Неврологическое Reflex Тестирование в неонатальных крысах Pups

Общая цель этой методики рефлексов новорожденных крыс состоит в том, чтобы научиться выполнять эти задачи быстро, точно и сопоставимо. Этот метод может ответить на ключевые вопросы в области нарушений развития нервов, таких как церебральный паралич. Основное преимущество этой методики заключается в том, что она предлагает способ проверки рефлексов раннего развития у новорожденных крысят.

Как и у людей, у новорожденных грызунов есть рефлексы раннего развития, которые открывают окно в более позднее развитие. Люди, плохо знакомые с этим методом, будут испытывать трудности, так как рефлексы развиваются быстро, и их может быть трудно набрать. Важно быть максимально последовательным.

Применение этого метода распространяется на терапию и диагностику церебрального паралича и нарушений развития. Определение рефлекторного поведения является золотым стандартом для установления и эффективности терапевтических вмешательств. Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение, так как шаги трудно выучить через письменные слова.

Для начала приучите крыс к окружающей среде и обращению с человеком, как описано в сопроводительном текстовом протоколе. После акклиматизации спаривайте крыс, чтобы получить выводок щенков для тестирования. Начиная с третьего дня после рождения, переводите щенков в тихую комнату в одно и то же время каждый день.

Дайте им акклиматизироваться в течение как минимум одного часа, прежде чем выполнять ряд тестов на рефлексы развития нервной системы. В комнате установите грелку или грелку, чтобы поддерживать температуру тела щенка на уровне 36,5 градусов по Цельсию. Кроме того, записывайте вес щенка каждый день.

Далее настройте видеокамеру с выдержкой не менее 1/1000 секунды для покадрового анализа рефлексных тестов. Расположите камеру так, чтобы она находилась прямо над крысятником и материалами для тестирования или рядом с ними во время каждого испытания. Для каждого из следующих тестов выполняйте тест каждый день до тех пор, пока щенок не сможет выполнять задание в течение двух дней подряд.

Дата первого случая – это дата, которая должна быть записана для количественной оценки данных. Начиная с третьего дня после рождения, проведите тест на хватательный рефлекс передних конечностей. Для этого теста приложите тупой стержень к ладони каждой из передних лап щенка, по одному, и вручную слегка надавите.

Давление должно немного сместить переднюю лапу, чтобы обеспечить контакт, и щенки могли почувствовать стержень. Хватание будет проявляться как сгибание всех пальцев вокруг стержня. Успешное приобретение этого рефлекса происходит, когда обе передние лапы захватывают стержень в течение двух дней подряд.

Затем приложите тупой стержень к подошве каждой задней лапы и слегка надавите вручную, чтобы провести тест на рефлекс захвата задних конечностей. Легкое давление должно немного сместить заднюю лапу, чтобы обеспечить контакт и щенки могли почувствовать стержень. Успешное захват стержня проявляется в виде сгибания пальцев вокруг стержня.

Приобретение этого рефлекса происходит, когда обе задние лапы сжимают стержень два дня подряд. Также, начиная с третьего дня после рождения, проведите тест на выпрямляющий рефлекс. Для этого теста крепко держите щенка в лежачем положении так, чтобы все четыре лапы были в вертикальном положении.

Отпустите щенка и сразу же запустите таймер. Выпрямление достигается, когда щенок способен перевернуться или перевернуться на все четыре лапы, и каждая лапа перпендикулярна телу. Дайте каждому щенку максимум 15 секунд для достижения этой цели.

Начиная с четвертого дня после рождения, проведите тест на рефлекторное определение положения задних конечностей. Для этого теста держите щенка вертикально в воздухе за туловище. Аккуратно погладьте тыльную сторону задней лапы тупой поверхностью, например, по краю стола.

Правильный рефлекс постановки — это когда крысух отводит стимулированную заднюю конечность, после чего задняя конечность опускается на эту поверхность. Кроме того, начиная с четвертого дня после рождения, проведите тест на избегание обрыва. Для этого теста поместите щенка крысы на край плоской поверхности так, чтобы передние лапы и морда щенка находились над краем.

Правильным исходом является защитная реакция, когда крысук отворачивается от края обрыва. Начните оценку походки на шестой день после рождения. Для этого теста поместите щенков в центр круга диаметром 15 сантиметров и дайте ему 30 секунд, чтобы отойти от круга.

Успешная походка выполняется, когда крысиный щенок способен вывести обе передние лапы за пределы круга менее чем за 30 секунд. Приступайте к анализу слухового испуга на 10-й день после рождения. Здесь требуется что-то, например, колокол, способное издавать громкий шум.

Расположите колокольчик прямо над щенком. Позвоните в колокольчик, а затем оцените, присутствует ли реакция испуга. Положительная реакция испуга наблюдается, когда щенок совершает дергающееся движение в сторону от звука.

Начиная с 12-го дня после рождения, поместите щенков на нескользкую открытую поверхность и наблюдайте за позой щенка при движении. Незрелая осанка отражается волочением живота при движении и перпендикулярным направлением как передних, так и задних лап относительно тела. Зрелая осанка приобретается, когда щенок может поднять брюшную полость от поверхности, а обе передние и задние лапы направлены прямо или параллельно телу при движении.

Кроме того, начиная с 12-го дня после рождения, начните наблюдать за веками щенка. Запишите день, когда оба века откроются. На 14-й день после рождения начните ускоренное тестирование.

Для этого теста поместите щенка в положение лежа на спине на высоте 30,48 сантиметра над посадочной площадкой из пенопласта. Бросьте щенка и понаблюдайте за его способностью выпрямляться. Правильное выпрямление относится к моменту, когда щенок способен перевернуться в положение лежа и приземлиться на лапы.

Новорожденные детеныши, подвергшиеся внутриутробному воспалению, рождались значительно меньше, чем в контрольной группе. Пищевая добавка с ростками брокколи смогла увеличить вес этих детенышей при рождении. Наряду с весом при рождении, тестирование рефлексов развития нервной системы является прогностическим показателем аномального развития коры головного мозга и созревания, что может иметь значение в обстоятельствах, когда явная нейропатология не проявляется.

После рождения обследование размещения задних конечностей новорожденных в этих группах показало значительную задержку в приобретении этого рефлекса у щенков, подвергшихся внутриутробному воспалению, по сравнению с контрольной группой. Пищевая добавка с ростками брокколи предотвратила задержку. Результаты неонатального теста на избегание обрыва показали, что у детенышей, подвергшихся внутриутробному воспалению, значительно задерживается приобретение защитной реакции.

Опять же, потребление ростков брокколи предотвратило значительную задержку. Этот же результат был замечен после обследования рефлекторной походки новорожденных. Во время этой процедуры могут быть выполнены другие методы, такие как ежедневная запись веса, чтобы ответить на дополнительные вопросы, такие как ежедневный темп роста, догоняющий рост, серьезность травмы и эффект ограничения роста.

После своего развития этот метод проложил путь исследователям в области нейробиологии к изучению тестирования рефлексов развития у неонатальных грызунов. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как проводить раннее тестирование рефлексов развития у новорожденных крысят. Кроме того, вы должны понимать важность ранних поведенческих рефлексов, поскольку они обеспечивают ранний биомаркер травмы и эффект терапевтического вмешательства.