26 апреля 2016 г.
Наиболее часто используемый метод для наноструктурированных липидного носителя (НЖК) синтеза включает масло-в-воде, гомогенизация и затвердевание. Это было изменено здесь путем применения высокой дисперсии сдвига после затвердевания для достижения НЖК с желаемого размера, улучшенной инкапсуляция наркотиков и эффективности загрузки лекарственного средства в качестве потенциального носителя для доставки дакарбазин.
Общая цель этой процедуры заключается в получении наноструктурированного липидного носителя для инкапсуляции противоракового терапевтического агента дакарбазина. Эта процедура проста и хорошо оптимизирована. Позволяет получать наноструктурированный липидный носитель с хорошо контролируемой емкостью.
К основным преимуществам новой формулы дакарбазина относятся повышенная диспергированность препарата в водном растворе, длительная историческая стабильность и улучшенный контроль высвобождения препарата. Это улучшение потенциально может привести к увеличению периода полувыведения in vivo. Начните с добавления по 6,25 мл ацетона и этанола в колбу.
К растворителям добавить глицерилпальмитостерат изопропилмиристат, D-a-токоферил полиэтиленгликоль сукцинат и соевый лецитин. Растворите смесь при температуре 70 градусов Цельсия на водяной бане. В дополнительную колбу добавьте 12,5мл воды.
Создайте раствор 1% полоксамера 188, растворив в воде 125 мг. Нагрейте колбу до 70 градусов Цельсия, чтобы химическое вещество полностью растворилось. Перемешивая органический раствор со скоростью 400 об/мин по каплям, добавьте 1%-ный раствор полоксамера 188 до образования эмульсии.
Перемешивайте эмульсию еще четыре часа, чтобы испарить органический растворитель. Через четыре часа поместите эмульсию в холодильник при температуре четыре градуса Цельсия на два часа, чтобы она застыла. Чтобы получить наноструктурированные липидные носители или NLC, используйте гомогенизатор, чтобы подвергнуть затвердевшие эмульсии воздействию дисперсии с высоким сдвигом.
Перемешайте раствор при 15000 об/мин в течение 30 минут, чтобы диспергировать эмульсию. Берите образцы раствора с шагом в 10 минут. Возьмите 14 микролитров эмульсии в кювете с динамическим рассеянием света или DLS.
И разбавьте до 1мл дейтерированной водой для измерения. Считайте образец кюветы в приборе. Изучите образцы, чтобы определить, какие образцы имеют наименьший размер и наименьший индекс полидисперсии.
Следовательно, определить оптимальную скорость смешивания и время смешивания для создания NLC. Исследуйте образцы на предмет морфологии и ультраструктуры NLC. Примените такое же разбавление образцов к покрытой углеродным волокном медной сетке просвечивающего электронного микроскопа.
Дайте образцу высохнуть на воздухе, а затем запустите образец в соответствии с инструкциями производителя. Теперь, когда условия оптимизированы, приготовьте раствор, как это было сделано для исходных эмульсий. После соединения реагентов глицерила, изопропила, полиэтиленгликоля сукцината и соевого лецитина добавляют 70 мг дакарбазина, а затем нагревают раствор до 70 градусов Цельсия.
Приготовьте 12,5мл водного раствора 1%-ного полоксамера 188. Нагрейте колбу до 70 градусов Цельсия. После растворения полоксамера 188 добавить раствор по каплям в органический раствор, перемешивая со скоростью 400 об/мин до образования эмульсии.
Перемешивайте эмульсию еще четыре часа, чтобы испарить органический растворитель. Как и раньше, поместите эмульсию в холодное помещение при температуре четыре градуса Цельсия на два часа для застывания. Используйте оптимизированную высокую скорость диспергирования 15000 об/мин в течение 30 минут для гомогенизации эмульсии.
Препараты NLC и NLC, загруженного дакарпазином, с различными параметрами были охарактеризованы по размеру частиц и показателю полидисперсии. Размер частиц и полидисперсионный индекс NLC зависели от концентрации поверхностно-активного вещества, высокой скорости диспергирования сдвига и продолжительности. Если судить по размеру частиц и показателю полидисперсии, то наилучшие результаты были достигнуты при 1% поверхностно-активного вещества и скорости диспергирования сдвига 15000 об/мин в течение 30 минут.
Которые были выбраны в качестве оптимальных параметров для подготовки NLC в данном исследовании. При использовании оптимальных параметров для получения NLC с добавлением дакарбазина, наименьший размер составил 155 нм для NLC и 190 нм для NLC, загруженного дакарбазином. Оба с индексом полидисперсии 0,2, что указывает на хорошую однородность.
На загрузку и инкапсуляцию дакарбазина в NLC указывают изменения размера и структуры. В то время как NLC, загруженные дакарбазином, имеют больший размер и измененную внутреннюю структуру по сравнению с NLC. После освоения этой техники ее можно выполнить за восемь часов, если она выполнена идеально.
При проведении этой процедуры очень важно помнить, что линии испарения и затвердевания очень критичны. Как слишком длинный, так и слишком короткий может негативно сказаться на образовании наноструктурированных липидных носителей. После этой процедуры восстановленные наноструктурированные липидные носители стабильны в течение шести месяцев при четырех градусах Цельсия.
Разрешение на проведение таких характеристик, как фармакология и токсикология. Этот метод проложил путь для тех, кто постоянно занимается исследованиями, к изучению наноструктурированной формы дакарбазина на основе носителей для различных методов лечения рака. На сегодняшний день дакарбазин является наиболее активным средством в лечении кожной и метастатической меланомы.
После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее понимание того, как получить наноструктурированный липидный носитель и использовать наноструктурированный липидный носитель для инкапсуляции дакарбазина. При работе с опасными материалами, такими как дакарбазин, всегда следует использовать средства индивидуальной защиты, включая лабораторный халат, защитные перчатки и средства защиты глаз. Доступ к нему необходим и для работы с опасным растворителем.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данном исследовании представлен модифицированный метод синтеза наноструктурированных липидных носителей (НЛН) для доставки противоопухолевого препарата дакарбазина. Новый подход повышает эффективность инкапсуляции и загрузки лекарственного средства, что может привести к улучшению терапевтических результатов.
Наноструктурированные липидные носители (НЛН) решают проблему низкой дисперсности дакарбазина в водной среде, что является основным ограничением при создании его внутривенных форм, за счет повышения растворимости и стабильности препарата. Данная система доставки обеспечивает увеличение периода полувыведения и улучшенный контроль высвобождения, что способствует проведению доклинической оценки химиотерапевтических средств. Описанный метод представляет собой масштабируемую платформу для реформуляции гидрофобных онкологических препаратов с целью повышения терапевтического индекса и снижения потерь на этапе разработки лекарственных форм.
Данный состав НЛК вписывается в континуум онкологических исследований — от валидации хитов до оптимизации соединений-лидеров, где контролируемое высвобождение препарата и растворимость имеют решающее значение для оценки взаимодействия с мишенью и пределов безопасности.