Мышиный шейки Трансплантация сердца Модель с использованием модифицированного манжеты Техника
12 октября 2014 г.
Мышиный шейки модель трансплантация сердца хорошо подходит для иммунологических, а также исследований ишемии реперфузии. Мы изменили процедуру, используя технику манжеты без шва и проведено более 1000 успешных трансплантаций с этим подходом.
При этом, мы предоставляем дополнительные детали этой техники, чтобы дополнить видео.
Я являюсь членом Исследовательской лаборатории им. Даниэля Кентукки отделения висцеральной трансплантации и торакальной хирургии Медицинского университета Энсберга. Сегодня мы покажем вам модель гетеротопической трансплантации сердца Морина. Используя модифицированную технику наложения манжеты, животное-реципиент обезболивают внутримышечным путем внутримышечной инъекции INE и кетамина.
Затем удаляются все волосы в шейной боковой области и операционное поле трижды очищается хлоргексидином. Затем подготавливается операционное поле и животное укладывают в лежачее положение на операционное поле, мышь-донора обезболивают внутримышечной инъекцией оксил синуса и кетамина. Далее удаляются все волосы в области живота реципиентов и операционное поле трижды очищается хлоргексидином.
Далее подготавливается операционное поле и животное укладывается в лежачее положение на операционном поле. Как показано в этой последовательности, сердечные трансплантаты Carlo от доноров биопсии отторгаются в течение семи дней после трансплантации реципиентам полностью несовместимых MHC C 57 black six. Сингенные трансплантации сердца, выполненные в нашей серии, просуществовали бесконечно.
Несмотря на то, что гетеротопическая трансплантация сердца у мышей технически сложна, она остается золотым стандартом для любых механистических исследований in vivo, связанных с трансплантационной иммунологией. Наш модифицированный подход позволяет достичь высоких показателей успеха с базовыми микрохирургическими навыками, что позволит широко применять эту модель. Это видео призвано помочь другим исследователям создать модель в своих лабораториях.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Обзор
Модель трансплантации сердца мыши в область шеи является ценным инструментом для изучения иммунологических реакций и повреждений, вызванных ишемией-реперфузией. В данной статье подробно описан модифицированный метод бесшовного использования манжеты, с помощью которого было успешно выполнено более 1 000 трансплантаций сердца.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Биология трансплантации
- Иммунология
- Ишемически-реперфузионное повреждение
Теоретические сведения
- Мышиная модель имеет важное значение для понимания динамики трансплантации сердца.
- Ишемически-реперфузионное повреждение является критически важной областью исследований в трансплантологии.
- Иммунологические ответы могут существенно влиять на успех трансплантации.
- Инновационные хирургические методы могут улучшить результаты трансплантации.
Цель исследования
- Продемонстрировать модифицированную хирургическую технику трансплантации сердца.
- Повысить показатель успеха трансплантации сердца у мышей.
- Создать надежную модель для будущих иммунологических исследований.
Используемые методы
- Модифицированная техника бессшовного наложения манжеты при трансплантации сердца.
- Протоколы анестезии для мышей-доноров и реципиентов.
- Подготовка операционного поля с использованием хлоргексидина.
- Положение реципиента на спине во время операции.
Основные результаты
- Успешное проведение более 1 000 операций по трансплантации сердца.
- Продемонстрированная эффективность модифицированного метода наложения манжетки.
- Создание воспроизводимой модели для дальнейших исследований.
- Получение данных о хирургической подготовке и анестезии.
Выводы
- Модифицированная методика повышает показатели успешности трансплантации.
- Данная модель подходит для различных иммунологических исследований.
- В будущих исследованиях можно опираться на эту установленную методологию.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для отрасли
Модель трансплантации сердца мыши в шейную область представляет собой воспроизводимую систему in vivo для оценки иммунологических механизмов и выживаемости трансплантата в исследованиях по трансплантологии. Обеспечивая высокий уровень успеха сосудистого анастомоза с помощью модифицированной техники использования манжеты, данная модель позволяет снизить риски при изучении механизмов действия иммуномодулирующей терапии и вмешательств при ишемии-реперфузии. Это делает модель трансляционным связующим звеном для доклинической валидации биологических препаратов-кандидатов, направленных на достижение толерантности к трансплантату и его защиту.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Первичный поиск и валидация мишени
- Научная ценность: позволяет проводить функциональный анализ иммуномодулирующих мишеней в полностью иммунокомпетентной мышиной системе с аллотрансплантатами, несовместимыми по MHC.
- Практическая ценность: обеспечивает проходимость сосудов >95%, что снижает вариабельность экспериментов и повышает статистическую мощность исследований по валидации мишеней.
Скрининг и разработка анализа
- Научная ценность: Обеспечивает стандартизированную платформу для сосудистого анастомоза, что гарантирует стабильную перфузию трансплантата и воспроизводимое моделирование ишемическо-реперфузионного повреждения.
- Практическая ценность: Короткое время операции и высокий процент успеха позволяют масштабировать метод для проведения скрининговых кампаний, требующих длительного мониторинга функции трансплантата.
Трансляционные и доклинические исследования
- Научная ценность: Облегчает механистические исследования отторжения и толерантности трансплантатов, позволяя проводить доклиническую оценку биологических терапевтических средств в клинически значимых ортотопических гемодинамических условиях.
- Практическая ценность: Сингенные трансплантаты выживают неопределенно долго, служа внутренним контролем для снижения рисков при интерпретации механизмов в исследованиях аллотрансплантатов.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Данная модель интегрирована в континуум открытий — от валидации мишени до доклинических испытаний эффективности, что обеспечивает поддержку итерационных циклов «проектирование-создание-тестирование» для перспективных иммуномодулирующих препаратов.
- Фундаментальная биология: Позволяет проверять гипотезы о путях иммунных контрольных точек и цитокиновых медиаторах при отторжении трансплантата с использованием реципиентов линии C57BL/6 с полным несоответствием MHC.
- Скрининг: Обеспечивает количественную оценку времени выживаемости трансплантата и гистопатологическую оценку в качестве функциональных показателей эффективности соединений.
- Аналитика: Позволяет получать бинарные результаты выживаемости трансплантата и показатели времени до отторжения для статистического сравнения между экспериментальными группами.
- Трансляционные исследования: Связывает механистические выводы с доклиническими исследованиями путем моделирования гемодинамических условий, актуальных для человека, с помощью ретроградной перфузии через каротидно-аортальный анастомоз.
- Корпоративное использование: Создает многократно используемую хирургическую платформу, адаптируемую для программ терапии антителами, цитокинами и клеточной терапии, требующих долгосрочной оценки функции трансплантата.
Операционное и корпоративное влияние
- Научная ценность: Снижает механистическую неопределенность в иммунологии трансплантации за счет предоставления технически доступной и высокоточной мышиной модели.
- Операционная ценность: Стандартизированный анастомоз с использованием манжеты повышает воспроизводимость результатов в разных лабораториях и при выполнении операторами с базовой микрохирургической подготовкой.
- Стратегическая ценность: Позволяет принимать решения о продолжении или прекращении разработки (go/no-go) на более ранних этапах, снижая риск неудач на поздних стадиях из-за непредвиденных иммунологических механизмов.
- Влияние на портфель: Обеспечивает приоритизацию кандидатов с учетом рисков на основе подтвержденного взаимодействия с мишенью в сложной иммунной микросреде.
Особенности реализации
- Требуется опыт в микрохирургическом манипулировании сосудами и технике выворачивания манжеты.
- Зависит от наличия полиэтиленовых манжет, микрохирургических инструментов и оборудования для стереотаксического позиционирования.
- Необходимы стандартизированные протоколы анестезии и асептики для обеспечения высоких показателей успеха при работе разных операторов.
- Адаптация к альтернативным сосудистым руслам может потребовать оптимизации размера манжеты и подтверждения проходимости анастомоза.
- Долгосрочные результаты зависят от последовательного послеоперационного ухода и мониторинга функции и выживаемости трансплантата.
