G-квадруплекс ДНК-сродства подход для очистки ферментативно активной G4 Resolvase1

9K просмотров

Цитируется: 6

11:25 мин.

18 марта 2017 г.

10.3791/55496-v

18 марта 2017 г.

9K просмотров

* These authors contributed equally

G4 Resolvase1 связывается с G-квадруплексных (G4) структур с тайтового сообщенной сродства к G4-связывающего белка и представляет большинство разматывания активности G4-ДНК в клетках HeLa. Мы опишем протокол романа, использующую сродство и АТФ-зависимый разматывания активность G4-Resolvase1 специфически очистить каталитически активный рекомбинантный G4R1.

Больше видео

АТФ-зависимая очистка

Chapters in this video

0:05

Название

0:54

Лизис бактериальных пеллет, экспрессирующих рекомбинантную G4-резольвазу 1 человека (rG4R1)

3:06

Подготовка магнитных бус с G4

4:07

Связывание rG4R1 с гистидиновой меткой с кобальтовыми бусами

5:47

Элюция rG4R1 с кобальтовых бус

7:07

Связывание rG4R1 с SPB-бусами, связанными с G4, и АТФ-зависимая элюция

8:55

Результаты: анализ и количественное определение каталитически активного очищенного rG4R1

10:06

Заключение

Related Videos