Ослабление сигнала в крысиной модели обсессивно-компульсивное расстройство

Общая цель этой процедуры состоит в том, чтобы вызвать компульсивное поведение у крыс для изучения обсессивно-компульсивного расстройства. Это достигается путем предварительного обучения крыс сбору пищи, за которым следует сложный стимул, состоящий из света и тона. Второй шаг состоит в том, чтобы научить крыс нажимать на рычаг для получения пищевого вознаграждения, которое сопровождается сложным стимулом.

Далее, сигнальные свойства сложного стимула ослабляются при повторном воздействии без пищевого вознаграждения и предъявления рычага. Заключительным этапом является измерение срабатывания рычага, нажатия после затухания сигнала. В конечном счете, процедура затухания сигнала приводит к увеличению числа нажатий на рычаг, за которыми не следует попытка собрать вознаграждение за еду.

Основное преимущество этой методики по сравнению с существующими методами, такими как «Товарищи по команде с мрамором», «Чередование» и т.д., заключается в том, что она высоко валидирована, высоко селективна в отношении антикомпульсивных препаратов, дифференцирует компульсивное поведение и поведение, которое является повторяющимся, но не компульсивным, и использует количественные показатели, непредвзятые и не подверженные влиянию вариабельности между экспериментаторами. Применение этой техники распространяется и на терапию ОКР, поскольку она может быть использована для выявления анти- и прокомпульсивных эффектов новых фармакологических и нефармакологических манипуляций. Первым шагом является обращение с крысами в течение примерно двух минут в день в течение пяти дней до начала исследования.

В первый день обработки начните 22-часовой график ограничения приема пищи. Предоставьте крысам доступ к пище на два часа в их домашних клетках, не ранее, чем на 30 минут. После обработки всегда предоставьте крысам свободный доступ к воде.

В последние три дня обработки поместите от 20 до 30 гранул корма на небольшой лоток внутри домашней клетки. Убедитесь, что каждая крыса съедает не менее двух гранул. Для этого протокола необходимы смежные комнаты.

Один из них используется в качестве зала ожидания для содержания крыс перед использованием, а другой вмещает оперные залы, используемые во время тестирования, транспортируйте крыс в зал ожидания не менее чем за 15 минут до начала поведенческого тестирования Чтобы акклиматизироваться в первый день обучения журналу, положите достаточное количество пищевых гранул в пищевой журнал, чтобы они были видны крысе. Один из способов сделать это — разместить гранулы так, чтобы откидная панель оставалась слегка открытой. Поместите крыс в оперантные камеры и через пять минут убедитесь, что все гранулы собраны.

Если они уже приступили к программе обучения. Если нет, дайте еще пять минут, чтобы начать тренировку. В доме включается свет, и в пищевой магазин опускается одна пищевая гранула.

После пятисекундной переменной задержите составной стимул, состоящий из индикатора магазина, и звуковой сигнал подается одновременно с пищевой гранулой. Составной стимул и свет в доме выключаются после того, как голова крысы попадает в пищевой магазин. Или через 15 секунд, в зависимости от того, что наступит раньше.

Для начала настройте оперантную камеру так, чтобы присутствовал усиленный рычаг и горел свет в доме. В течение всей тренировки положите несколько гранул на рычаг перед тем, как поместить крысу в камеру, позвольте крысе исследовать, пока она не нажмет на рычаг, собирая гранулы пищи. Это вызовет доставку одной пищевой гранулы и начало действия сложного стимула.

Составной стимул выключается после того, как голова крысы попадает в пищевой магазин для завершенного испытания или через 15 секунд для незавершенной пробной программы, сеанс прекращается после того, как крыса достигнет 30 завершенных попыток. Если у животного возникают трудности в освоении рычажного нажатия, используйте формование во время формообразования. Держите дверцу звукоизолирующей наружной камеры открытой и наблюдайте за крысой в оперантной камере.

Когда крыса приблизится к рычагу, используйте программное обеспечение для активации доставки пищевой гранулы и начала действия сложного стимула. В начале. Укрепляйте крысу, когда она находится в непосредственной близости от рычага, но постепенно начинайте укреплять ее только тогда, когда она вступает в реальный физический контакт с рычагом.

И, наконец, подкрепляйте только попытками надавить на него. Запрограммируйте камеру таким образом, чтобы о начале каждого испытания сигнализировало появление света в доме. А через пять секунд ввод обоих рычагов.

Поместите крыс в оперантные камеры, а затем активируйте программу обучения в первый день обучения. Определите составной стимул, который будет отключен через 15 секунд. Чтобы облегчить получение рычага, нажмите ответ в течение следующих двух дней.

Определите, что составной стимул должен длиться всего 10 секунд. Чтобы убедиться, что вход в магазин точно следует за рычагом, нажмите на ответы. После каждого испытания используйте программу 32-го межсудебного интервала.

Тренировка по нажатию на рычаг для остановки бега после того, как крыса нажмет на усиленный рычаг и соберет гранулы пищи 40 раз. После обучения случайным образом распределите крыс по разным экспериментальным группам, убедившись, что статистически значимых различий между группами нет. Процедура затухания сигнала идентична обучению в магазине, за исключением того, что дозатор гранул пуст и гранулы с пищевыми продуктами не подаются с началом действия составного стимула.

К концу обучения. Убедитесь, что крысы не пытались собрать пищевую гранулу, вставляя голову в пищевой магазин после начала действия сложного стимула более 14 раз. Чтобы начать очередную фазу затухания, приведите крыс в комнату ожидания на период времени, эквивалентный средней продолжительности стадии затухания сигнала.

Выполните процедуру тестирования таким же образом, как и тренировку с помощью рычажного пресса, за исключением того, что в этих условиях диспенсер гранул остается пустым, нажатие на усиленный рычаг приводит к подаче составного стимула, но пища не подается. После помещения крысы в патронник запишите количество чрезмерных нажатий рычага, за которыми не последовал ввод в магазин, а также тех, которые были дополнительно, запишите количество нажатий рычага на неусиленный рычаг и количество тычков носом. На этом рисунке показана репрезентативная реакция дозы после затухания сигнала.

Как количество чрезмерных рычажных нажатий с последующим вводом в магазин, так и количество незавершенных рычажных нажатий уменьшались при более высоких дозах препарата. На этом рисунке сравниваются эффекты затухания сигнала и регулярного вымирания на крысах, подвергшихся воздействию физиологического раствора и наркотиков. Препарат уменьшал количество чрезмерных нажатий на рычаг с последующим входом в магазин в обеих процедурах.

Кроме того, это уменьшало количество незавершенных нажатий рычага при затухании сигнала, но не при обычной процедуре затухания. После этой процедуры могут быть выполнены другие методы, такие как гистологический и биохимический анализ, чтобы ответить на дополнительные вопросы, касающиеся нейроанатомических изменений и участия различных нейротрансмиттерных систем в нажатии на рычаг. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как вызвать компульсивное поведение, научив красных нажимать на рычаг в присутствии сложного стимула, как в дальнейшем ослабить этот стимул.

И, наконец, как оценить влияние этого затухания на поведение лева-пресса.