Симметричный Bihemispheric Посмертное мозга резки для изучения здоровые и патологически Мозговые условия у людей

Общая цель данной процедуры заключается в систематическом сборе и анализе постоянной серии областей головного мозга, симметрично выделенных из обоих полушарий человеческого мозга, для оценки степени тяжести, клинико-патологической стадии и полушарного распределения различных заболеваний головного мозга. Этот метод позволяет ответить на ключевые вопросы в области нейропатологии, предоставляя систематизированную совокупность качественных и количественных нейропатологических данных для детального клинико-патологического и патоморфологического сопоставления с данными визуализации. Основное преимущество данной техники заключается в получении соответствующих данных, касающихся как самих патологических процессов, так и гистофункциональных специализированных аспектов каждого полушария головного мозга.

После фиксации посмертной ткани человеческого мозга в соответствии с текстовым протоколом поместите мозг на плоскую поверхность фронтальными полюсами в сторону, противоположную исследователю. Расположите мозг так, чтобы обеспечить полный и четкий обзор всех извилин и борозд коры всего головного мозга. Осмотрите ткань на наличие аномалий мозговых оболочек, макроскопической асимметрии полушарий, макроскопических особенностей прилегания тканей, врожденных пороков развития, патологий сосудов или любых других отклонений или необычных проявлений на поверхности головного мозга.

Расположите мозг так, чтобы фронтальные полюса были направлены от исследователя, а поверхностные отделы полушарий были обращены к нему. Сделайте необходимое количество цифровых снимков для документирования возможных макроскопических аномалий и учета возможных клинических, нейроанатомических особенностей и факторов, возникающих после разреза. Сделайте цифровые снимки перпендикулярно мозгу, чтобы запечатлеть всю поверхность коры. Затем с помощью чернил или цветных игл отметьте прецентральную и постцентральную извилины коры.

Затем, не разворачивая фронтальные полюса, переверните мозг на 180 градусов и тщательно осмотрите его основание, обращая особое внимание на цереброваскулярные системы и черепные нервы на уровнях выхода и входа в ствол мозга. Обращайтесь с обонятельными луковицами и трактами с особой осторожностью, чтобы избежать разрыва тканей из-за их крайней хрупкости. Сделайте цифровые фотографии перпендикулярно мозгу, чтобы запечатлеть всю поверхность коры и ствола мозга.

Расположив мозг основанием к себе, с помощью скальпеля выполните поперечный разрез ствола мозга в верхней части моста, как можно ближе к основанию головного мозга. Тщательно осмотрите substantia nigra на предмет бледности, а также изучите другие соседние структуры. С помощью устройства для аудиозаписи отметьте любые особенности внешнего вида мозга по сравнению с нормой.

Здесь выполняется препарирование обонятельной луковицы и тракта сначала левого, а затем правого полушарий. Переверните мозг обратно и, используя острый нож, проведите разрез в фронто-окципитальном направлении, чтобы разделить два полушария, рассекая мозолистое тело по центру через медиальную продольную щель. Осмотрите каждую сторону каждого полушария на наличие возможных аномалий.

После того как будет сделано необходимое количество фотографий, включая снимки перпендикулярно мозгу для захвата всей поверхности коры, положите оба полушария на медиальную поверхность так, чтобы лобные доли были направлены от исследователя, а их центры соприкасались. С помощью острого ножа вручную разрежьте оба полушария головного мозга, начиная от фронтальных полюсов и двигаясь к затылочным полюсам по всей длине полушарий, чтобы получить две серии срезов мозговой ткани толщиной 1 см. Расположите срезы мозга в анатомическом порядке и симметричной последовательности на плоской белой поверхности с нанесенной на неё линейкой для последующего фотографирования.

Убедитесь, что корональные поверхности среза доступны для прямого визуального осмотра и цифровой фотографии. Используйте поверхности для резки с нанесенной с обеих сторон миллиметровой сеткой, чтобы более точно локализовать структуры мозга, определить их размеры и возможные патологии. При видимости корональных поверхностей сделайте цифровые снимки перпендикулярно, чтобы запечатлеть всю поверхность коры.

Отметьте любые необычные особенности мозга по сравнению с нормальным мозгом. Затем, используя острый скальпель, вручную вырежьте небольшие прямоугольные блоки мозговой ткани для каждой установленной области головного мозга. Следуйте предложенной схеме сбора образцов областей мозга, описанной в данной таблице.

Создайте идентификационные коды для маркировки гистологических кассет, сгенерировав случайные или полуслучайные числа для каждого случая, где AD означает исследование болезни Альцгеймера (Alzheimer's Disease Study), 16 — год проведения аутопсии, а 0001 — порядковый номер образца. Поместите каждый блок ткани в отдельную гистологическую кассету. Сделайте столько цифровых фотографий всего разрезанного мозга и соответствующих гистологических кассет, сколько было описано ранее.

После получения полного набора снимков вырежьте кусочки ткани размером от двух до пяти миллиметров для экстракции ДНК и генетического анализа. В завершение поместите все гистологические кассеты с блоками тканей мозга в тот же тип фиксирующего раствора, который использовался ранее, и проведите обработку тканей в соответствии с текстовым протоколом. В данной таблице представлены некоторые предварительные полуколичественные данные, полученные с помощью процедуры симметричного бигемисферного среза мозга, выполненной на серии образцов человеческого мозга из банка тканей мозга.

Предварительные данные показывают, что большинство контрольных образцов мозга пожилых субъектов фактически оказались положительными на наличие бета-A нейритных бляшек и тау-нейрофибриллярных клубков, а уровни нерастворимых бета-A нейритных бляшек были выше в левой энторинальной коре и гиппокампе по сравнению с теми же областями мозга в правом полушарии. После освоения данной методики время ее выполнения составляет один час для фиксированного мозга и два часа для свежего мозга при условии правильного проведения процедуры. При выполнении данной процедуры важно строго придерживаться предложенной схемы разрезов и собирать образцы из каждой области мозга обоих полушарий, опираясь на точные знания по анатомии человека.

После выполнения данной процедуры могут быть применены другие методы, такие как экстракция ДНК, РНК или белков, для получения ответов на дополнительные вопросы, например, оระดับ активации конкретного гена в определенной области мозга в конкретном полушарии при определенном заболевании мозга. По мере распространения эта методика откроет перед исследователями в области нейропатологии, клинической патологии и корреляции патологии с методами визуализации возможности изучения аспектов патологии различных нейропсихиатрических заболеваний, связанных с полушариями. После просмотра этого видео вы должны получить четкое представление о том, как отбирать образцы из конкретных анатомических областей обоих полушарий человеческого мозга для оценки степени тяжести заболевания, патологической стадии заболевания и полушарного распределения различных нейропатологических процессов.

Не забывайте, что работа с человеческим мозгом — это работа с историей человека со сложными нейроанатомическими цепями и, возможно, различными заболеваниями, а с лезвиями, скальпелями и формалином необходимо обращаться с крайней осторожностью.