Тандем аффинной очистки белковых комплексов из эукариотические клетки

15K просмотров

Цитируется: 7

11:30 мин.

26 января 2017 г.

10.3791/55236-v

26 января 2017 г.

15K просмотров
 ,  , 

* These authors contributed equally

Мы описываем здесь новый, надежный и эффективный метод тандемной аффинной очистки (TAP) для экспрессии, выделения и характеристики белковых комплексов из эукариотических клеток. Этот протокол может быть использован для биохимической характеристики дискретных комплексов, а также для идентификации новых интеракторов и посттрансляционных модификаций, которые регулируют их функции.

Больше видео

Изоляция белковых комплексов

Chapters in this video

0:05

Название

0:52

Сбор клеток

1:39

Лизис клеток

6:01

Уравновешивание FLAG-гранул

2:32

Уравновешивание STREP-гранул

3:56

STREP-аффинная очистка (AP)

7:04

FLAG-иммунопреципитация (IP)

8:39

Результаты: успешная очистка комплекса циклин-CDK методом тандемной аффинной очистки (TAP)

10:26

Заключение

Related Videos