Электропорация функциональных бактериальных эффекторов в клетках млекопитающих

9.7K просмотров

Цитируется: 7

08:39 мин.

19 января 2015 г.

10.3791/52296-v

19 января 2015 г.

9.7K просмотров

Ryan L. Sontag¹ , Cosmin Mihai² , Galya Orr² , Alexei Savchenko³ , Tatiana Skarina³ , Hong Cui³ , John R. Cort¹ , Joshua N. Adkins¹ , Roslyn N. Brown⁴

¹Biological Sciences Division, Pacific Northwest National Laboratory, ²Environmental Molecular Science Laboratory, Pacific Northwest National Laboratory, ³Structural Proteomics Group, Ontario Center for Structural Proteomics, University of Toronto, ⁴Center for Bioproducts and Bioenergy, Washington State University

Электропорация была использована для введения очищенных бактериальных эффекторных белков вирулентности непосредственно в живые эукариотические клетки. Локализацию белка контролировали с помощью конфокальной иммунофлуоресцентной микроскопии. Этот метод позволяет проводить исследования транспорта, функции и белок-белковых взаимодействий с использованием активных экзогенных белков, избегая необходимости гетерологичной экспрессии в эукариотических клетках.