Подготовка и наблюдение Толстые биологических образцов с помощью сканирующего трансмиссионной электронной томографии

Общей целью данной процедуры является получение трехмерной реконструкции с восстановлением глубины резкости толстого биологического образца с помощью сканирующей просвечивающей электронной томографии с конвергентным пучком. Этот метод может ответить на ключевые вопросы в области структурной биологии об электронной томографии толстых биологических образцов. Основное преимущество этого метода заключается в том, что изображения могут быть получены в сходящемся битовом режиме, а обработка данных может быть выполнена в большинстве программ, предназначенных для томографии.

Чтобы начать подготовку образца для клеточной культуры, центрифугируйте образец при давлении 5000 x g в течение пяти минут. Используйте эти параметры центрифугирования во время подготовки образцов. Выбросьте надосадочную жидкость и ресуспендируйте клетки в одном миллилитре PBS, обогащенном 4% параформальдегида и 2% глутеральдегида.