11 октября 2014 г.
Хотя известной модели, морская свинка настоящее время представляет собой нишу в экспериментальных науках животных и ограниченные данные о выполнении большинства процедур. Здесь мы представляем четыре различных подхода к не-терминала в естественных методов отбора проб крови в любом сознательных или наркозом морских свинок.
Общая цель этого видео — проиллюстрировать методологию четырех различных методов забора крови у морских свинок. Показанные процедуры не являются конечными, если объем или количество образцов не превышает рекомендуемые показатели для сбора крови. У лабораторных животных здесь мы видим причину боковой глазной вены и тарзальной вены.
Узная вена проходит дорсально и латерально над тарзальным суставом. С каждой задней ноги следует взять максимум три образца, и на один образец можно собрать примерно от 100 до 400 микролитров крови. Необходимое оборудование включает в себя электробритву, ванну с теплой водой, чистое полотенце, немного ваты, дезинфицирующее средство, например, 70% спирт, стерильные иглы, 21 пробирку для сбора или меньше.
А если цель состоит в том, чтобы измерить уровень глюкозы в крови с помощью пробоотборника AccuCheck, забор крови из цефеуса или тарзальной вены может быть сделан у морских свинок без анестезии. Морскую свинку удерживает обученный помощник и следует использовать септическую технику. Шерсть, покрывающая область предплюсны, сбривается электробритвой, а задняя лапа моется и разогревается на теплой водяной бане.
Помимо очистки ноги, это заставляет вены расширяться и становиться более заметными. Задняя нога выпрямляется, и стаз достигается путем мягкого давления вниз чуть выше колена, что позволяет вене стать видимой непосредственно перед забором пробы. Выбритый участок протирают дезинфицирующим средством.
Вену прокалывают иглой или ланцетом, а кровь можно собрать в капиллярную или микротную трубку. Когда кровь собрана, застой смягчается и на него оказывают мягкое давление с помощью кусочка ваты Для облегчения гемостаза здесь можно увидеть поверхностные артерии и вены на тыльной поверхности уха морской свинки. Эти сосуды можно использовать для забора крови, когда требуется только очень небольшой объем.
Одним из примеров может быть измерение уровня глюкозы в крови. Морскую свинку мягко удерживают, оставляя ухо доступным. Место прокола должно быть подготовлено септически перед взятием пробы, но бритье не требуется.
Небольшое давление может быть приложено к основанию уха, чтобы сделать вены более заметными. Вену прокалывают иглой или ланцетом, а кровь собирают в капиллярную трубку или сразу анализируют на уровень глюкозы в крови с помощью системы проб AccuCheck. Когда кровь была собрана, к месту прокола следует приложить мягкое давление, чтобы облегчить гемостаз.
На этом рисунке показано положение морской свинки для забора яремной крови и причина возникновения яремной вены. Процедура проводится исключительно на животном, находящемся под наркозом. Необходимое оборудование включает препараты для анестезии и электробритву, вату, дезинфицирующее средство, такое как стетоскоп с 70%-ным спиртом, нейтральную глазную мазь, один миллилитр шприцев, стерильные иглы, обычно 23 или 25.
Gorge Heparin и EDTA можно использовать для промывания шприцев перед взятием проб с целью предотвращения коагуляции. Для морских свинок существует множество протоколов анестезии. В этом случае животных обезболивают сбалансированной анестезией со смесью соли тайл синус и бут, вводимой подкожно в область шеи.
Эту смесь можно разбавить физиологическим раствором, чтобы сделать дозирование более точным. После инъекции морскую свинку следует вернуть в клетку и оставить в покое. Эффект окружения обычно проявляется примерно через 10 минут и длится от 30 до 40 минут перед отбором проб.
Глубина анестезии оценивается путем проверки рефлексов и дается нейтральная глазная мазь для защиты глаз. К яремной вене приближаются с помощью морской свинки, лежащей на спине, а передние ноги втягиваются четверть. Область бреется и подготавливается асептично, ключица пальпируется, а игла на 23 горла, установленная на одномиллилитровый шприц, вводится примерно на один сантиметр латерально от средней линии, как раз в череп дорсально к ключице.
Шприц следует держать под небольшим углом вверх и медиально. Как только кожа проникает, на шприц оказывается небольшое отрицательное давление, так как яремная кость расположена довольно поверхностно и глубина введения составляет около трех-четырех миллиметров. Когда образец будет собран, ослабьте напряжение передних ног и слегка надавите на сторону прокола.
Затем животное может быть возвращено в клетку для восстановления, но должно находиться под наблюдением, чтобы обеспечить гемостаз и восстановление после анестезии. Когда морская свинка полностью оправится от анестезии, она может вернуться в свой загон. Анатомические особенности морской свинки немного отличаются от таковых у других моделей грызунов, и модуляция методов отбора проб необходима для учета видовых различий и получения образцов достаточного качества в кратчайшие сроки.
Как долгосрочные, так и краткосрочные. Исследования in vivo часто требуют повторного забора крови. Выбор методики должен быть тщательно продуман с целью снижения стресса и дискомфорта и обеспечения приживаемости, а также соблюдения требований по размеру выборки и доступности.
Все описанные методы были тщательно протестированы и успешно применены для повторного забора крови in vivo. В исследованиях в нашем исследовательском центре морская свинка представляет собой нишу в экспериментальной науке о животных, но доступны ограниченные данные о выполнении основных процедур. В этой видеостатье мы представили четыре различных подхода к отбору образцов крови in vivo у животных, находящихся в сознании, или у животных, находящихся под наркозом, при условии, что объемы и количество образцов не превышают рекомендации по сбору крови у лабораторных животных.
Эти процедуры рекомендуются для использования у морских свинок, когда требуется повторный забор крови. В протоколе обучения.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данном видео демонстрируются четыре метода нетерминального забора крови у морских свинок как в сознании, так и под анестезией. Эти методы имеют решающее значение для исследователей, работающих с данным модельным организмом, по которому доступно ограниченное количество процедурных данных.
Нетерминальный забор крови у морских свинок обеспечивает возможность проведения лонгитюдных исследований in vivo, позволяя многократно собирать высококачественные образцы при соблюдении норм благополучия животных. Данная возможность имеет решающее значение для доклинических фармакокинетических и фармакодинамических оценок, где серийный забор проб позволяет судить о взаимодействии с мишенью и снизить риски при анализе механизмов действия. Описанные методики восполняют методологический пробел в этой узкоспециализированной, но трансляционно значимой модели, повышая достоверность данных для рабочих процессов раннего поиска новых лекарственных средств.
Данные методы отбора проб интегрируются в рабочие процессы по поиску новых биологических мишеней, обеспечивая получение надежных биологических матриц для анализа целевых путей и оценки соединений-лидеров.