Тандем Замораживание высокого давления и резких похолоданий Замена тканей растений для просвечивающей электронной микроскопии

Общая цель данного эксперимента заключается в иммобилизации клеточных структур растительных клеток путем высокого давления, замораживания и быстрой заморозки для последующей визуализации с помощью просвечивающей электронной микроскопии. Это достигается за счет тщательной подготовки образца ткани к замораживанию путем кодирования его криопротектором, чтобы гарантировать, что ткань будет минимально повреждена при замораживании под высоким давлением. На втором этапе образец быстро замораживается под высоким давлением, что обездвиживает компоненты клетки и ограничивает образование кристаллического льда, в результате чего клетки имеют неповрежденную морфологию.

Затем выполняется быстрая свободная замена с целью замены клеточной воды органическими растворителями и введения фиксаторов, таких как тетраоксид осмия, связывая и стабилизируя клеточные ультраструктуры. Получены результаты, которые показывают, что замораживание под высоким давлением и быстрое замораживание эффективно сохраняют клеточные структуры и морфологию растений на основе просвечивающей электронной микроскопии. Основное преимущество этого метода перед существующими методами, такими как традиционная химическая фиксация, заключается в том, что H-P-F-Q-F-S иммобилизует клеточное содержимое за миллисекунды, сводя к минимуму образование артефактов.