Эффективная генерация специфических для нокина репортеров hiPSC Neural Lineage с использованием системы CRISPR/Cas9 и Cas9 Double Nickase

10.5K просмотров

Цитируется: 5

14:46 мин.

28 мая 2015 г.

10.3791/52539-v

28 мая 2015 г.

10.5K просмотров

Shenglan Li^*¹^,² , Haipeng Xue^*¹^,² , Bo Long¹^,²^,⁵ , Li Sun¹^,²^,⁶ , Tai Truong¹^,²^,⁴^,⁷ , Ying Liu¹^,²^,³

¹Department of Neurosurgery, The University of Texas Health Science Center at Houston, ²Center for Stem Cell and Regenerative Medicine, Brown Foundation Institute of Molecular Medicine, The University of Texas Health Science Center at Houston, ³The Senator Lloyd & B. A. Bentsen Center for Stroke Research, Brown Foundation Institute of Molecular Medicine, The University of Texas Health Science Center at Houston, ⁴Summer Research Program, Office of Educational Programs, The University of Texas Health Science Center at Houston, ⁵Department of Anesthesiology, Shengjing Hospital, China Medical University, ⁶Department of Oncology, Renji Hospital, Shanghai Jiaotong University School of Medicine, ⁷Biology Department, University of West Georgia

^* These authors contributed equally

Инструменты редактирования генома, такие как система CRISPR (Clustered Regular Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas (CRISPR-ассоциированная), значительно повысили эффективность нацеливания на гены в индуцированных плюрипотентных стволовых клетках человека (hiPSCs). В данной рукописи описан протокол генерации специфичного для линии репортера hiPSC с использованием гомологичной рекомбинации с помощью системы CRISPR/Cas.