Изоляция, дифференцировку и Количественная человеческого антитела секретирующие В-клетки из крови: Elispot в качестве функционального считывания показаний гуморального иммунитета

Общая цель данной методологии ELISpot заключается в том, чтобы обеспечить количественную оценку В-клеток, секретирующих антитела человека, из крови. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в биомедицинской области об иммунологии В-клеток и исследованиях вакцин. Основное преимущество этого метода заключается в том, что он позволяет обнаруживать и измерять В-клетки, секретирующие антитела, на уровне отдельных клеток.

Демонстрировать процедуру будет Цзун-Чи Ценг, аспирант из моей лаборатории. Сразу после взятия образца крови объемом 10 мл из срединной кубитальной вены в пробирку объемом 15 мл, содержащую ЭДТА с добавлением калия, несколько раз переверните пробирку, чтобы предотвратить образование тромба. Затем добавьте в клетки 35 мл буфера для лизиса автоклавированных эритроцитов для пятиминутной инкубации при комнатной температуре.