25 мая 2017 г.
Дегенерация межпозвоночных дисков является существенным фактором боли в спине и одной из основных причин инвалидности во всем мире. Существуют многочисленные животные модели дегенерации межпозвоночных дисков. Мы демонстрируем овечью модель дегенерации межпозвонкового диска, используя сверло, которое обеспечивает последовательное повреждение диска и воспроизводимый уровень дегенерации диска.
Общей целью этого метода латерального забрюшинного подхода является создание безопасной, последовательной и воспроизводимой модели дегенеративных межпозвоночных дисков у овец. Эта модель дегенерации межпозвоночных дисков поясничного отдела овцы может помочь ответить на ключевые вопросы в области трансляционных исследований позвоночника, предоставляя еще один метод для изучения траектории или физиологии дегенерации межпозвоночных дисков и потенциального исследования регенеративной терапии. Основное преимущество этого подхода заключается в том, что он позволяет последовательно получать хирургическую травму с помощью безопасного хирургического подхода на подходящей животной модели.
После обезболивания и интубации овцы и подготовки операционной по текстовому протоколу поместите животное на операционный стол в правильном боковом положении. С помощью электронных машинок для стрижки сбрейте область, определенную сверху нижними ребрами, снизу подвздошной костью, медиально контралатеральными поясничными поперечными отростками и примерно на 10 сантиметров латерально ипсилатеральными поясничными поперечными отростками. Пальпируйте гребень подвздошной кости, поясничные поперечные отростки и пересеките угол позвонка для ориентиров для этого места хирургического разреза.
Затем с помощью стерильной ручки отметьте эти ориентиры. Далее хлоргексидином и спиртовым йодом промыть антисептиком, продезинфицировать боковую часть живота. Затем поместите стерильную фенестрированную квадратную простыню над операционным местом и большую стерильную квадратную простыню на верхний стол, а затем стерильные инструменты.
Под хирургическим увеличением лупы и фарой введите местный анестетик, а затем с помощью лезвия 22 скальпеля, прикрепленного к рукоятке из четырех скальпелей, сделайте продольный разрез параллельно и на один сантиметр впереди одного-двух поясничных поперечных отростков выше и ниже интересующих уровней межпозвоночных дисков. С помощью монополярной диатермии разделяют подлежащую подкожную клетчатку и латеральную поверхность мускулатуры брюшной стенки. Направление диссекции в сторону кончиков поясничных поперечных отростков, выше и ниже интересующих межпозвоночных дисков.
Далее разделите грудопоясничную фасцию в продольном направлении в месте ее прикрепления к поперечным отросткам. Визуализируйте и сохраните нижележащую квадратную мышцу поясницы, камбаловидные мышцы и проходящие через сосудисто-нервные пучки. Используя диатермию, поддерживать гемостаз на протяжении всей процедуры.
Проведите пальцами между плоскостью брюшины и задней мускулатурой брюшной стенки на уровне открытых межпозвоночных дисков, чтобы выполнить пальцевое тупое рассечение. Теперь, используя ретрактор diva, втяните квадратный поясник и камбаловидные мышцы сзади латерально, чтобы еще больше обнажить межпозвоночные диски. Затем пальпируйте вогнутые межпозвонковые тельца и выпуклые межпозвонковые диски.
Расположите втягивающие устройства непосредственно над дисками и следите за тем, чтобы поясничные сосуды не были повреждены. Затем, с помощью хирургического увеличения лупы с помощью фары, определите поясничные сосуды, которые расположены примерно на один сантиметр каудально от нижней торцевой пластины. После проведения интраоперационной боковой рентгенографии для подтверждения уровня диска, в зависимости от желаемого уровня диска, обнажите межпозвоночные диски, отделив окружающие структуры.
Для уровней L три, четыре и выше используйте пальцевое тупое препарирование, чтобы отмести мышечные насадки на диски. Для уровней L четыре, пять и ниже используйте биполярные диатермические ножницы, чтобы резко разделить более толстые сухожильные мышечные прикрепления по диску. Определите точку повреждения сверла, наблюдая за левыми боковыми и внутренними конечностями на межпозвоночном диске.
Уровень диска должен быть подтвержден с помощью бокового рентгена до травмы сверлом. Установите сверло с острием штифта в дрель. Убедитесь, что диаметр сверла немного меньше высоты межпозвоночного диска.
Например, 3,5 миллиметра для поясничных межпозвоночных дисков у овец весом от 60 до 70 кг. Примените упор сверла, чтобы обеспечить незащищенную длину сверла примерно в половину диаметра поясничного межпозвоночного диска. Например, 12 миллиметров для поясничных межпозвоночных дисков у овец весом от 60 до 70 килограммов.
Далее приложите сверло к точке входа и направьте его по траектории немного краниально к центру межпозвоночного диска, что позволит свести к минимуму риск травмирования торцевой пластины. Когда дрель работает на малой мощности, медленно продвигайте сверло в межпозвоночный диск в течение одной секунды. При возникновении чрезмерного сопротивления скорректируйте траекторию движения в незначительной краниальной или каудальной манере.
Как только гемостаз будет достигнут, используйте раствор Рингера для орошения раны. Затем выполните послойное закрытие, предпочтительно с использованием 2-0 рассасывающихся синтетических плетеных нитей на ткани боковой брюшной стенки и непрерывного 3-0 неокрашенного рассасывающегося синтетического подкожного шва на кожу. Здесь показан предоперационный срез сагиттальной плоскости от 3Т МРТ поясничного отдела овцы до пояснично-крестцового межпозвоночного диска без признаков значительной предоперационной дегенерации межпозвоночного диска.
Эта интраоперационная латеральная рентгенограмма подтверждает уровень межпозвоночного диска и позволяет рассчитать индекс высоты диска. Представленный здесь грубый морфологический вид демонстрирует травматический тракт бурового сверла, проникающий в фиброзное кольцо и распространяющийся в пульпозное ядро. Травма также очевидна на этой МРТ 9,4 Тл.
При использовании этого подхода важно направлять сверло краниально и медленно продвигать сверло, чтобы свести к минимуму риск травмы торцевой пластины. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как произвести травму сверлом на модели овцы с помощью латерального забрюшинного доступа. Не забывайте, что работа со скальпелями и прижиганием может быть опасной.
Необходимо всегда соблюдать средства индивидуальной защиты и соответствующие меры предосторожности. Важно поддерживать хирургическую стерильность.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данном исследовании представлена новая модель дегенерации межпозвоночного диска у овец с использованием метода сверления. Эта модель предназначена для облегчения исследований патофизиологии дегенерации дисков и потенциальных методов регенеративной терапии.
Создание надежных доклинических моделей имеет решающее значение для снижения рисков при валидации мишеней в терапии заболеваний опорно-двигательного аппарата. Данная модель дегенерации межпозвоночных дисков у овец представляет собой воспроизводимую систему для оценки патофизиологических механизмов и терапевтических вмешательств. Ее трансляционная значимость позволяет проводить проверку гипотез на ранних стадиях и определять приоритеты портфеля в области исследований и разработок, связанных с позвоночником.
Данная модель интегрируется в рабочие процессы поиска новых лекарственных средств, предоставляя валидированную биологическую систему для оценки мишеней на основе гипотез и механистического скрининга.