Воспроизводимость Параплегия по торакальной окклюзии аорты в мышиной модели спинного мозга ишемии

Общая цель следующего эксперимента заключается в изучении эффектов ишемии спинного мозга на модели мыши. Для этого сначала в область бедренной артерии вводится лазерный допплеровский датчик. Затем выполняется стернотомия для получения доступа к дуге аорты и левой подключичной артерии.

Затем проводится тщательное препарирование аорты и подключичных артерий для адекватного снижения артериального кровотока в спинном мозге. Получаются результаты. Оценка послеоперационного неврологического дефицита проводится на основе шкалы Baso для мышей.

Основным преимуществом данной методики по сравнению с другими существующими методами, такими как латеральная торакотомия, является отсутствие нарушения целостности плевральной полости. Этот метод может помочь в изучении патофизиологии спинного мозга, ишемического性 повреждения при реперфузии, а также открыть возможности для фармакологического вмешательства. Значимость данной техники распространяется на методы терапии, направленные на предотвращение параплегии после ишемии спинного мозга.

Хотя данный метод позволяет изучить параплегию, осложняющую торакальную хирургию, он также может быть применен при других патологических процессах, вызывающих острую ишемию спинного мозга, таких как гипотония или сосудистые патологии. Как правило, специалисты, впервые осваивающие эту технику, сталкиваются с трудностями при диссекции дуги аорты, так как требуется крайняя осторожность во избежание летального исхода, кровотечения или пневмоторакса. Мы начали рассматривать применение данного метода после того, как столкнулись с рядом сложностей при использовании метода латеральной торакотомии, который широко описан в литературе, но привел к более высокой смертности у наших животных.

Визуальная демонстрация данного метода имеет решающее значение, так как при диссекции средостения требуется крайняя осторожность для предотвращения интраоперационной летальности. После проведения анестезии мыши согласно текстовому протоколу, при условии достаточной седации и удаления шерсти с осевой линии грудной клетки и вентральной поверхности левой нижней конечности, введите смазанный ректальный зонд в прямую кишку мыши и зафиксируйте его на операционном столе. Настройте подогрев стола для достижения целевой ректальной температуры 36.5 °C.

Затем сделайте небольшой разрез над бедренной артерией и отделите кожу от подкожной клетчатки. После этого установите зонд лазерного допплера над бедренной артерией. Отрегулируйте положение зонда до тех пор, пока монитор перфузии не зафиксирует значение более 800 единиц перфузии, чтобы приступить к диссекции дуги аорты и подключичной артерии.

Сделайте разрез кожи длиной два сантиметра над яремной вырезкой и осторожно отсепарируйте кожу от подкожной клетчатки. При возникновении кровотечения отсепарируйте поднижнечелюстную слюнную железу. Используйте ватную палочку, чтобы оказать легкое давление в аваскулярном слое.

Разделите поднижнечелюстную слюнную железу по срединной линии с помощью пинцета. Осторожно приподнимите грудину и ножницами аккуратно выполните стернотомию по срединной линии грудины длиной один сантиметр. Наложите пять ретракционных швов с каждой стороны по краю грудины и отведите грудину латерально, закрепив швы на операционном столе.

Затем с помощью тупой диссекции отделите грудино-подъязычные мышцы вдоль трахеи. После этого с помощью ножниц рассеките левую грудино-подъязычную мышцу для улучшения обзора. Выделите тимус, отделив его от окружающих тканей.

Продолжайте тупую диссекцию до визуализации магистральных сосудов. С предельной осторожностью, чтобы не попасть в плевральную полость, установите сосудистые зажимы на дугу аорты и левую подключичную артерию. Убедитесь, что дистальный кровоток был надлежащим образом перекрыт, что будет выражаться в снижении показателей перфузии более чем на 90%.

Продолжайте окклюзию от четырех до восьми минут. По истечении этого времени снимите сосудистый зажим и убедитесь в наличии гемостаза, после чего зашейте стернотомию и кожу. Начните со снятия удерживающего шва с левой стороны мыши.

Используйте правый ретракционный шов для закрытия стернотомии и наложите непрерывный шов нитью 5-0 для закрытия кожи. Поместите мышь в клетку на грелку для восстановления перед возвращением в обычную клетку с доступом к пище и воде. Следите за появлением признаков респираторного дистресса и, при необходимости, проведите эвтаназию в соответствии с утвержденным протоколом.

Наконец, для мониторинга состояния животных при оценке локомоции используйте шкалу Baso для мышей. С интервалом в 12 часов мышам проводили либо ложную операцию, либо окклюзию аорты продолжительностью от четырех до восьми минут. В послеоперационный период состояние животных оценивали по представленной здесь системе балльной оценки Baso для мышей.

На данном графике показано, что у мышей, которым была проведена имитация операции (шам-операция), в послеоперационном периоде не наблюдалось никаких функциональных нарушений. У мышей с умеренной ишемией через 12 часов функция задних конечностей была почти в норме, с последующим прогрессирующим ухудшением функции вплоть до полного паралича к 48 часам. У мышей в группе с длительной ишемией после операции наблюдался полный паралич без какого-либо восстановления функций.

После просмотра этого видео вы должны четко понимать, как безопасно вскрыть дугу аорты и адекватно снизить артериальный кровоток в спинном мозге.