Долгосрочное Катетеризация Кишечные лимфы Магистральные и коллекции лимфы в неонатальных Свиней
5 марта 2016 г.
Мы представляем хирургическую процедуру катетеризации кишечного лимфатического ствола у неонатальных свиней для сбора большого количества компонентов липидного метаболизма из эфферентной лимфы.
Лимфатическая катетеризация является важным методом, используемым для изучения механизмов, участвующих в метаболизме липидов и лекарств, метастазировании рака и иммунной функции, а сбор большого количества лимфы из различных животных моделей позволяет исследователям изучать эти процессы. В видеоролике подробно показана хирургическая процедура катетеризации кишечного лимфатического ствола у неонатальных свиней с использованием вентрального срединного доступа. Все процедуры были одобрены Комитетом по уходу за животными и их использованию в учреждении Университета Альберты.
Для доступа к лимфатическому сосуду вскрывали брюшную полость. Электрокоагуляция на разрезной установке использовалась для раскрытия мышечного слоя. Ретрактор был помещен для удержания брюшной стенки открытой на протяжении всей процедуры.
Определены ключевые органы брюшной полости, способствующие локализации лимфатического сосуда. Для улучшения доступа к лимфатическим сосудам сегменты тонкой кишки и толстой кишки выведены наружу на левую сторону тела. Лимфатический сосуд обозначается путем идентификации печени и правого вентрального сегмента воротной вены.
У новорожденных свиней лимфатические сосуды нежные и легко разрываются, поэтому требуется тщательное вскрытие тампонами и тупыми инструментами. Здесь находится кишечный лимфатический сосуд. Теперь шов проводится под лимфатическим сосудом с помощью тупых щипцов.
Теперь под лимфатическим сосудом проходят три шелковых шва 2-0. Самый каудальный шов используется для расширения сосуда и крепления катетера к сосуду. Черепные швы используются для фиксации катетера внутри сосуда.
Небольшой разрез в лимфатическом сосуде позволяет тупым щипцам расширить сосуд. Катетер вводится в сосуд. Делать это нужно аккуратно, чтобы лимфатический сосуд не порвал.
Катетер должен быть выдвинут за пределы самого черепного шва, чтобы убедиться, что он хорошо сидит. Три шелковых шва 2-0 фиксируют катетер в лимфатическом сосуде. Важно отметить, что два черепных шва сначала используются для фиксации катетера в сосуде, а самый каудальный шов затем используется для связывания катетера, что придает ему стабильность.
Важно обеспечить хороший лимфоток перед закрытием брюшной полости. Катетер наружно расположен на левом среднем боку свиньи. Большие щипцы используются для вытягивания катетера из брюшной полости на внешнюю поверхность бока свиньи.
Мышечные слои закрываются викриловым швом 2-0 на конической игле по простому прерывистому шовному рисунку. Кожу закрывают 2-0 викриловым швом на режущей игле по ходящему подкожному шву. При выходном разрезе катетер проходит через кожу и закрывается нейлоновым швом 2-0 на режущей игле по схеме кисетного шва.
Это закрытие помогает предотвратить проникновение восходящей инфекции внутрь катетера. Рубашка, в которой находятся флаконы для сбора лимфы, надевается на свинью, пока она еще находится под анестезией. Катетер вставляется в бутылку для сбора и обеспечивается хороший лимфоток перед пробуждением свиньи.
Свиньи хорошо восстанавливаются после процедуры, и на протяжении всего эксперимента поддерживается отличный лимфоток. В таблице отображаются компоненты лимфы, собранные из лимфатического сосуда. Эти компоненты включают аполипопротеин B48, триглицериды и холестерин.
Рисунок Вестерн-блоттинга показывает наличие как аполипопротеина B48, так и небольшого количества аполипопротеина B100, полученного из плазмы, в собранном образце лимфы. Несмотря на то, что лимфатическая катетеризация у молодых свиней может быть технически сложной, поскольку лимфатические сосуды являются нежными и рыхлыми, это видео демонстрирует, что использование правильной и тщательной хирургической техники у молодых свиней может предоставить исследователям отличную модель для сбора кишечной лимфы.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Обзор
В данной статье подробно описывается хирургическая процедура катетеризации кишечного лимфатического ствола у новорожденных поросят. Этот метод позволяет собирать значительные количества компонентов липидного обмена из эфферентной лимфы, что способствует проведению исследований метаболизма липидов и лекарственных препаратов.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Липидный обмен
- Хирургические методы
- Животные модели
Обзор
- Лимфатическая катетеризация имеет решающее значение для изучения различных биологических процессов.
- Она помогает понять механизмы, участвующие в липидном обмене и иммунной функции.
- Для исследовательских целей из моделей животных можно собрать большие объемы лимфы.
- Данное исследование сосредоточено на новорожденных поросятах как на модельном организме.
Цель исследования
- Продемонстрировать хирургическую технику катетеризации лимфатических сосудов.
- Обеспечить возможность сбора лимфы для изучения липидного обмена.
- Предоставить исследователям детальное руководство по выполнению данной процедуры.
Используемые методы
- Для доступа к кишечному лимфатическому стволу использовали вентральный срединный доступ.
- Для достижения лимфатическогоv сосуда была вскрыта брюшная полость.
- Для рассечения мышечного слоя применяли электрокоагуляцию.
- Для удержания брюшной стенки в открытом состоянии во время процедуры установили ретрактор.
Основные результаты
- Данная процедура позволяет успешно осуществлять сбор лимфы у новорожденных поросят.
- Она представляет собой надежный метод изучения компонентов липидного обмена.
- Все процедуры были одобрены соответствующим институциональным комитетом по уходу и использованию животных.
Выводы
- Данная хирургическая методика эффективна для катетеризации лимфатических сосудов у новорожденных поросят.
- Она открывает возможности для дальнейших исследований липидного обмена и смежных областей.
- Подробное руководство по процедуре может помочь другим исследователям в проведении аналогичных работ.
Часто задаваемые вопросы
Значимость для промышленности
Данная хирургическая методика позволяет осуществлять длительный сбор кишечного лимфо-оттока у новорожденных поросят, обеспечивая надежный источник для изучения компонентов липидного обмена, таких как аполипопротеины и триглицериды. Эта модель способствует снижению рисков при изучении механизмов на ранних этапах разработки путем количественного анализа транспорта липидов и медиаторов воспаления в физиологически релевантной системе. Она обеспечивает трансляционную преемственность для доклинической оценки метаболизма лекарственных средств и путей иммунной модуляции.
Стратегические применения в биофармацевтических исследованиях и разработках
Ранние этапы поиска и валидация мишеней
- Научная ценность: позволяет исследовать пути липидного обмена посредством прямого измерения состава эфферентной лимфы кишечника.
- Практическая ценность: обеспечивает забор больших объемов лимфы в продольном исследовании для проверки гипотез при валидации мишеней, связанных с липидным обменом.
Скрининг и разработка анализа
- Научная ценность: позволяет получать стандартизированные образцы лимфы, содержащие измеряемые биомаркеры, такие как аполипопротеин B48 и триглицериды, для калибровки анализа.
- Практическая ценность: способствует разработке воспроизводимых методов считывания показателей потока липидов и скрининга воспалительных соединений.
Трансляционные и доклинические исследования
- Научная ценность: облегчает изучение миграции иммунных клеток кишечника и механизмов развития заболеваний, связанных с липидным обменом, на модели новорожденных.
- Практическая ценность: позволяет осуществлять лонгитюдный мониторинг состава лимфы для оценки взаимодействия с мишенью и модуляции путей во времени.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Данный метод интегрируется в рабочие процессы по поиску мишеней, обеспечивая получение биологически значимой лимфы для последующего анализа, что позволяет связать предварительную проверку гипотез о мишенях с доклинической валидацией механизмов.
- Открывающая биология: обеспечивает функциональную валидацию мишеней липидного обмена посредством прямого измерения биомаркеров лимфы.
- Скрининг: предоставляет однородные образцы лимфы для стандартизации анализа и оценки эффекта соединений.
- Аналитика: позволяет проводить количественное измерение компонентов лимфы, таких как холестерин и аполипопротеины, для изучения зависимостей «структура — активность».
- Трансляционные исследования: связывает переработку липидов в кишечнике с системным метаболизмом и моделированием иммунного ответа.
- Корпоративное повторное использование: создает многократно используемую хирургическую платформу для лонгитюдного сбора лимфы в нескольких когортах исследований.
Операционное и корпоративное воздействие
- Научная ценность: Снижает механистическую неопределенность в исследованиях липидного обмена за счет прямого доступа к лимфе кишечника.
- Операционная ценность: Обеспечивает воспроизводимый выход и состав лимфы благодаря стандартизированной технике катетеризации.
- Стратегическая ценность: Оптимизирует принятие решений о продолжении или прекращении разработки (go/no-go) за счет получения ранних данных о липидном обмене и иммунном ответе.
- Влияние на портфель: Позволяет проводить приоритизацию мишеней с учетом рисков на основе профилей биомаркеров, полученных из лимфы.
Особенности реализации
- Требуется опыт в области микрохирургических методов и работы с новорожденными животными.
- Зависимость от точности инструментов при диссекции сосудов и фиксации катетера.
- Необходим стандартизированный послеоперационный уход для поддержания лимфотока и предотвращения инфекции.
- Учет особенностей адаптации для различных пород свиней или возрастных моделей в зависимости от хрупкости сосудов.
- Ограничено технической сложностью канюляции тонких лимфатических сосудов новорожденных без нанесения травм.
Часто задаваемые вопросы по биофармацевтике
Chapters in this video
0:00
Title
0:34
Abdominal Surgery
1:24
Localizing the Lymphatic Vessel
2:36
Inserting the Catheter into the Lymphatic Vessel & Securing the Catheter with Sutures
4:18
Closing the Abdomen
5:02
Placing the Jacket on the Pig & Post-surgical Recovery
5:40
Results
6:06
Conclusion
