Высоковоспроизводимого и простой метод, чтобы выполнить В Vivo Глазные Энуклеация в Мауса после Eye Открытие

Общая цель этой процедуры заключается в успешном удалении глаза у мыши, находящейся под наркозом, очень простым и воспроизводимым способом. Это достигается путем предварительного смещения глазного яблока путем осторожного надавливания на кантус изогнутыми щипцами. Вторым этапом процедуры является направление щипцов за глаз, чтобы прочно захватить зрительный нерв.

Третий шаг – делать круговые движения. Когда рука держит щипцы, тело мыши будет двигаться в том же направлении. Заключительным этапом является постепенное увеличение скорости движений для обеспечения сужения зрительного нерва, что приводит к отслоению глазного яблока.

В конечном счете, глаз может быть использован для изучения визуального пути AFR в продольном направлении, например, путем выявления различных процессов пластичности сенсорной депривации в мозге мыши. Основное преимущество этой методики перед существующими методами, в которых часто используются наложение швов и тупое рассечение, заключается в том, что наш метод просто основан на сужении зрительного нерва, что приводит к минимальному кровотечению или его отсутствию и очень легко освоить. Начните с обезболивания мыши с помощью внутрибрюшинной инъекции смеси кетамина и меина в физрастворе.

Подтвердите седацию, проверив рефлексы мыши. Зажмите пальцы ног щипцами и проверьте рефлекторную реакцию. Если реакции нет, то используйте аппликатор с ватным наконечником и 70% этанол для очистки век и области вокруг глаза.

Если реакция на моргание отсутствует, продолжайте зарождение глаза. Положите мышь на устойчивую, ровную, гладкую и сухую поверхность. Простерилизуйте кончики изогнутых зубчатых щипцов в стерилизаторе со стеклянными шариками.

Оптимальный размер наконечника для использования – 0,5 на 0,4 миллиметра. Затем осторожно надавите щипцами на кантус до тех пор, пока глазное яблоко не сместится из глазницы и зрительный нерв не станет доступным. Затем направьте щипцы за глаз и сильно нажмите и удерживайте зрительный нерв, захватив зрительный нерв Медленно начните двигать щипцы по кругу в направлении наименьшего сопротивления.

Прижав мышь к операционному столу, мышь должна быть закреплена. Его тело также должно двигаться. Постепенно ускоряйте движение до тех пор, пока после 7-15 круговых движений зрительный нерв не сузится, а глазное яблоко не отсоединится.

Если вращения будут слишком быстрыми или щипцы будут натянуты слишком сильно, нерв будет преждевременно разорван, и за этим последуют мольбы. Начните с отмены анестезии. Сделайте мышке внутрибрюшинную инъекцию аамаз с гидрохлоридом в физрастворе.

Затем внутримышечно вводят 0,05. Миллилитры готового обезболивающего, такого как мелоксикам и анальгезия, следует вводить каждые 24 часа. Теперь нанесите глазную мазь на оставшийся глаз, чтобы предотвратить обезвоживание роговицы.

Если бы это было нанесено до операции, оно бы размазывалось по столу. Переместите мышь в клетку, контролируйте температуру тела мыши с помощью нагревательной пластины или одеяла, пока она восстанавливается, когда животное восстанавливает двигательный контроль, перенесите ее обратно в домашнюю клетку. Успешное удаление глаза характеризуется отсутствием кровотечения или какого-либо видимого физического повреждения орбитальной ткани или глазницы.

Энуклеированный глаз должен иметь черты неповрежденного глазного яблока, такого как гладкая роговица и сосудистая оболочка. Зрительный нерв должен быть сужен у основания сетчатки. Оставшаяся длина нерва на животном должна показывать чистый порез, а окружающая область мозга не должна быть повреждена.

Был проведен эксперимент с использованием этих методов с последующим обнаружением мРНК Z 2 68 с помощью радиоактивной гибридизации в C-2 для выявления визуально индуцированной нейронной активности в коре головного мозга. В отличие от визуально стимулированной контрольной группы, мыши с обоими глазами и ядро показали базальную активность в левой и правой зрительной коре из-за полного отсутствия визуального входа. Таким образом, были выявлены границы между зрительной и незрительной корой.

Монокулярная энуклеация показала, что две монокулярные области являются гипоактивными в зрительной коре, контралатеральной к удаляемому красителю. Эти области расположены медиально и латерально к центральной бинокулярной зоне. После освоения этой техники ее можно выполнить менее чем за одну минуту, если она выполнена правильно.

Таким образом, он обеспечивает эффективный метод исследования активности, пластичности или других явлений в зрительном пути ЛОР-органов.