Чрескожная Оценка функции почек в сознательном Грызуны

Общая цель этой процедуры заключается в чрескожном измерении функции почек без необходимости взятия образцов крови или дальнейшего экспериментального анализа. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области нефрологии, такие как влияние повреждения почек или конкретных терапевтических вмешательств на функцию почек. Основные преимущества данной методики заключаются в том, что она является малоинвазивной и что результаты готовы к анализу сразу после измерения без последующих экспериментальных манипуляций.

Этот метод может быть использован для изучения практически любого состояния почек у нескольких различных видов. Кроме того, он полезен для выполнения последовательных измерений в пределах одного животного. Перед началом процедуры подтвердите надлежащий уровень анестезии путем щипки пальцев ног.

И с помощью электробритвы удалите участок шерсти размером три на шесть сантиметров с задней нижней части живота животного. Удалите остатки шерсти с помощью крема для депиляции. Через две-три минуты тщательно промойте оголенную кожу, так как крем может выделять некоторую фоновую флуоресценцию.

Далее поместите оптический прибор для измерения функции почек на одну сторону двустороннего лейкопластыря. Располагаем оптическую часть над прозрачным окном и оставляем противоположную сторону покрытой защитной пленкой. Затем прикрепите к батарее кусок двустороннего клейкого пластыря соответствующего размера.

Перед тем как закрепить устройство, взвесьте животное. Затем отрежьте отрезок трубчатого эластичного марлевого бинта примерно на один сантиметр длиннее ширины двустороннего лейкопластыря. И натяните повязку на голову животного.

Далее поместите животное в положение лежа на спине, оставив выбритый участок открытым. И вставьте разъем аккумулятора в соответствующий порт на устройстве. Если батарея была подключена правильно, устройство начнет мигать.

Снимите защитную пленку с другой стороны пластыря, прикрепленного к аккумулятору. И закрепите аккумулятор на верхней поверхности устройства. Теперь снимите защитный чехол с пластыря рабочего устройства и, удерживая края до тех пор, пока он не будет правильно зафиксирован, поместите пластырь на выбритый участок на спине животного.

Накройте устройство трубчатой эластичной марлевой повязкой, стараясь при этом полностью натянуть бинт на живот, убедившись, что конечности могут свободно двигаться. Хорошая фиксация имеет решающее значение для предотвращения артефактов движения во время измерения, поэтому позаботьтесь о том, чтобы устройство было правильно закреплено до начала измерения. Когда повязка будет на месте, наложите на устройство полоску подходящего по размеру скотча так, чтобы она охватывала провода аккумулятора.

И измеряйте фоновое чтение в течение одной-трех минут, не нажимая на устройство. Для введения FITC-синистрина, после нагревания хвоста животного для расширения хвостовых вен, внутривенно вводят соответствующий объем исходного раствора FITC-синистрина. Далее аккуратно поместите животное одного в его домашнюю клетку без воды и проволочной крышки.

Будьте осторожны, чтобы не добавить артефакты движения. Затем зарегистрируйте флуоресценцию, излучаемую FITC-синистрином, с помощью оптического устройства в течение соответствующего экспериментального периода времени. По окончании периода записи осторожно снимите клейкую ленту с последующим наложением трубчатой повязки.

Затем аккуратно отсоедините двусторонний лейкопластырь от кожи. И вернуть животное в обычную домашнюю клетку. Чтобы прочитать данные, отсоедините аккумулятор от устройства и снимите клейкую заплатку.

Затем с помощью кабеля micro USB подключите оптический регистратор к компьютеру и загрузите данные с помощью соответствующего программного обеспечения. Наконец, используйте соответствующее программное обеспечение для создания кривой кинетики элиминации в соответствии с программными протоколами. И откройте файл dot CSV, содержащий данные.

При нарушении функции почек период полувыведения FITC-синистрина увеличивается. За счет уменьшенной экскреции вещества и внешний вид изгиба изменяется. Как правило, измеренная кривая не возвращается к фоновому уровню, и наблюдается увеличенная площадь под кривой.

У того же животного измерения до и после травмы демонстрируют увеличение максимальной интенсивности флуоресценции из-за накопления маркера, вызванного снижением его экскреции. Например, при наличии почечной недостаточности чрескожно измеренная кривая FITC-синистрина демонстрирует устойчивое состояние из-за серьезного нарушения функции почечной ткани. Кроме того, миниатюрное устройство было использовано для успешного измерения функции почек у нескольких штаммов грызунов с различными состояниями здоровья.

Подчеркивая пригодность и чувствительность устройства для выявления изменений, вызванных почечными заболеваниями и старением. После освоения эксперимент может быть полностью подготовлен за 50 минут, при этом по крайней мере четыре животных в час могут быть оценены одним экспериментатором. При попытке выполнить эту процедуру важно помнить о защите электронного устройства, удалив подачу воды и любую выступающую конструкцию во время измерения.