Визуализация miniSOG меткой репарации ДНК белков в сочетании с электронной спектроскопии изображений (ESI)

Общая цель следующего эксперимента состоит в том, чтобы составить карту распределения белков репарации ДНК вокруг двухцепочечных разрывов ДНК в наномасштабе. С целью изучения ультраструктуры поврежденного хроматина, подвергающегося репарации, с помощью электронной спектроскопической визуализации. Это достигается за счет генерации конструкций экспрессии ДНК, кодирующих гибридные белки белков ответа на повреждение ДНК с использованием флуоресцентного белка и мини-метки SOG.

В качестве второго шага конструкции вводятся в клетки путем трансфекции, а затем клетки повреждаются лазерным или гамма-излучением. Затем облученные и неподвижные клетки проходят этапы подготовки с помощью электронной микроскопии, чтобы сделать распределение белка репарации, меченного мини-SOG, видимым в электронном микроскопе. Полученная электронная спектроскопическая визуализация позволяет получить подробные изображения, которые позволяют проанализировать ультраструктуру хроматина и связь специфических белков с очагами репарации ДНК.