Name: Альтернативный метод удаления Отолиты из осетрины (Видео) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: Узнайте альтернативный метод извлечения целых отолитов из осетрины для исследований возраста и роста рыб. Эта техника сохраняет хрупкие структуры и помогает учёным изучать редкие виды.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Особая благодарность St. Regis Mohawk экологического отдела, Велака Национальный Рыбный питомник рыбы и исследовательское подразделение службы дикой природы, Университет Южного Иллинойса, США Рыба и рыбохозяйственный центр северо-востоке Службы охраны дикой природы, Стерлинг Икра, Калифорнийский университет в Дэвисе, Garrison Дам Национальный Рыба инкубатором, мишки Bluff Национальные рыбные инкубатором и США служба рыбы и дичи Панама Сити Офис рыболовства ресурсов для их помощи подачи осетра для данного проекта. Эта статья Вклад 2013 из USGS Научный центр Great Lakes.

Важное примечание: Из-за охранный статус всех видов осетровых рыб в Соединенных Штатах, позволяет приобретать и обрабатывать рыбы были получены до лабораторных процедур. Все образцы были приобретены у источников рыбоводных послеубойную в силу естественных причин и утилизировать следующие стандартные процедуры. 1. Изготовление образцов <ol><li> Перед тем как любые надрезы лежал осетра тушу на бок и с помощью измерительной ленты , чтобы измерить общую длину от морды до кончика хвоста до с точностью до 1 мм. (Рисунок 1А) </li><li> Взвесьте осетра туши на тарированный шкале с точностью до 1 г. Оценка туши для любых внешних тегов или меток и записи. </li></ol> 2. отолитам Extraction <ol><li> Выполнить вертикальный разрез с большим филе ножом между основанием черепа и первым спинным щитком через тело , чтобы отделить голову от тела (Фиг.1В). После удаления головы, Tuр - н головы , так что рот лицевой стороной вверх (рис 1C). </li><li> Удалите мягкие ткани полости рта и жабры, используя филе нож , чтобы разрезать вдоль вентральной стороны черепа (рис 1D). Сделайте надрез с электрической пилой от кончика морды до основания черепа полностью рассекают головку (рис 1E). Отделите две половинки вручную выставить полость мозга (рис 2A). </li><li> Удаляют мозгового вещества (красный прямоугольник слева) с щипцами для просмотра полукружных каналов (красный прямоугольник справа) в полости мозга (рис 2В). </li><li> Удалить полукруглый хрящ канал из полости мозга с пинцетом (рис 2С). Тщательно прокол полукруглый хрящ канал с кончиком пинцета и удалить отолит (рисунок 2D). Удалите отолит (жесткий костлявые структуры внутри хряща) пинцетом из полукруглого канала хряща (рис 2E) </stroнг&gt;. </li><li> Повторите шаги 2.3 - 2.4, чтобы удалить отолит из другой половины черепа. </li><li> Dip отолиты в 92% этаноле в течение 5 секунд, чтобы удалить хрящ. Место Отолиты в открытом сцинтилляционный флакон 25 мл, чтобы высохнуть в течение 24 часов. </li></ol>

<ol><li>Auer, N. A. Conservation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAuer%2C+NA+%22Sturgeons+and+Paddlefish+of+North+America%22">Sturgeons and Paddlefish of North America</a>. LeBreton, G. T. O., Beamish, F. W. H., McKinley, R. S. 27, Kluwer Academic Publishers. 252-276 (2004).</li>
<li>Sturgeon Specialists Group, sturgeon conservation. IUCN (International Union for the Conservation of Nature). , Source: 
 <a target="_blank" href="www.iucn.org">www.iucn.org</a> (2008).</li>
<li>Campana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy%2C+precision+and+quality+control+in+age+determination%2C+including+a+review+of+the+use+and+abuse+of+age+validation+methods%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Biology%22%5BJournal%5D)">Accuracy, precision and quality control in age determination, including a review of the use and abuse of age validation methods).</a> Journal of Fish Biology. 59, 197-242 (2001).</li>
<li>Bruch, R. M., Campana, S. E., Davis-Foust, S. L., Hansen, M. J., Janssen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lake+Sturgeon+age+validation+using+bomb+radiocarbon+and+known-age+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Lake Sturgeon age validation using bomb radiocarbon and known-age fish.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 138, 361-372 (2009).</li>
<li>Baremore, I. E., Rosati, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated%2C+minimally+deleterious+method+for+ageing+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">A validated, minimally deleterious method for ageing sturgeon.</a> Fishery Bulletin. 112, 274-282 (2014).</li>
<li>Stevensen, J. T., Secor, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age+determination+and+growth+of+Hudson+River+Atlantic+sturgeon%2C+Acipenser+oxyrhynchus%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Age determination and growth of Hudson River Atlantic sturgeon, Acipenser oxyrhynchus.</a> Fishery Bulletin. 97, 153-166 (1999).</li>
<li>Brennan, J. S., Cailliet, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+age-determination+techniques+for+white+sturgeon+in+California%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fishery+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative age-determination techniques for white sturgeon in California.</a> Transactions of the American Fishery Society. 118, 296-310 (1989).</li>
<li>Rossiter, A., Noakes, D. L. G., Beamish, F. W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+age+estimation+for+the+lake+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Validation of age estimation for the lake sturgeon.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 124, 777-781 (1995).</li>
<li>Chalupnicki, M. A., Dittman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((North+American+Sturgeon+Otolith+Morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Copeia%22%5BJournal%5D)">North American Sturgeon Otolith Morphology.</a> Copeia. , 260-266 (2016).</li>
<li>Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSecor%2C+DH+%22Manual+for+otolith+removal+and+preparation+for+microstructural+examination%22">Manual for otolith removal and preparation for microstructural examination</a>. , Barach Press. Columbia, South Carolina. (1991).</li>
</ol>

Любое использование торговых наименований, названий продуктов или фирм носит исключительно описательный характер и не подразумевает одобрения со стороны правительства США.

Обзор альтернативного способа извлечения отолитам из осетрины тушек был подробно описан. Важно отметить, что особое внимание необходимо уделить боковой размещения надрез по средней линии черепа, чтобы рассекают череп равномерно, чтобы гарантировать никакого вреда отолитах во время диссекции. Если надрез не достаточно глубоко, чтобы полностью рассекают череп будет очень трудно раскрыть полость мозга, где расположение отолитах четко виден. С опытом, общая методика является относительно простым и приводит к высоким процент...

Осетр (осетровые) населения по всему миру сокращается на протяжении более ста лет из - за воздействий , включая потери среды обитания, фрагментации населения и чрезмерной эксплуатации таким образом, что многие группы населения защищены государственными и федеральными законами 1,2. Органов управления на всей территории США и мира определили осетра в качестве целевых видов для восстановления и восстановления 1. Характеристики населения (рост, набор, диета) большинства популяций осетровых рыб были изучены , чтобы лучше понять основные биологии и истории жизни характеристики 1. Из охраняемого статуса большинства популяций осетровых рыб, оценка возраста трудно в небольших популяциях, находящихся под угрозой, где нет никаких оснований не жертва или вреда физическим лицам. Извлечение костных структур с целью оценки возраста и анализа роста была общая методика 3 .The Использование секций плавника лучей , чтобы определить возраст Sturgeна стала практическим несмертельны метод, но проверка техники была ограничена и возраст может быть очень трудно расшифровать у пожилых людей (&gt; 15 лет) 4. Исследователи , оценивающие использование нескольких костных структур в осетра для их использования при проверке возраста в Персидском заливе осетра (Acipenser oxyrinchus desoti) 5, атлантический осетр (A. O. Oxyrinchus) 6, белуга (А. transmontanus) 7, и озеро осетра (А. fluvescens) 8 пришел к выводу , что первый луч маргинальной Грудной плавник при условии , что наиболее точный возраст , но пришли к выводу , это инвазивные процедуры , чтобы быть вредным для более крупных особей. В настоящее время существует разработка с использованием отолитов показателей формы различать североамериканских видов осетровых рыб с очень высокой скоростью успеха 9. Более подробная информация о процессе удаления отолит с дорсальной поперечным разрезом у основания черепа является общим отолитовая экстраМетод фикция встречается по всей литературе и ясно подробно на Секор и др. (1991) 10. Тем не менее, этот метод трудно реализовать на осетровых рыб, которые имеют очень толстые черепа с отолитам, которые являются малыми и деликатным и будет иметь тенденцию ломаться. Дальнейший обзор литературы не показывает никакой другой подробную методологию процесса отолитового удаления для осетровых рыб. Целью данной работы было подробно альтернативный метод извлечения отолитам из осетрины, войдя в полость мозга с брюшной стороны.

<table><tbody><tr><td>Измерительная доска</td><td></td><td></td><td>Метрическая измерительная палочка предпочтительна</td></tr><tr><td>Весы</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Филетирующий нож</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Щипцы</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>для скальпеля</td><td></td> Пробирки <td></td><td></td> для образцов 25 мл сцинтилляционные флаконы хорошо работают</tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

Альтернативный метод удаления Отолиты из осетрины

Alternative Method of Removing Otoliths from Sturgeon

Извлечение отолитам (ушные кости) из рыбы, которые имеют очень толстые черепа может занять много трудной и очень много времени. Обычная практика делает поперечный вертикальный разрез на верхней части черепа с рукой или электрической пилы может привести к повреждению отолитные, если не выполнена правильно. Осетровые (осетровые) являются одной семьи , в частности, имеют очень большой и толстый череп. Новый лабораторный метод в полость мозга с брюшной стороны рыбы разоблачить отолитам было легче, чем другие отолитовых методов экстракции, найденных в литературе. Методы, рассмотренные в литературе предназначены для поля и являются более эффективными при обработке большого количества рыбы быстро. Тем не менее, этот новый метод был разработан, чтобы быть более подходящим для лабораторных условиях, когда время не прижимает и успешное извлечение из каждого образца имеет решающее значение. Успех поиска и удаления отолитам с помощью этой техники очень высока и не поставить под угрозу SСТРУКТУРА каким-либо образом. Этот альтернативный метод применим к другим подобным видов рыб для извлечения отолитов.

Размер взрослых осетровых рыб по всему миру значительно варьируется, но расположение отолитов соответствует. Было обнаружено , что использование острым ножом филе , чтобы удалить мягкие ткани полости рта легко показано на рис 1D. Электрическая пила кости предпочтительным инструментом для боковой разрез , чтобы обнажить полость мозга на рисунке 1E. Тем не менее, внимание к рассекает средней линии черепа требуется иначе Отолиты может быть подавлено во врем...

Цель протокола - показать эффективный метод извлечения отолитов из туш осетровых.

Extracting the otoliths (ear bones) from fish that have very thick skulls can be difficult and very time consuming. The common practice of making a ...

Общая цель данного метода заключается в предоставлении эффективной альтернативной методики извлечения неповрежденных отолитов у видов рыб, находящихся под угрозой исчезновения, таких как атлантический осетр. Данный метод извлечения отолитов позволяет ответить на ключевые вопросы о возрасте и росте рыб, расположении слуховых косточек относительно морфологии головного мозга, а также о микрохимии, коррелирующей с условиями среды обитания. Преимущество этой техники заключается в том, что у рыб с толстым черепом и хрупкими отолитами вскрытие полости мозга не повреждает отолиты и не нарушает другие критически важные структуры.Идея этого метода была разработана в ходе исследований по экологии восстановления популяций находящихся под угрозой исчезновения осетровых. В остаточных популяциях образцы для некропсии и лабораторного анализа получаются крайне редко. Поэтому успешный сбор данных о возрасте и других характеристиках отдельных особей имеет решающее значение для восполнения пробелов в данных по этим видам.Марк выполнит процедуру извлечения отолитов из озера стurgeon (Lake Sturgeon). Чтобы извлечь отолиты, сначала положите осетра на живот и с помощью измерительной ленты определите общую длину от рыла до кончика хвоста с точностью до одного миллиметра. Затем взвесьте животное на весах с предварительной установкой нуля с точностью до одного грамма и осмотрите тело на наличие внешних меток или отметок.После записи этих данных с помощью большого филейного ножа сделайте вертикальный разрез туловища между основанием черепа и первым спинным щитком, чтобы отделить голову. После извлечения поверните голову ртом вверх. Затем с помощью филейного ножа сделайте разрез по вентральной стороне черепа, чтобы удалить мягкие ткани.Затем с помощью электрического резака для гипса сделайте разрез от кончика рыла до основания черепа, чтобы полностью разделить голову пополам. Раздвиньте две половины руками, чтобы открыть полость мозга. Затем с помощью пинцета удалите и выбросьте вещество мозга, чтобы обнажить полукружные каналы внутри полости мозга.Удалите хрящ полукружного канала из полости мозга. Затем с помощью кончика пинцета осторожно проколите хрящ полукружного канала. Обнаружив внутри хряща твердую костную структуру, извлеките отолит и погрузите слуховую косточку в 92% ethanol на четыре секунды, чтобы удалить остатки хряща.Наконец, высушите отолит в открытом сцинтилляционном флаконе объемом 25 миллилитров в течение 24 часов. Размер взрослых особей осетровых рыб в разных частях мира значительно варьируется, однако расположение отолитов неизменно. Как было показано, острый нож для филе позволяет легко удалить мягкие ткани ротовой полости.Однако для выполнения латерального разреза с целью обнажения полости мозга предпочтительным инструментом является электрический резак для гипса. Необходимо уделить особое внимание точному разделению черепа по срединной линии. В противном случае в процессе процедуры отолиты могут быть раздавлены.Пинцет облегчает простое удаление мозгового вещества, обеспечивая доступ к хрящу полукружного канала, содержащему отолит в основании полости мозга. Затем с помощью пинцета можно без труда извлечь хрящ полукружного канала из отолита для последующего анализа ушных костей. При должном навыке и правильном выполнении эта процедура занимает менее пяти минут.При выполнении данной процедуры важно не торопиться при проведении разрезов. Помните, что работа с препарировочными инструментами и погибшей рыбой может быть опасной и сопровождаться неприятным запахом. Поэтому при выполнении данной процедуры необходимо всегда соблюдать меры предосторожности, такие как правильное использование хирургических инструментов и использование подходящих СИЗ.После просмотра этого видео вы должны будете хорошо понимать, как вскрыть череп осетра с вентральной стороны и извлечь отолиты, не повредив слуховые кости. После разработки этот метод открыл исследователям в области рыбохозяйственной науки путь к поиску альтернативных способов успешного извлечения отолитов у видов рыб, для которых стандартные методы оказались затруднительными.

alternative-method-of-removing-otoliths-from-sturgeon

Research

JoVE Journal

Environment

Окружающая среда

Цель этого видео, чтобы продемонстрировать процедуры для получения здоровых, неповрежденных клеток волос с внутренними органами уха взрослых данио рерио, а затем использовать их для патч зажим исследований, направленных на характеризующая биофизических свойств их напряжения закрытого каналов.

Patch Clamp Записи в внутренних волосковых клеток уха, изолированных от данио рерио

В этой рукописи описывается протокол для отслеживания перераспределения жабиальных ионоцитов и их иннервации с использованием метода дифференциального окрашивания во времени в сочетании с полной двусторонней денервацией жабр.

Время дифференциальной окраски Техника сочетании с полноценного двустороннего Gill денервации для изучения Ionocytes в Рыбок

Измерение воздействия загрязнителей окружающей среды на поведение рыбы часто субъективны и сложным особенно при работе с сублетальных. Описаны методы , включая видео технологию для количественной оценки плавание поведение ранней жизни стадии белого осетра (Acipenser transmontanus) во время и после 96 ч острого воздействия различных концентраций меди.

Количественная рыба плавание поведение в ответ на Острое отравление водного раствора меди с помощью с помощью компьютера видео и цифрового анализа изображений

Жаберный скелет, включая жаберные тычинки, глоточные зубы и жаберные кости, служит основным местом обработки пищи у большинства рыб. Здесь мы опишем протокол препарирования и плоской установки этого внутреннего скелета в трехиглые колюшки. Этот метод применим и к множеству других видов рыб.

Вскрытие и Flat-крепление трёхиглая колюшка жаберных Skeleton

(Rana catesbeiana) саккулюс Американского Bullfrog в позволяет прямое исследование волос клеточной физиологии. Здесь Вскрытие и подготовка саккулюса в Bullfrog для биофизических исследований описана. Мы показываем репрезентативные эксперименты из этих волосковых клеток, в том числе при расчете соотношения сила-смещение пачкой и измерения его движения непринужденно.

Физиологический Получение волосковых клеток из саккулюс американского Bullfrog (<em&gt; Рана catesbeiana</em&gt;)

На здоровье диких рыб может использоваться в качестве показателя состояния водных экосистем. Оценки на основе патанатомия рыбы здоровья обеспечивают документации видимых повреждений или нарушений, данные, используемые для расчета индексов состояния, а также возможность собрать тканей для микроскопической оценке, экспрессии генов и других более глубокий анализ.

Оценка здоровья на основе патанатомия диких рыб

Это протокол для моделирования спектра размеров (масштабирование взаимосвязи между индивидуальной массой и плотностью населения) для комбинированных данных о рыбе и беспозвоночных из болотных ручьев и рек. Методы включают: полевые методы сбора количественных образцов рыбы и беспозвоночных; лабораторные методы стандартизации данных на местах; и анализ статистических данных.

Моделирование спектра размеров для макробеспозвоночных и рыб в экосистемах потока

В этом исследовании мы представляем протокол для извлечения кортизола из плавника и челюстной кости видов осетровых. Уровни фин и кортизола челюстной кости были дополнительно изучены путем сравнения двух стиральных растворителей, за которыми следуют анализы ELISA. Это исследование пилотировало осуществимость кортизола челюсти в качестве нового индикатора стресса.

Извлечение кортизола из осетровых плавников и челюстных матрис

Целью протокола является предоставление промышленно йентаризации рыбы методика на основе прививки Saccharomyces cerevisiae.

Приготовление высококачественного ферментированного рыбного продукта

Внеклеточная многоразовая запись обонятельного нерва является чувствительным, надежным и воспроизводимым методом оценки обонятельной чувствительности морских рыб. Он записывает первичный сенсорный вход и не зависит от внешней солености.

Внеклеточная многоразовая запись с обонятельного нерва телеостов

В статье описан быстрый протокол гонадетомизации и отбора проб крови у маленьких телеостных рыбок, используя японскую медаку(Oryzias latipes)в качестве модели, для исследования роли половых стероидов в физиологии животных.

Процедуры гонадэктомии и забора крови в малогабаритной модели Teleost японской медаки (Oryzias latipes)

Узнайте альтернативный метод извлечения целых отолитов из осетрины для исследований возраста и роста рыб. Эта техника сохраняет хрупкие структуры и помогает учёным изучать редкие виды.

Альтернативный метод удаления Отолиты из осетрины

Больше видео