Завесой Колонка: Оптимизация эффективности и чувствительности

Общей целью данного метода является повышение эффективности и чувствительности сепарации за счет оптимизации колонны завесного потока. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области наук об окружающей среде, криминалистики, а также в областях, требующих анализа следовых образцов, где требуется эффективный и высокочувствительный метод разделения. Основным преимуществом данного метода является то, что он повышает эффективность разделения и чувствительность анализа по сравнению с традиционными методами разделения ВЭЖХ.

Этот метод может обеспечить средства для увеличения сепарационной способности и, следовательно, скорости производительности экономичным и эффективным по времени способом. Завесная проточная колонна является новой концепцией для практикующих специалистов по ВЭЖХ, однако ее использование не является сложным. Для этого просто требуется оптимизация соответствующих коэффициентов расхода.

Во-первых, приготовьте бутылки со 100-процентной ультрачистой водой и 100 метанолом для подвижных фаз А и В прибора для ВЭЖХ. Продуйте насосы в соответствии с требованиями производителя. После продувки отсоедините магистраль насоса от клапана инжектора автопробоотборника.

Прикрепите Т-образный элемент к отсоединенной линии. К каждому отверстию тройника прикрепите трубку внутреннего диаметра 0,13 миллиметра и длиной 15 сантиметров. Подсоедините одну трубку от Т-образного элемента к клапану инжектора автоматического пробоотборника.

Наконец, установите насос на расход один миллилитр в минуту. Измельчите два пустых сборных сосуда и промаркируйте их центральным и периферийным. В течение 60 секунд используйте резервуар с центральной маркировкой, чтобы собрать выходную подвижную фазу из магистрали, идущей от инжектора.

Повторно взвесьте центральный сосуд и определите массу собранной подвижной фазы. Повторите этот процесс, собирая поток через периферийный порт с помощью емкости с маркировкой периферии. Определите процент расхода, или миллилитров в минуту, от каждой строки с помощью указанных уравнений.

Центральный порт должен составлять около 40 процентов, а периферийный порт — около 60 процентов. Если значения отличаются более чем на два процента, измените длину или диаметр трубки, чтобы отрегулировать коэффициент потока. Затем повторите шаги сбора и расчета.

Далее выключите подачу насоса и подключите линию форсунки к центральному порту входного отверстия колонны. Также подсоедините линию от Т-образного элемента к периферийному порту входного отверстия колонны. Медленно увеличивайте расход до одного миллилитра в минуту 100-процентной подвижной фазы, B.To закончите настройку системы, подайте 100-процентный метанол со скоростью один миллилитр в минуту в течение 10 минут, чтобы уравновесить колонну.

Для начала с помощью трубки подключите центральный выходной порт к УФ-ВИД детектору. Подсоедините трубки того же типа и длины к периферийному выходному отверстию колонки CF. Затем установите насос на расход один миллилитр в минуту.

Измельчите два пустых емкости для сбора и снова пометьте один для центрального сбора и один для периферийного. В течение 60 секунд с помощью контейнера с центральной маркировкой отбирайте выходную подвижную фазу от УФ-ВИД детектора. Повторно взвесьте сборный сосуд, чтобы определить массу ускользнувшего раствора.

Повторите этот процесс с периферийным выпускным отверстием и маркированным контейнером для сбора. Теперь определите процентный расход от каждой линии, как это было сделано ранее с входным потоком. Линия УФ-ВИД должна составлять 21 процент, а периферийный выходной поток — 79 процентов.

Если коэффициент расхода значительно отклоняется, отрегулируйте размер трубки, прикрепленной к выходу УФ-ВИД детектора, чтобы изменить процентное соотношение центрального расхода. Важно, чтобы соотношения потоков между центральным и периферийным на входе и выходе колонны соответствовали этому протоколу для обеспечения оптимальной производительности колонны с завесой потока. Колонны с технологией Active Flow были разработаны с использованием специализированной фриттной конструкции в торцевых фитингах многопортовых колонн для преодоления неоднородности основания колонны и улучшения характеристик разделения.

Тестовая смесь, содержащая фенетол, бутилбензол и пентилбензол, была проанализирована на обычных колоннах внутреннего диаметра 4,6 и 2,1 мм, а также на колонне с внутренним диаметром 4,6 мм. Разделение смеси иллюстрирует улучшенные характеристики с точки зрения эффективности и чувствительности завесной проточной колонны по сравнению со стандартными колоннами. Использование завесной проточной колонны увеличивало сигнал для бутилбензола, несмотря на уменьшение пикового объема.

После освоения этой техники ее можно настроить менее чем за полчаса, если она выполнена правильно. Конфигурацию колонны потока завесы можно использовать снова и снова, но коэффициенты расхода необходимо регулярно проверять. Пытаясь выполнить эту процедуру, важно помнить, что она должна быть как можно ближе к предписанным коэффициентам расхода.

Колонна с завесой потока проложила путь исследователям в области ВЭЖХ, которые раздвинули границы возможностей колонок и приборов UPLC для более быстрого анализа образцов без ущерба для производительности разделения. После просмотра этого видео вы должны понять важность колонн с завесным потоком, так как они могут обеспечить лучшее разделение, чем обычные колонны ВЭЖХ.