Снизу вверх и дробовик протеомики для идентификации Комплексную Cochlear Proteome

18.4K просмотров

Цитируется: 7

14:23 мин.

7 марта 2014 г.

10.3791/51186-v

7 марта 2014 г.

18.4K просмотров

Lancia N.F. Darville¹ , Bernd H.A. Sokolowski¹

¹Department of Otolaryngology, Morsani College of Medicine, University of South Florida

Протеом анализ кохлеарного сенсорного эпителия может оказаться непростой задачей из-за его небольшого размера и потому мембранные белки трудно выделить и идентифицировать. Оба мембрана и растворимые белки могут быть идентифицированы путем объединения нескольких препаративных методов и методик разделения вместе с масс-спектрометрии высокого разрешения.

Больше видео

Протеомные методы

масс-спектрометрия

сильный катионный обмен

обращенно-фазовая хроматография

протеолиз

фракционирование без использования гелей

жидкостная хроматография

тандемная масс-спектрометрия

идентификация белков

Chapters in this video

0:05

Название

2:13

Экстракция белков

3:03

Переваривание всего лизата эндопротеиназой LysC и трипсином с использованием фильтрационного метода подготовки проб

5:34

Ионообменная хроматография

6:20

Фракционирование сенсорного эпителия улитки методом GELFREE

7:54

Переваривание белков фракций GELFREE с использованием фильтрационного метода подготовки проб

10:07

Результаты: идентификация мембранных и растворимых белков с помощью масс-спектрометрического анализа высокого разрешения

14:00

Заключение