Фагосоме Миграция и скорость, измеренная в живых первичных макрофагах человека, инфицированных ВИЧ-1

Общая цель этого анализа заключается в количественной оценке скорости фагосом в инфицированных ВИЧ-1 макрофагах с использованием простого ручного метода отслеживания. Преимущество этого протокола заключается в том, что он предоставляет простой метод вычисления относительных перемещений групп объектов в ячейке, которые могут быть как движущимися, так и деформированными. Этот метод дает представление о движении фагосом в GFP-положительных инфицированных макрофагах, но он может быть использован и для других межклеточных компартментов в флуоресцентно помеченных клетках.

После заражения макрофагов, полученных из моноцитов человека, и опсонизации клеток крови, выращенных у овец, в соответствии с текстовым протоколом, был проведен анализ на фагоцитоз с использованием системы конфокальной визуализации, такой как микроскоп с вращающимся диском, оснащенный камерой нагрева при температуре 37 градусов Цельсия, с углекислым газом. Перед началом эксперимента включите нагревательную камеру, чтобы нагреть предметный столик микроскопа до 37 градусов Цельсия. Затем включите микроскоп и компьютер и загрузите программное обеспечение для визуализации.