Один шаг Очистка Твин-Стрептококковое-меченых белков и их комплексов на Стрептококковое-Tactin Смола, сшитые с бис (сульфосукцинимидил) суберат (BS3)

18.9K просмотров

Цитируется: 11

18:27 мин.

20 апреля 2014 г.

10.3791/51536-v

20 апреля 2014 г.

18.9K просмотров
 ,  ,  , 

Описан способ эффективного очищения твин-Strep-меченых гибридных белков и их специфических комплексов на модифицированной стрептавидином (Strep-Tactin) смолу, ковалентно сшитый с бис (сульфосукцинимидил) суберат (BS3). Способ имеет преимущества высокой скорости, хорошее восстановление белка-мишени и высокой степенью чистоты, и совместим с последующим анализом методом масс-спектрометрии.

Больше видео

Очистка с помощью Twin-Strep-tag

Chapters in this video

0:05

Название

0:11

Введение

1:32

Обзор

1:37

Конкурентное элюирование биотином

2:44

Денатурирующее элюирование SDS

3:26

Химическое сшивание смолы

4:10

Протокол

4:13

Сшивание смолы с помощью BS3

7:22

Гашение реакции сшивания

9:50

Связывание белка-приманки и ассоциированных комплексов со смолой

12:18

Промывка смолы

14:23

Элюирование специфических белковых комплексов

15:32

Репрезентативные результаты

17:18

Заключение

Related Videos