Протокол для функциональной оценки цельного белка Насыщенность мутагенеза библиотек Использование высокого секвенирования

10.5K просмотров

Цитируется: 5

11:36 мин.

3 июля 2016 г.

10.3791/54119-v

3 июля 2016 г.

10.5K просмотров
 ,  ,  , 

Мы представляем протокол для функциональной оценки комплексных библиотек мутагенеза насыщения Одноузельная белков с использованием высокой пропускной последовательности. Важно отметить, что этот подход использует ортогональные пары праймеров мультиплекс библиотека строительства и последовательности. Представитель результаты с использованием TEM-1 бета-лактамазу, выбранный при клинически значимой дозы ампициллина предоставляются.

Больше видео

Оценка пригодности белка

Chapters in this video

0:05

Название

0:43

Синтез NNS-субиблиотек для каждой позиции аминокислоты с помощью двухэтапного ПЦР-мутагенеза с сайт-направленным воздействием

1:53

Клонирование NNS-субиблиотек в селекционные векторы

3:47

Селекция библиотеки насыщающего мутагенеза белка TEM-1 по всему белку на устойчивость к антибиотикам

5:51

Высокопроизводительное секвенирование для определения влияния мутаций на приспособленность

8:44

Результаты: высокопроизводительное секвенирование после насыщающего мутагенеза белка по всему белку

10:16

Заключение

Related Videos