Использование модели Пятачка для исследования нейротоксичности, вызванной анестезией (AIDN): подход с трансляционной нейронаукой

Общая цель этой экспериментальной процедуры заключается в оценке влияния анестетиков на мозг новорожденного на клинически значимой модели трансляционного поросенка. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области нейротоксичности, вызванной анестезией, например, как возникает токсичность и изменения в развитии, которые сопровождают такую токсичность. Основное преимущество этого метода заключается в том, что он обеспечивает трансляционно релевантную животную модель для изучения нейротоксичности развития, вызванной анестезией, при которой физиологический гомеостаз поддерживается на протяжении всего эксперимента.

Во время индукции анестезии и на протяжении всей процедуры контролируйте следующее: пульсоксиметрию, неинвазивное артериальное давление, электрокардиографию и температуру. Самым важным этапом во время этой процедуры является поддержание физиологического гомеостаза. Это включает в себя мониторинг, управление температурой, искусственную вентиляцию легких и биохимический анализ крови.

Чтобы подготовить поросенка к операции, сначала поместите периферический внутривенный катетер 24 калибра в краевую вену уха. Прогрейте поросенка подогревом принудительного воздуха. Контролируйте его температуру с помощью ректального термометра и непрерывно вливайте декстрозу, содержащую изотоническую жидкость, с поддерживающей скоростью.

Затем уложите поросенка в спинное лежачее положение для интубации трахеи. Затем распылите на голосовые связки 0,5 миллилитра 2% лидокаина, чтобы предотвратить спазмы во время интубации, а затем введите трехмиллиметровую трахеальную трубку с манжетой в трахею. Закрепите трубку, а затем проверьте наличие двусторонних дыхательных шумов с помощью аускультации грудной клетки с помощью стетоскопа и проверьте наличие устойчивого концевого углекислого газа в конце прилива.

Далее нанесите на глаза офтальмологическую мазь. Непосредственно перед началом операции введите антибиотик широкого спектра действия через периферическую внутривенную капельницу, чтобы предотвратить инфекцию области хирургического вмешательства. Теперь простерилизуйте оба паха, используя как минимум два скраба с хлоргексидином, чтобы обеспечить надлежащую стерильность поля.

Попросите операционный персонал надеть шапочки, маски, перчатки и средства защиты глаз. Затем драпируйте животное. Для начала пропальпируйте бедренный пульс в паховой складке.

А затем с помощью скальпеля сделать поверхностный краниокаудальный разрез размером 1,5 сантиметра. Далее сделайте тупое рассечение между двумя головками грацилисной мышцы. Теперь найдите бедренный сосудисто-нервный пучок.

Обычно он находится между двумя мышцами. Затем с помощью сосудистых петель или шелковых завязок изолируйте артерию на проксимальном и дистальном концах. Далее, используя петлю на проксимальном конце, потяните артерию вверх до уровня кожи дистально и наложите вытяжение на проксимальную узелку, чтобы прервать кровоток.

Сохраняя вытяжение, используйте тенотомические ножницы, чтобы сделать небольшую артериотомию. Затем введите катетер или полиэтиленовую трубку непосредственно в сосуд. Следует немедленно наблюдать возврат крови.

Теперь немедленно прикрепите и закрепите катетер, подключенный к датчику давления. Затем накройте готовый разрез стерильной марлей и промойте катетер обычным физиологическим раствором. На протяжении всего воздействия обезболивающим препаратом следите за жизненными показателями поросенка.

Ищите нарушения, которые могут указывать на гипотензию, аритмию, гипо- или гипертермию или гипоксию. Не реже одного раза в час во время эксперимента берите образец артериальной крови из катетера бедренной артерии. Затем используйте автоматизированную систему анализа для сбора показателей крови из образца.

После достаточного воздействия анестезии удалите катетер бедренной артерии и осторожно перевяжите проксимальный сосудистый шелковый шов, чтобы навсегда окклюзировать бедренную артерию и предотвратить кровотечение. Затем орошите разрез от 10 до 20 миллилитров физиологического раствора, чтобы предотвратить инфекцию. Как только полный гемостаз будет подтвержден, закройте разрез шелковым швом 3-0 по простой прерывистой схеме.

Теперь проникните в рану бупивакаином и адреналином для обезболивания. Затем покройте разрез стерильным хирургическим клеем для кожи, прекратите прием анестетика и дайте поросенку проснуться. Было изучено 40 поросят мужского пола.

Между контрольной и экспериментальной группами не было существенной разницы в отношении их возраста и веса. Все находились под всесторонним наблюдением во время процедуры и все хорошо ее переносили. Средние лабораторные показатели во время экспериментов в группе изофлурана иллюстрируют внутреннюю согласованность и воспроизводимость процедуры.

Согласованность наблюдалась в течение двух лет, когда данные были объединены от разных операторов. После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее понимание того, как использовать физиологически подходящую трансляционную модель поросенка для ответа практически на любой вопрос доклинических педиатрических исследований. Не забывайте, что работа с анестезирующими веществами может быть опасной, и при выполнении этой процедуры всегда следует принимать меры предосторожности, такие как удаление соответствующего анестетического газа.