-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

RU

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ru_RU

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Immunology and Infection
In vitro Coculture Assay для оценки патогена индуцированной нейтрофил трансэпителиальной...
In vitro Coculture Assay для оценки патогена индуцированной нейтрофил трансэпителиальной...
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

In vitro Coculture Assay для оценки патогена индуцированной нейтрофил трансэпителиальной миграции

Full Text
18,504 Views
14:14 min
January 6, 2014

DOI: 10.3791/50823-v

Mark E. Kusek1,2,3, Michael A. Pazos1,3, Waheed Pirzai3, Bryan P. Hurley1,3

1Department of Pediatrics,Harvard Medical School, 2Department of Pediatric Gastroenterology,MGH for Children, 3Mucosal Immunology and Biology Research Center,Massachusetts General Hospital

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study investigates neutrophil trans-epithelial migration in response to mucosal bacterial infection, which contributes to epithelial injury and disease. An in vitro model combining human neutrophils and polarized epithelial cell layers is utilized to explore the underlying molecular mechanisms.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Immunology
  • Cell Biology

Background

  • Neutrophils play a critical role in the immune response to infections.
  • Mucosal infections can lead to significant epithelial damage.
  • Understanding neutrophil migration is essential for developing therapeutic strategies.
  • In vitro models are crucial for studying complex biological interactions.

Purpose of Study

  • To quantify neutrophil migration across epithelial monolayers.
  • To assess the impact of bacterial infection on neutrophil behavior.
  • To establish a reliable experimental model for future research.

Methods Used

  • Collagen coating of transwells to support epithelial cell growth.
  • Inverted transwell filter technique for cultivating epithelial monolayers.
  • Infection of epithelial cells with cultured bacterial pathogens.
  • Quantification of neutrophil migration using myeloperoxidase assays.

Main Results

  • Significant increase in neutrophil migration observed in response to infection.
  • Quantitative data supports the role of epithelial cells in neutrophil attraction.
  • Visual demonstration of the method enhances accessibility for researchers.
  • Findings contribute to understanding the dynamics of immune responses in mucosal tissues.

Conclusions

  • The study provides insights into the mechanisms of neutrophil migration.
  • Establishing this model can aid in future investigations of epithelial-neutrophil interactions.
  • Results may inform therapeutic approaches to manage mucosal infections.

Frequently Asked Questions

What is the significance of neutrophil migration?
Neutrophil migration is crucial for the immune response, helping to clear infections and prevent tissue damage.
How does the in vitro model work?
The model uses transwell filters to grow epithelial monolayers and assess neutrophil migration in response to bacterial infection.
What methods are used to quantify neutrophil migration?
Myeloperoxidase assays are employed to quantify the number of neutrophils that migrate across the epithelial barrier.
Why is the inverted transwell filter technique important?
This technique allows for the cultivation of epithelial cells in a way that mimics natural conditions, enhancing the relevance of the findings.
What are the implications of this research?
Understanding neutrophil migration can lead to better therapeutic strategies for treating mucosal infections and related diseases.

Нейтрофиловая трансэпителиальная миграция в ответ на мукосал бактериальную инфекцию способствует эпителиальной травме и клиническим заболеваниям. В пробирке была разработана модель, которая сочетает в себе патоген, нейтрофилов человека, и поляризованных слоев эпителиальных клеток человека, выращенных на трансуэлл фильтры для облегчения исследований к распутыванию молекулярных механизмов организации этого явления.

Общая цель данного эксперимента заключается в определении количества нейтрофилов, которые пересекли монослой эпителиальных клеток в ответ на инфекцию. Это достигается за счет трансвеллов, кодирующих коллаген, перед тщательным культивированием монослоев эпителиальных клеток с помощью маневра инвертированного трансвелл-фильтра. В качестве второго этапа бактериальный патоген культивируется с целью инфицирования апикальной поверхности эпителиального монослоя, выращенного на фильтрах Transwell, что заставляет эпителиальные клетки продуцировать эндогенные нейтрофильные химиоаттрактанты.

Далее к базолатеральной стороне инфицированных эпителиальных монослоев, выращенных на трансвелл-фильтрах, добавляют выделенные из цельной крови нейтрофилы для анализа миграции нейтрофилов с базолатеральной на апикальную сторону. Получены результаты, свидетельствующие о значительном увеличении числа трансэпителиальных мигрирующих нейтрофилов, наблюдаемых в ответ на инфицированные эпителиальные монослои на основе количественного определения миелопероксидазы из мигрировавших нейтрофилов. Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение, поскольку маневр инвертированного трансвеллерного фильтра для роста и инфицирования эпителиальных барьеров является нетрадиционным и, следовательно, может быть менее доступным для незнакомых исследовательских групп для создания в их лаборатории.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Инфекция Выпуск 83 Клеточная биология Эпителий Нейтрофилов Псевдомонас aeruginosa Заболевания дыхательных путей нейтрофилов эпителиальные барьеры патогенные микроорганизмы трансмиграция

Related Videos

Выделение пупочной вены человека эндотелиальных клеток и их использование в изучении нейтрофилов Переселение в проточных условиях

08:54

Выделение пупочной вены человека эндотелиальных клеток и их использование в изучении нейтрофилов Переселение в проточных условиях

Related Videos

17.9K Views

Количественный В пробирке Анализе на определение адгезию нейтрофилов к активированным Первичные человеческие эндотелиальные клетки микрососудов в статических условиях

11:22

Количественный В пробирке Анализе на определение адгезию нейтрофилов к активированным Первичные человеческие эндотелиальные клетки микрососудов в статических условиях

Related Videos

18K Views

Количественный Анализ сотового мигрантах мышиных кишечных нейронных прародителей

08:26

Количественный Анализ сотового мигрантах мышиных кишечных нейронных прародителей

Related Videos

9.7K Views

Количественная оценка миграции нейтрофилов человека во культурный мочевого эпителия

11:20

Количественная оценка миграции нейтрофилов человека во культурный мочевого эпителия

Related Videos

15.6K Views

В режиме реального времени изображений эндотелиальных межклеточных соединений Во нейтрофилов Трансмиграция в физиологических Flow

11:26

В режиме реального времени изображений эндотелиальных межклеточных соединений Во нейтрофилов Трансмиграция в физиологических Flow

Related Videos

20.1K Views

Микроскопия на основе методов для оценки миграции эпителиальных клеток во время в Vitro заживление ран

08:34

Микроскопия на основе методов для оценки миграции эпителиальных клеток во время в Vitro заживление ран

Related Videos

10.1K Views

Роман в Vitro раны исцеления Assay для оценки миграции клеток

08:55

Роман в Vitro раны исцеления Assay для оценки миграции клеток

Related Videos

23.3K Views

Оценка миграции лимфоцитов в системе трансмиграции Ex Vivo

10:25

Оценка миграции лимфоцитов в системе трансмиграции Ex Vivo

Related Videos

7.4K Views

Обнаружение миграции и проникновения нейтрофилов в мышах

10:33

Обнаружение миграции и проникновения нейтрофилов в мышах

Related Videos

12.9K Views

Функциональная оценка кишечной проницаемости и трансэпителиальной миграции нейтрофилов у мышей с использованием стандартизированной модели кишечной петли

09:24

Функциональная оценка кишечной проницаемости и трансэпителиальной миграции нейтрофилов у мышей с использованием стандартизированной модели кишечной петли

Related Videos

8.1K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code