Мышиные трансплантации почек Техника

Общая цель этой процедуры — продемонстрировать модифицированную технику артериального анастомоза для трансплантации почки у мыши. Это достигается путем тщательного рассечения соответствующих сосудов у донора. Вторым этапом является создание манжеты для пятки и пальца ноги донорской брюшной аорты, прилегающей к почечной артерии.

Далее эта манжета для пятки и носка используется для формирования артериального анастомоза у реципиента. В конечном счете, этот метод должен привести к очень низкому уровню артериального тромбоза. В этом видео вы узнаете, как создать артериальную пятку и манжету для пальцев ног для облегчения трансплантации почек во рту.

Основным преимуществом данной методики резистентных методов является то, что путь кровотока от аорты реципиента в донорскую почечную артерию выпрямляется, в результате чего происходит снижение активации тромбоцитов и образование тромбозов. Время сбора урожая составит от 15 до 20 минут. Снимите шерсть, а затем удерживайте животное.

Подготовьте место операции, промыв кожу повидон-йодом, накиньте мышь и начните операцию с двухсантиметрового разреза живота по средней линии. Втяните кишечник на грудную клетку и заверните его во влажную марлю. Поддерживайте марлю влажной на протяжении всей процедуры.

Теперь найдите большие сосуды брюшной полости и мобилизуйте их. Любые ветви поясницы должны быть либо прижжены, либо перевязаны 10 нулевым нейлоновым швом. Затем прямо рассекаем двухмиллиметровый участок нижней полой вены и аорты дистальнее левых почечных сосудов.

Затем перевязывают и разделяют любые мелкие артериальные и венозные ветви, которые прикрепляются к почечному сосуду. Продолжайте тупое рассечение, чтобы отделить почечную вену от почечной артерии, что позволит впоследствии создать пластырь Кэрролла на проксимальном конце почечной вены, этот пластырь будет использоваться для формирования венозного анастомоза. Далее понравится и разделите сосуды левого надпочечника, чтобы получить доступ к надпочечной аорте.

После доступа закрутите шесть зеро шелка. Наложение швов вокруг надпочечной аорты для последующего использования. Теперь мобилизуйте почечные сосуды и мочеточник из окружающей фасции.

Поверните почку вправо с задней стороны, перевяжите и разделите любые сосудистые ветви, сосредоточившись в мочеточнике. Аккуратно освободите мочеточник от окружающей фасции. Не нарушают работу ворот почек и сохраняют эротические сосуды.

Далее разделите мочеточник на уровне протока. Теперь почка может быть восстановлена. Сначала медленно введите 300 единиц гепарина в дистальный отдел НПВ для гепаринизации донора.

Во-вторых, завяжите шов с шестью нулями вокруг надпочечной области. Затем перфузируют левую почку из брюшной аорты, вводя 0,8 миллилитра физиологического раствора гепарина в дозе 100 единиц на миллилитр. После перфузии сразу же создайте венозный кариловый пластырь, тем самым избегая обратного тока в почку.

Втяните почечную вену к почке, чтобы открыть АА и почечную артерию. Теперь разделите аорту, прилегающую к почечной артерии. Сделайте каблук и застегните манжеты.

Затем, если требуется ноль минут холодной ишемии, переложите выздоровевшую почку в подготовленный реципиент. В качестве альтернативы можно перенести органы в камеру хранения с температурой четыре градуса Цельсия, а затем усыпить доноров, как указано в текстовом протоколе. Эта процедура займет от 35 до 45 минут, как и для донорской анестезии.

Реципиент также дополняет первоначальный болюс по мере необходимости. Снабдите получателя офтальмологическим кремом. Затем сделать животному инъекцию бупренорфина и продолжить его введение после процедуры, сделав первоначальный разрез и смещение кишечника, как это было сделано с донором, провести правую нефрэктомию, перевязать почечную артерию и вену шестью нулевыми швами и разделить мочеточник проксимальнее почки шестью нулевыми швами.

Затем иссекают почку дистальнее сосудистого шва. Теперь ниже почечных сосудов изолируйте АА и НПВ, которые затем находятся выше места анастомоза. Поместите галстук из четырех нулевых хлопков вокруг аорты и ИВК проделайте то же самое ниже участка.

Любые поясничные сосуды, обнаруженные в этой области, должны быть либо прижжены, либо перевязаны 10 нулевым нейлоновым швом, плотно не тем швом, который находится ниже, и плотно не швом, который является верхним. При этом в аорте будет сохраняться некоторое количество крови, облегчающей аутотомию AOR. Выполните атомизацию с помощью иглы 30 калибра, затем продлите разрез до длины около двух миллиметров с помощью тонких микроножниц.

Следующим этапом является проведение эндоанастомоза от донорской пятки и манжеты пальца ноги до аорты реципиента. Сначала наложите остаточный шов в пятке донорской аорты с 10 нулевым швом. Продолжайте это через нижний конец разреза в аорте реципиента и перевяжите.

Во-вторых, наложите шов на 10 нулевых швов на верхнем конце разреза аорты и продолжите его через носок донорской манжеты и завяжите. В-третьих, начиная с верхнего конца, наложите жидкий шов на боковой стенке аорты и завяжите ранее установленный нижний шов. Затем переверните почку и продолжайте наложение шва вдоль медиальной стенки и завяжите верхний стежок.

Завершите венозный анастомоз, проколов НПВ иглой, а затем расширив разрез тонкими микроножницами. Используя 10 нулевого нейлона, привяжите донорскую почечную вену к нижнему углу НПВ. Наложите еще один 10 нулевой шов на верхний конец НПВ и донорскую вену и сделайте бегущий шов с обеих сторон.

Как и в случае с артериальным анастомозом, выворачивание краев тканей способствует уплотнению и заживлению. Теперь проверьте свою работу. Противоположные стенки не должны быть зажаты швами, иначе кровоток будет слишком ограничен.

Еще один жизненно важный фактор, обеспечивающий оптимальное натяжение линии шва анастомоза: слишком слабо и произойдет необратимое протекание, слишком туго и будет стриктура для вытекания. Если на артериальной стороне, то это приведет к плохой обильности трансплантата. Если на венозной стороне, это приведет к застойным заболеваниям почек.

Как только анастомоз будет завершен, освободите дистальную хлопчатобумажную уздечку, чтобы наладить венозный отток. Затем постепенно ослабляют проксимальную уздечку и промывают для гемостаза в месте артериального анастомоза. Когда оба анастомоза подтверждены как безопасные, вот мочевой пузырь реципиента с помощью иглы 20 калибра, делающей два отверстия, пропускает щипцы через отверстия и протягивает донорский мочеточник через мочевой пузырь.

Затем закрепите проксимальный конец мочеточника к стенке мочевого пузыря 2 10 0 швами. Обрежьте лишнюю длину выступающего мочеточника, чтобы он втягивался внутрь мочевого пузыря. Затем закройте другое отверстие в мочевом пузыре 10 нулевым швом.

Завершите операцию заменой кишечника, закрыв брюшную полость в два слоя с помощью наложения пяти нулевых шелковых швов и введения одного микролитра физиологического раствора в брюшную полость перед закрытием. После закрытия брюшной полости введите еще 0,8 миллилитра физиологического раствора подкожно и восстановите животное на теплом одеяле За один год сбора данных этот метод значительно снизил частоту артериального тромбоза с 35% до 0%, и этот показатель 0% тромбоза сохраняется с тех пор, как иммуногистохимия была проведена на нетрансплантированной почке и пересаженной почке. С помощью описанной методики с помощью периодического окрашивания кислотным сдвигом были выявлены нормальные проксимальные канальцевые клетки в контрольной и донорской группах.

Клетки имеют кубовидную форму с прозрачной цитоплазмой и круглым светлым ядром в середине клетки для обеих стрелок. Укажите на признаки легкой травмы каймы, но большинство бордюров регулярно и хорошо сохранились. После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее понимание того, как выполнять анастомоз артериальной пятки и чашки пальца ноги, что приведет к уменьшению случаев тромбоза и более успешной трансплантации почек.