Анализ инициации трансляции во время стресса кондиций полисом профилирования

18K просмотров

Цитируется: 24

10:59 мин.

19 мая 2014 г.

10.3791/51164-v

19 мая 2014 г.

18K просмотров

Laëtitia Coudert^*¹^,² , Pauline Adjibade^*¹^,² , Rachid Mazroui¹^,²

¹Department of Molecular Biology, Medical Biochemistry, and Pathology, Faculty of Medicine, Laval University, ²CHU de Quebec Research Center

^* These authors contributed equally

Здесь мы опишем метод для анализа изменений в инициации мРНК перевода эукариотических клеток в ответ на стресс условия. Этот метод основан на разделении скорости на градиентах сахарозы на перевод рибосом из не-переводные рибосом.

Больше видео

Градиент сахарозы

ультрацентрифугирование

вестерн-блот-анализ

цитоплазматические экстракты

рибосомальные фракции

автоматическое фракционирование

осаждение РНК

Chapters in this video

0:05

Название

1:45

Подготовка системы фракционирования на градиенте плотности и приготовление градиентов сахарозы

3:04

Приготовление клеточных экстрактов

5:10

Нанесение экстрактов на градиенты сахарозы и ультрацентрифугирование

6:03

Фракционирование цитоплазматических экстрактов для анализа полисомного профиля

6:46

Экстракция белка и РНК для анализа

8:45

Результаты: Анализ полисомного профиля выявляет изменения инициации трансляции в ответ на стрессовые условия

10:01

Заключение