Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinoma Samples

Simone Punt; Robert J. Baatenburg de Jong; Ekaterina S. Jordanova

doi:10.3791/55589

Четырехцветная флуоресценция Иммуногистохимия субпопуляций Т-клеток в архивных формалиновых фикси...

JoVE Journal
Cancer Research

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Cancer Research

Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinoma Samples

Четырехцветная флуоресценция Иммуногистохимия субпопуляций Т-клеток в архивных формалиновых фиксированных, парафиновых встраиваемых образцах проксимальной клеточной карциномы человека

Full Text

10,349 Views

07:43 min

July 29, 2017

DOI: 10.3791/55589-v

Simone Punt¹, Robert J. Baatenburg de Jong², Ekaterina S. Jordanova^1,3

¹Department of Pathology,Leiden University Medical Center, ²Department of Otorhinolaryngology and Head and Neck Surgery,Erasmus University Medical Center, ³Center for Gynecological Oncology Amsterdam,VU Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study utilizes multiparameter fluorescence immunohistochemistry to analyze T-cell subpopulations in oropharyngeal cancer. The technique allows for the assessment of immune cell populations within the tumor microenvironment.

Key Study Components

Area of Science

Immuno-oncology
Fluorescence microscopy
Cancer research

Background

Understanding immune cell distribution in tumors is crucial for cancer prognosis.
Oropharyngeal squamous cell carcinoma is a type of cancer that can be analyzed using this method.
Immune cell subpopulations may influence patient outcomes.
Multiparameter techniques enable visualization of multiple biomarkers simultaneously.

Purpose of Study

To visualize and enumerate T lymphocyte subpopulations in cancer tissue.
To explore the relationship between immune cell presence and patient prognosis.
To enhance patient stratification for immune therapies.

Methods Used

Utilization of archival formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections.
Application of multicolor immunohistochemistry for visualization.
Enumeration of various T lymphocyte subpopulations.
Preparation of tissue sections using a micro tongue technique.

Main Results

Successful visualization of multiple immune cell markers in one section.
Identification of T-cell subpopulations in oropharyngeal cancer samples.
Potential correlation between immune cell distribution and patient outcomes.
Insights into patient stratification for targeted immune therapies.

Conclusions

Multiparameter fluorescence immunohistochemistry is effective for analyzing immune cells in tumors.
This technique can provide valuable prognostic information in cancer therapy.
Future studies may further elucidate the role of immune cells in cancer progression.

Frequently Asked Questions

What is the significance of T-cell subpopulations in cancer?

T-cell subpopulations can influence tumor immunity and patient prognosis, making their analysis crucial for understanding cancer outcomes.

How does multiparameter fluorescence immunohistochemistry work?

This technique allows for the simultaneous visualization of multiple biomarkers in tissue sections, providing a comprehensive view of immune cell populations.

What types of cancer can this method be applied to?

While this study focuses on oropharyngeal cancer, the technique can be adapted for various types of tumors in cancer research.

What are the implications of this research for cancer therapy?

The findings may help in patient stratification for specific immune therapies, potentially improving treatment outcomes.

Can this method be used on fresh tissue samples?

This study specifically uses archival formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections, but similar techniques can be adapted for fresh samples.

What are the challenges associated with this technique?

Challenges may include the complexity of tissue preparation and the need for precise imaging techniques to accurately visualize multiple markers.

Многопараметрическую флуоресцентную иммуногистохимию можно использовать для оценки количества, относительного распределения и локализации популяций иммунных клеток в микроокружении опухоли. В этой рукописи описывается использование этой методики для анализа субпопуляций Т-клеток при раке ротоглотки.

Общая цель данного эксперимента заключается в проведении многоцветной иммуногистохимической визуализации и подсчете различных субпопуляций Т-лимфоцитов в архивных срезах тканей, зафиксированных формалином, залитых парафином, из образцов плоскоклеточного рака ротоглотки. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области иммуноонкологии, такие как существует ли связь между субпопуляциями иммунных клеток, инфильтрирующими опухолевую ткань, и прогнозом пациента. С помощью этой методики можно визуализировать несколько биомаркеров на одном участке ткани.

Применение этого метода распространяется и на терапию рака, поскольку одновременная оценка нескольких иммунных клеток или иммунных факторов может помочь в стратификации пациента для специфической иммунной терапии. Начните с использования микроязычка для получения фиксированных формалином и залитых парафином срезов ткани толщиной четыре микрометра, укладывая тканевые ленты на поверхность деионизированной водяной бани с температурой 45 градусов Цельсия по мере их получения. Чтобы запечатлеть срезы, поместите предметное стекло в воду, прямо под образец ткани, и осторожно переместите предметное стекло вверх под углом.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

Cancer Research Issue 125 Immunology рак головы и шеи микроокружение опухоли флуоресцентная микроскопия Т-клетка клетка Th17 Treg IL-17