Протокол жилищно мышей в обогащенной среде

Цель этой процедуры состоит в том, чтобы предоставить информацию, необходимую для содержания и содержания животных в условиях обогащения окружающей среды, что оказывает сильное метаболическое и противораковое воздействие на мышей. Это достигается путем создания обогащенной жилой среды в большом бункере с такими объектами, как колеса, ходовые источники, домики, трубки, бревна и клетки. Второй шаг – познакомить животных с новой средой.

Во-вторых, обогащенная среда поддерживается за счет изменения местоположения и типа объектов в мусорном ведре и обеспечения свежей пищей и водой на регулярной основе. Последним шагом является очистка объектов, которые были заменены в окружающей среде, чтобы они были готовы к обмену в будущем. В конечном итоге, после эвтаназии и анализа тканей животных.

Этот метод обогащения окружающей среды показывает снижение ожирения, повышенное сопротивление расходу энергии на фоне ожирения, вызванного диетой, и фенотипическое переключение белого на бурый жир путем активации гипоталамической сим нейронной оси адипоцитов. Этот метод подробно описывает создание обогащенной среды для лабораторных грызунов, повышающей устойчивость к раку и метаболическим заболеваниям. Сначала распылите и протрите внутреннюю часть большого контейнера для обогащения спорицидином дезинфицирующими средствами.

Следуя инструкциям производителя, протрите мусорное ведро 30% этанолом или смоченной в водопроводной воде бумагой, полотенцем и сушилкой бумажным полотенцем, чтобы избавиться от запаха предыдущего дезинфицирующего средства. Используйте иглу из пластиковых трубок с колесами типа SOR и другие различные игрушки из пластика в обогащенной среде. Стирайте эти игрушки как и раньше, используйте металлические беговые колеса, которые были вымыты как и раньше.

Если краска на колесе начинает выцветать настолько, что колесо начинает шуметь, когда по нему бегают животные, нанесите небольшое количество вазелина на место соединения колеса и оси. Используйте деревянные бревна в обогащенной среде. Очистите бревна, удалив подстилку или другой мусор вручную.

Затем простерилизуйте бревна путем автоклавирования их в сухом или текстильном цикле, при котором достигается температура 121 градус Цельсия в течение 15 минут. Используйте для удержания чистые кормушки между размерами 29 сантиметров на 18 на 12,5 сантиметров и 30,5 сантиметров на 19 сантиметров на 14 сантиметров. Решетка для кормления и питья вырезает отверстие диаметром не менее пяти сантиметров в передней части клетки, чтобы мыши могли входить и выходить.

Для начала. На четверть дюйма кукурузный початок подстилку лабораторных животных в чистый или большой бункер для обогащения на глубину от двух до 2,5 сантиметров. Затем поместите два или три бревна из предыдущей аорты в один угол мусорного ведра, чтобы изолировать площадь около 1 225 квадратных сантиметров.

Затем на участке, изолированном бревнами, поместите сверху три клея с колесами СОР. Убедитесь, что у колес есть место для свободного вращения. Теперь соедините пластиковую трубку так, чтобы несколько рукавов разветвлялись от центрального соединительного элемента.

Поместите эту трубку в середину мусорного ведра по двум углам бункера. Поставьте клетку для кормления, наполненную той же подстилкой, что и мусорное ведро. Отверстие в передней части каждой клетки для кормления должно быть обращено к центру бункера.

Поместите проволоку для корма и воды с мышиным кормом на верхнюю часть каждой клетки для кормления. Добавьте бутылку с водой. Поместите в мусорное ведро колесо длиной 11,5 сантиметров, колесо длиной 20,5 сантиметра и колесо диаметром 28 сантиметров.

Затем поставьте еще четыре-пять пластиковых домиков, похожих на игрушки или туннели, по всему контейнеру для обогащения. Накройте мусорное ведро фильтровальной бумагой для микроизолятора и прикрепите фильтровальную бумагу к ведру с помощью связующих зажимов. При помещении животных в бункер для обогащения из стандартной клетки поместите клетку в бункер сбоку, чтобы животные могли свободно перемещаться из стандартной клетки в бункер для обогащения.

Не допускайте переноса материалов для гнездования в обогащающий бункер. От 10 до 20 животных одного и того же возраста, пола и генетической линии могут быть размещены в обогащенной среде одновременно. Убедитесь, что животные ежедневно наблюдаются на предмет признаков болезни или стресса.

При необходимости аккуратно обрабатывайте животных, чтобы дополнительно осматривать их состояние два раза в неделю. Проверьте уровень пищи и воды, убедившись, что еды и воды хватит на следующие два дня. Кроме того, расправьте беговые колеса и развивающие игрушки, чтобы они были разложены и их можно было легко использовать.

Заменяйте любые загрязненные предметы обогащения раз в неделю, в идеале, когда мыши удалены из окружающей среды. В экспериментальных целях снимите клетки для кормления и решетки и замените их чистыми клетками и стеллажами, наполненными свежими кормами. Замените бутылки с водой на бутылки с чистой водой.

Крайне важно переупорядочить элементы обогащения таким образом, чтобы ключевые аспекты настройки были сохранены, но элементы обогащения размещены по-другому. Пятно. Проверьте остальную часть большого контейнера для обогащения и при необходимости очистите. Вычерпывая грязную подстилку и раскладывая новую чистую подстилку раз в две недели.

При выполнении недельного содержания мойте игрушки вручную или отправляйте их через клетку. Каждый месяц убирайте большую часть мусора, убирая развивающие игрушки и клетки для кормления, а также вычерпывая подстилку. Замените подстилку свежей подстилкой, следя за тем, чтобы во всех зонах клетки было два сантиметра подстилки один раз в три месяца или в соответствии с вашим протоколом для животных, уберите всю подстилку и игрушки и продезинфицируйте мусорное ведро, вымыв, как перед контролем дома, животных группы в том же 12-часовом цикле световой темноты.

Поскольку мыши в обогащенной среде находятся в микроизолированных клетках, обеспечьте такую же подстилку из кукурузных початков в контрольной клетке, как и в обогащенной среде, и добавьте гнездо размером четыре на четыре сантиметра, освещенное гнездом мейстера, в котором размещаются от трех до пяти мышей одного пола в обычной клетке для мышей. Не кладите в клетку игрушечную трубку или домик. Включите в клетку решетку для хранения еды и бутылку с водой, если клетка не подключена к автоматической системе полива.

Ежедневно следите за здоровьем животных, следя за тем, чтобы у животных было много еды и воды. Замените или очистите клетки, провода для кормления, корм и воду. Раз в неделю очищайте клетки и решетки, как и раньше.

Трехнедельные самцы мышей содержались в обогащенной среде или контрольных клетках в течение пяти недель до подкожной инокуляции опухоли от 10 до 5 клеток на животное. Результаты показывают вес опухоли меланомы B 16 через 17 дней после инокуляции. Каждая группа состояла из 10 животных.

Звездочка представляет P-значение менее 0,05, рассчитанное по T-критерию студентов. Трехнедельные мыши подвергались обогащению окружающей среды в течение шести дней. Шесть дней в обогащенной среде, снижение забрюшинной, белой жировой ткани, масса жировых пакетов.

Этот график показывает, что через шесть дней в обогащенной среде уменьшается бурая жировая ткань, эпидермальная белая жировая ткань и забрюшинная белая жировая ткань, вес жировых пакетов по отношению к массе тела. На следующих двух графиках представлены результаты работы мышей, содержащихся в обогащенной среде в течение четырех недель, как показано здесь, четырех недель обогащения окружающей среды, снижения веса жировых пакетов во всех типах жировых отложений, за исключением бурой жировой ткани. Четыре недели обогащения окружающей среды, снижение веса жировых пакетов по отношению к массе тела для всех типов жировых отложений, за исключением бурой жировой ткани.

После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее понимание того, как создать и поддерживать обогащенную среду, которая вызывает эффекты против рака и ожирения и мышей.