Одноклеточный экспрессии генов профилирование с помощью FACS и КПЦР с внутренними стандартами

16.3K просмотров

Цитируется: 7

10:50 мин.

25 февраля 2017 г.

10.3791/55219-v

25 февраля 2017 г.

16.3K просмотров

Мы описываем метод сортировки одиночных клеток млекопитающих и количественной оценки экспрессии до 96 целевых генов, представляющих интерес в каждой клетке. Этот метод включает в себя использование внутренних стандартов количественной ПЦР для оценки абсолютного количества транскриптов.

Больше видео

Сортировка методом FACS

Chapters in this video

0:05

Название

0:56

Приготовление стандартов из очищенных ампликонов ДНК и обработка клеток MCF7 p53-Venus

1:53

Приготовление лизирующего буфера для сортировки клеток

4:15

Настройка клеточного сортера, сбор и сортировка клеток

5:47

Обработка экзонуклеазой и контроль качества сортировки с помощью кПЦР

7:02

Измерение экспрессии генов с помощью микрофлюидной кПЦР

9:03

Результаты: профилирование экспрессии генов в единичных клетках с использованием FACS-анализа и кПЦР

10:09

Заключение

Related Videos