Выделение и характеристика Mouse антрального ооцитов на основе организации хроматина ядрышка

Общая цель этой процедуры состоит в том, чтобы подробно описать все этапы, необходимые для определения характеристик антральных ооцитов мышей на основе их хроматиновой организации в соответствии с их способностью полностью поддерживать перспективное эмбриональное развитие. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области биологии развития, например, как различить и изолировать два различных вида антральных ядрышек: SN, окруженное ядрышко, и NSN, неокруженное ядрышко, обитающее в антральном компартменте яичника млекопитающих. Чтобы собрать яичники, начните с введения 3-6-недельным самкам мышей IP 2,5 международных единиц гонадотропина сыворотки беременной кобылы.

Через два дня, примерно за час до сбора урожая, наполните одну стерильную чашку Петри средой М2 и добавьте несколько капель среды М2 по 20 микролитров во вторую чашку Петри, покрывая каждую каплю 1,5 миллилитрами минерального масла. Затем перенесите все чашки Петри в инкубатор с температурой 37 градусов Цельсия и 5% углекислым газом, чтобы среда сбалансировалась. Затем с помощью стерильных ножниц для рассечения сделайте разрез на коже, покрывающей брюшную стенку, с последующим разрезом в брюшине первой мыши, которой ввели гормоны.