Протоколы Прочная гербицидам тестирования в различных сорняков

Общая цель этой процедуры заключается в проверке и подтверждении устойчивости к гербицидам у широкого спектра видов сорняков и гербицидов, а также в определении уровней устойчивости к гербицидам. Это достигается путем предварительного выхода из состояния покоя семян, собранных с растений, переживших обработку гербицидами, для одновременного прорастания и появления всходов. Требуется период яровизации семян, бушующий от нескольких дней до более чем недели.

Второй шаг – насыпать в пластиковую посуду шнековую среду с нитратом калия. Затем семена верны помещаются на затвердевший шнек и чашки передаются в шкаф для проращивания с оптимальными условиями для каждого вида сорняков. Далее от 15 до 20 сеянцев пересаживают в пластиковые лотки, наполненные стандартной почвенной смесью.

Каждому лотку присваивается штрих-код, включающий всю информацию для его уникальной идентификации, и лотки помещаются в отапливаемую теплицу до тех пор, пока рассада не достигнет стадии двух-трех листьев. Заключительным этапом является обработка гербицидами с использованием точного настольного распылителя, все гербициды применяются в виде коммерческих составов с рекомендуемыми поверхностно-активными веществами в двух дозах от рекомендуемой полевой дозы, и в три раза через три-четыре недели после обработки проводится окончательная оценка. Считыватель штрих-кодов используется для записи количества выживших растений и визуальной оценки биомассы на экспериментальную единицу.

Затем данные загружаются в компьютер и анализируются для определения статуса устойчивости к гербицидам. Основное преимущество этого метода перед диагностическими скрининговыми тестами in vivo или in vitro связано с его надежностью и гибкостью. Другими словами, метод надежен и может быть легко адаптирован к широкому спектру видов с помощью незначительных адаптаций.

Этот метод помогает ответить на ключевые вопросы, связанные с изучением и управлением популяциями устойчивых к гербицидам сорняков на полях CRO, такие как структура и уровень устойчивости. Это также позволяет правильно спланировать дальнейшие экспериментальные шаги, такие как эксперименты с реакцией. Как правило, исследователи, не знакомые с испытаниями устойчивости к гербицидам, испытывают трудности из-за множества этапов и аспектов, которые необходимо учитывать и адаптировать к конкретным условиям эксперимента.

Начните со сбора образца семян от одного вида за раз и присвоения уникального кода. Очистите семена, удалив мякину и вытащив семена. Заполните форму для каждого образца с указанием присвоенного уникального кода.

Название вида, дата сбора, GPS-координаты, муниципалитет, название фермера, размер поля, уровень зараженности, гербициды для сельскохозяйственных культур, использованные в течение сезона, и исторические данные о поле. Храните семена в незапечатанных бумажных пакетах с присвоенным уникальным кодом. Дайте влаге испариться, но не подвергайте семена воздействию высокой температуры или резких колебаний температуры.

Чтобы избежать индукции вторичного покоя. Храните очищенные семена при температуре четыре градуса Цельсия в темном помещении для яровизации. В пластиковую посуду налейте немного деионизированной воды.

Вырежьте два диска и полоску фильтровальной бумаги, которая через капилляр образует мостик между водой и двумя дисками. Смочите фильтровальную бумагу в воде и положите ее в пластиковую посуду. Затем выложите высушенные на воздухе семена на бумагу.

Перенесите пластиковую посуду на четыре градуса Цельсия на необходимый промежуток времени, в зависимости от вида. Далее приготовьте раствор шнека на 0,6%, содержащий 0,1% нитрата калия, используя деионизированную воду, растворите шнек в микроволновой печи и разлейте раствор шнека по пластиковой посуде. Как только субстрат остынет, поместите семена Верна, которые нужно прорастить, на затвердевший шнек.

Поместите пластиковую посуду в шкаф для проращивания продолжительностью яровизации, а также светом и температурным режимом изменяются в зависимости от вида сорняка. Пересадка вместо прямого посева позволяет получить равномерный насаждение растений на одной стадии роста, что является важным предварительным условием для оптимизации эффективности обработки гербицидами Пересадите от 15 до 20 саженцев в пластиковые лотки, заполненные стандартной почвенной смесью из 60% илистого суглинка, почвы, 15% песка, 15% агроперлита, и 10% торфа. Идентифицируйте каждый лоток с помощью штрих-кода, включающего всю информацию об уникальном идентификационном коде популяции тестируемого гербицида, номер репликации и номер прогрессивного лотка.

Поместите поддоны в отапливаемую теплицу и поливайте растения по мере необходимости, чтобы поддерживать субстрат на уровне или близком к полевому уровню. Температура роста варьируется в зависимости от вида сорняков для послевсходовых гербицидов. Опрыскивайте растения, когда они достигают стадии двух-трех листьев, готовьте раствор поверхностно-активного вещества в соответствии с инструкциями на этикетке, конечная концентрация обычно выражается в процентах от конечного объема или объем должен быть распределен на единицу площади?

Рассчитайте количество товарного продукта, которое должно быть растворено в растворе поверхностно-активного вещества. С помощью этого уравнения доза гербицида рассчитывается путем умножения рекомендуемой полевой дозы на максимальную испытуемую дозу и конечного объема раствора, деленного на объем, подаваемый настольным опрыскивателем. Приготовьте максимально концентрированный раствор гербицида Сначала разведите раствор гербицида в три раза, чтобы получить менее концентрированный раствор.

Такая процедура снижает вероятность ошибок при взвешивании или пипетировании гербицидов. Раствор гербицида. Концентрация выражается в объеме, который должен быть распределен на единицу площади.

Начинайте последовательность обработки с более низкой дозы гербицида. Таким образом, нет необходимости мыть шкаф для распыления между двумя обработками одним и тем же гербицидом. Распределите раствор гербицида с помощью прецизионного настольного опрыскивателя, подающего 300 литров на гектар при давлении 215 кило паскаль и скорости 0,75 метра в секунду со стрелой, оснащенной тремя плоскими вентиляторными гидравлическими форсунками.

При смене гербицида дважды вымойте шкаф для опрыскивания, используя 1% отбеливатель, а затем промойте. Проведите оценку через три или четыре недели после обработки в зависимости от данных об испытанных гербицидах, количества растений, переживших обработку, а также визуальной оценки биомассы или VEB с помощью считывателя штрих-кодов, который автоматически идентифицирует каждый лоток. Растения считаются мертвыми, если они не демонстрируют активного роста, независимо от цвета или другого внешнего вида.

VEB получается путем визуального сравнения биомассы растений между обработанной и необработанной проверкой одной и той же популяции. Балл от 10 для растений, не пораженных гербицидом, до нуля, когда растения явно мертвы, присваивается каждому обработанному лотку. Оцените общую эффективность лечения, включив во все эксперименты восприимчивую популяцию, например, популяцию, собранную в месте, которое никогда или редко обрабатывалось гербицидами.

Выразите приживаемость растений в процентах от количества обработанных растений, подсчитанных непосредственно перед обработкой гербицидом, и рассчитайте стандартную погрешность. Значение Perme относит популяции к четырем категориям на основе результатов, полученных от обработок двумя дозами гербицидов, чувствительных, когда менее 5% растений выживают после приема дозы гербицида. Один x слабо устойчивый, когда выжившие варьировались от 5% до 20% при дозе гербицида.

Один х устойчивый, когда более 20% растений выживают после приема дозы гербицида. Один х и высокая устойчивость, когда выживаемость составляет более 20% при дозе гербицида один х и более 10% при дозе гербицида. Показаны три х репрезентативных результата обработки гербицидом паноламом на четырех популяциях iopa.

Проверка восприимчивости полностью контролировалась, в то время как популяция 1410 была классифицирована как слабоустойчивая, потому что выжило менее 20% растений. Популяция 1411 контролировалась при третьей дозе х, но выживаемость растений при первой дозе составила более 20%, и поэтому она была отнесена к нашему статусу. Наконец, популяция 1412 не контролировалась ни при рекомендуемой полевой дозе в один раз, ни в три раза, поэтому она была отнесена к категории высокорезистентных.

Здесь приведен второй пример визуальной оценки биомассы в растениях, обработанных метилом триен Рон. Необработанному контролю присваивается 10 баллов, тогда как лотки с полностью контролируемыми растениями имеют ВЭБ равный нулю. Подносам присваивается промежуточный балл в пять баллов.

Имея общую биомассу растений, которая составляет половину от биомассы необработанных растений, лотки с растениями, имеющими биомассу, сравнимую с необработанным контролем, где растения не были поражены гербицидами и поэтому оказались высокоустойчивыми, имеют ВЭБ 10. При проведении этой процедуры важно помнить, что качество семян сорняков, которые должны были быть собраны после созревания, а затем восстановлены, оказывает сильное влияние на успех экспериментов, следующих за этой процедурой. Другие методы, такие как ответ byas, могут быть выполнены для того, чтобы точно ответить на дополнительные вопросы, связанные с уровнем резистентности.

После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее понимание того, как подходить к тестированию устойчивости к гербицидам и как адаптировать различные этапы к разным видам сорняков. В частности, торможение семян CY и проращивание семян. Не забывайте, что работа с гербицидами или концентрированными кислотами может быть чрезвычайно опасной в таких мерах предосторожности, как ношение масок, перчаток и других средств индивидуальной защиты, которые всегда следует принимать во время выполнения этой процедуры.