Выделение, очистка и маркировки Мышь нейтрофилов костного мозга для функциональных исследований и приемных Эксперименты Трансфер

Общая цель этой процедуры заключается в выделении и маркировке нейтрофилов из костного мозга мышей для последующих функциональных исследований и экспериментов по адоптивному переносу. Это достигается путем сбора клеток костного мозга из мыши, бедренной и большеберцовой костей. На втором этапе эритроциты осмотически шнуруются путем последовательного суспендирования их в 0,2% и 1,6% растворах натрия хлорида соответственно.

Затем нейтрофилы изолируют центрифугированием с градиентом плотности. На последнем этапе нейтрофилы помечаются клеточными трекерными красителями. В конечном счете, проточная цитометрия может быть использована для определения количества адоптивно переносимых нейтрофилов, рекрутируемых в различные ткани мыши.