почки. Когда пересадка будет завершена, аккуратно приподнимите боковые стороны разреза мышечной стенки, чтобы вернуть почку обратно в полость тела.

Следите за тем, чтобы привой не выскользнул из-под капсулы. Один шов используется для закрытия мышечной стенки перед тем, как приступить к подкожной имплантации гранул. Когда пересадка будет завершена, отделите подлежащую дерму от стенки тела в краниальном направлении.

Аккуратно приподнимите краниальную часть разреза кожи, чтобы создать карман, держа при этом гормональную гранулу Аккуратно с помощью прямых зубчатых щипцов введите гранулу в загривок. С помощью зубчатых щипцов выровняйте края кожи и наложите два-три хирургических зажима для закрытия разреза. В данном примере ксенотрансплантаты первичных тканей от пациентов с доброкачественной гиперплазией предстательной железы были дополнены экзогенным тестостероном.

В течение одного месяца наконечники стрелок обозначают места расположения ксенотрансплантатов. Почечная капсульная пластика также может быть использована для оценки гормонального канцерогенеза. Здесь клеточные рекомбинанты, содержащие доброкачественный эпителий предстательной железы и индуктивный урогенитальный мехи, образуют доброкачественные новообразования у нелеченных мышей.

В этом примере тот же трансплантат выращивается в организме хозяина, который получал подкожные гранулы тестостерона и эстрадиола в течение четырех месяцев и выбрал карциному предстательной железы, которая проникает в почечную капсулу. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как изготавливать и имплантировать прессованные гормональные гранулы, а также как создать пипетку из полированного стекла для хирургического вмешательства и выполнить ксенотрансплантат почечной капсулы. При попытке выполнить эту процедуру важно помнить о бережном обращении с почечной капсулой, поддержании влажности и не повреждении почечной паренхимы.

Могут быть применены другие методы, такие как гистология, иммуногистохимия и молекулярные методы для обнаружения R-N-A-D-N-A или белков, представляющих интерес. Это позволит лучше оценить характер наблюдаемого доброкачественного или злокачественного новообразования. Не забывайте, что гормоны, используемые в этих экспериментах, потенциально тератогенны и канцерогенны.

Производство спрессованных гормональных гранул всегда должно выполняться в химически безопасном капюшоне. На каждом этапе процедуры, описанной в этом видео, всегда следует надевать надлежащие средства индивидуальной защиты.