Мышь Модель усталости, индуцированный Peripheral Облучение

Мы опишем метод с использованием целевого периферийного облучения, чтобы вызвать усталость, как поведение у мышей. Выбранная нелетального доза облучения приводит к недельным сокращению добровольного колесного хода деятельности.

Общая цель этой процедуры заключается в измерении усталостного поведения, вызванного периферическим облучением. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы об усталости и, в частности, об усталости, связанной с облучением. Например, его можно использовать для изучения различных ролей иммунной системы и центральной нервной системы при усталости после облучения.

Основное преимущество этого метода заключается в том, что он специально использует периферическое облучение для воздействия на усталостное поведение, по сути, управляемое. Начните с рандомизации мышей на фиктивные облученные контрольные группы или группы облучения. Затем определите пятинедельных самцов мышей по татуировке на хвосте и назначьте каждой мыши индивидуальную стандартную вентилируемую клетку для мышей.

Дайте мышам акклиматизироваться в своих клетках еще как минимум три дня, осторожно обращаясь с каждой мышью в течение трех минут в день. Затем познакомьте мышей с индивидуальными вольными клетками для бега по колесам, или VWRA, каждая из которых оснащена беговым колесом, подключенным к электронному счетчику для непрерывной записи. Инициируйте запись VWRA через интерфейс компьютерного программного обеспечения.

Установите интервалы записи в один час и продолжительность не менее пяти дней. Наконец, через пять дней прекратите запись VWRA через программный интерфейс и верните мышей в их стандартные клетки без ходовых колес. После обезболивания мыши подтвердите, что анестезия была эффективной, ущипнув палец ноги.

Используйте мазь для глаз для профилактики сухости. Далее перенесите мышь под наркозом в свинцовое экранирующее устройство. Расположите мышь в защитном кожухе так, чтобы была открыта только нижняя часть живота и тазовая область.

Затем с помощью медицинской ленты закрепите основание хвоста мыши в положении внутри экранирования, чтобы положение не изменилось во время облучения. Если мышь находится в группе облучения, подайте 800 сантигрей с мощностью дозы около 110 сантиграев в минуту. Если мышь находится в контрольной группе фиктивного облучения, оставьте мышь в неактивном облучателе на эквивалентное время.

После завершения облучения снимите мышь с облучателя и экранирования и верните ее в исходную стандартную клетку. Непрерывно следите за мышью, пока она не придет в сознание, достаточное для поддержания лежачего положения за грудиной. После трех последовательных дней облучения пересадите мышей в их индивидуальные клетки VWRA.

Наконец, чтобы зафиксировать радиационно-индуцированную усталость, запишите VWRA в течение 15 дней. Эффект был значимым в течение первых семи дней после облучения, при этом наименьшее среднее расстояние VWRA наблюдалось на третий день после облучения. Здесь показано распределение изменения VWRA от до до и после облучения.

В то время как у большинства протестированных мышей наблюдались симптомы, похожие на усталость, было небольшое количество мышей, у которых наблюдались незначительные изменения или даже увеличение VWRA. При попытке выполнить эту процедуру важно убедиться, что мыши полностью обезболены во время облучения, так как любые движения могут повлиять на нацеливание и дозу облучения. После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее понимание того, как использовать периферическое направленное облучение для индуцирования усталостного поведения у мышей.