Качественная идентификация карбоновые кислоты, борной кислоты и аминов с использованием крестообразных Флуорофоры

Общая цель этой процедуры заключается в использовании низкомолекулярных четверок флоры, основанных на так называемой крестообразной геометрии, для анализа и качественного различения аналитов из нескольких классов соединений. Это достигается путем предварительного приготовления растворов этих крестообразных сенсоров в нескольких различных растворителях, что позволяет извлечь выгоду из их излучения с высокой степенью зависимости от растворителя. Второй шаг заключается в воздействии на эти растворы анализируемых веществ, представляющих интерес, включая карбоновые кислоты, ионные кислоты или органические амины, которые могут быть добавлены либо в виде твердых веществ, либо в виде раствора.

Затем комбинированные растворы аналита датчиков облучаются ультрафиолетовым светом с яркостью 365 нанометров, в результате чего они излучают свет в видимой области. Эти цвета излучения фотографируются с помощью стандартной цифровой фотосистемы. Заключительным этапом является генерация эмиссионных цветных панелей, которые используются для выявления качественных различий в эмиссии различных растворов аналитов.

В конечном счете, этот флуоресцентный метод будет полезен для быстрой идентификации распространенных аналитов в фармацевтической и пищевой промышленности. Основное преимущество этого метода перед существующими методами, такими как хроматография, заключается в том, что он позволяет напрямую анализировать высокополярные аналиты без необходимости принятия производного решения. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области рутинного контроля качества, где его можно использовать для быстрого определения того, является ли четко определенная композиция подлинной или она была скомпрометирована.

Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение, так как сам метод использует оптическое детектирование и из-за его конечного применения требует участия неспециализированных операторов. Демонстрировать процедуру будут Абель из Buns Laboratory в Гейдельберге и Rio Color Lire из моей лаборатории в Университете Хьюстона. Оба аспиранта сначала готовят свежие исходные растворы крестообразных веществ от одного до трех с концентрацией 50 мг на 10 миллилитров, дихлорметана, и отставляют в сторону.

Взвесьте 500 миллиграммов аналита карбоновой кислоты в шести 16-миллилитровых флаконах DR и добавьте 16 миллилитров дихлорметана, этилацетата, ацетонитрила nn, диметилформамида, изопропилового спирта или метанола. Далее добавьте в каждый флакон по 20 микролитров крестообразного исходного раствора и встряхните флакон, если неоднородный, дайте соответствующему раствору отстояться. Расположите незакрытые флаконы на стеклянной пластине под УФ-лампой с расстоянием между объективом камеры и флаконами с образцом 60 сантиметров.

Включите УФ-лампу и выключите свет в комнате. Делайте снимки с варьирующим временем экспозиции от 0,25 до 15 секунд для каждого раствора, чтобы получить изображения, отражающие цвет ремиссии. После этого приготовьте в соотношении 1,0 умножить на 10 к отрицательному четвертому молярному раствору крестообразной четверки в дихлорметане и отложить в сторону.

Затем приготовьте пять отдельных растворов для каждого аналита ионовой кислоты, растворив 50 мг аналита в трех миллилитрах ацетонитрила. 1, 2, 4, трихлорбензина и хлорметана, циклогене, и хлорбензина. Перелейте по 1,8 миллилитров каждого из растворов анализируемого раствора в пять отдельных кварцевых кювет размером 10 на 10 миллиметров.

Затем добавьте по 20 микролитров ранее приготовленного крестообразного раствора в каждую из пяти кювет и перемешайте два раствора до гомогенизации. Если наблюдаются какие-либо осадки, дайте соответствующему раствору отстояться. Поместите все пять веток Q на стеклянную пластину и облучайте их сверху.

С помощью портативной 365-нанометровой УФ-лампы убедитесь, что в комнате темно и немедленно сделайте цифровую фотографию цветов излучения растворов с расстоянием между объективом камеры и кюветами 45 сантиметров и выдержкой 0,5 секунды. Затем приготовьте не менее 80 миллилитров каждый из 1,0 умножить на 10 до отрицательных шести молярных растворов крестообразных четырех в ацетонитриле 1 2 4, трихлорбензолциклогексана и хлорметана и хлороформа растворить 152,6 миллиграмма двух шести DI хлорофилоновой кислоты в 40 миллилитрах каждого из крестообразных растворов. Отдельно растворите 97,6 миллиграмм фениловой кислоты в 40 миллилитрах каждого из крестообразных растворов.

Затем растворите 40 миллиграммов нужного аминового аналита в двух миллилитрах каждого раствора крестообразной ионной кислоты. Для каждого аналита Амина приготовьте пять растворов с двумя, шестью дихлорофиловой кислотой и пять растворов с фениловой кислотой в качестве добавок. Переложите аликвоты из 10 приготовленных растворов в 10 отдельных кварцевых кювет.

Поместите два набора из пяти вете на стеклянную пластину, облучите на 365 нанометров ручным ультрафиолетовым излучением и немедленно сфотографируйте с описанными ранее настройками с помощью программы обработки изображений. Вырежьте репрезентативный квадратный сегмент из цифровых фотографий цветов излучения каждого сфотографированного флакона. Затем организуйте эти вырезы в панели, подобные показанным здесь.

Если требуется количественная оценка различий в цвете излучения, извлеките значения красного, зеленого, синего цвета из панелей, а затем статистически обработайте их, чтобы получить относительные стандартные отклонения цветов излучения одного аналита относительно другого. Используйте следующее уравнение. Наконец, используйте уравнение для идентификации неизвестных аналитов карбоновой кислоты и для определения отклонения между неизвестным аналитом и всеми веществами набора калибровочных данных с использованием крестообразного фтора от одного до трех из шести различных растворителей. Было обнаружено, что флуоресцентные реакции зависят от концентрации и структурной идентичности изображенной карбоновой кислоты.

Вот записанный в цифровом виде цвет излучения всех четырех комбинаций растворителя карбоновых кислот флоры. Эта матрица демонстрирует 18 характеристических цветов излучения для каждого анализируемого вещества, которые могут быть использованы для однозначного определения характеристик и анализа с использованием красных, зеленых, синих значений цвета излучения. Все аналиты могут быть различимы относительно карбоновых кислот, от одного до 10, и идентифицированы, как показано на графике автокорреляции, с использованием полностью аналогичной процедуры.

Ионные кислоты от В от одной до В девять легко отличить друг от друга с помощью крестообразной четверки, о чем свидетельствует цветная панель излучения и показанный здесь график корреляции. Анализ аминов достигается с помощью situ двух сформированных комплексов крестообразных четырех с большим избытком добавок ионовой кислоты, двух шести дихлорофилоновой кислоты и фениловой кислоты. Эти комплексы, цвета излучения которых отличаются от чисто крестообразных, могут реагировать на аминные аналиты двумя способами.

Средство более основное, чем пурин, вытесняет крестообразную четверку из ее комплексов с добавками ионной кислоты, тем самым регенерируя цвета излучения чистых несложных крестообразных четырехугольников. С другой стороны, менее основные соединения, по-видимому, связываются с крестообразным комплексом ионовой кислоты, не разрушая его, и это приводит к модуляции флуоресцентного излучения комплексов. Таким образом, методология викарного зондирования характеризуется нивелирующим эффектом, при котором аналиты выше определенного порога больше не могут быть различимы друг от друга.

После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее понимание того, как анализировать карбоновые кислоты, барони-кислоты и другие средства с помощью простой установки, использующей крестообразную силу гриппа в наборе из нескольких различных растворителей. Не забывайте, что работа с органическими растворителями и ультрафиолетовыми лампами может быть опасной, и при выполнении этой процедуры всегда следует соблюдать меры предосторожности, такие как использование хорошо проветриваемых помещений и защитных очков.