27 сентября 2017 г.
Здесь мы описываем методы для лечения новорожденных капсаицин побудить атопический дерматит у крыс и воздействия испаряется формальдегида для расследования последствий вдыхания формальдегида на атопический дерматит.
Общая цель этой процедуры заключается в том, чтобы вызвать атопические симптомы, подобные дерматиту, путем лечения новорожденными капсаицином. И измерить влияние формальдегида на атопические дерматоподобные симптомы. Этот метод может помочь ответить на ключевой вопрос, связанный с патофизиологией атопического дерматита в дерматологической области.
Основным преимуществом этой методики является индукция симптомов, подобных атопическому дерматиту, и создание важной системы воздействия с приращениями. Чтобы приготовить пять миллиграммов на миллилитр раствора капсаицина, добавьте один миллилитр Tween 80, один миллилитр 100% этанола и 50 миллиграммов капсаицина в 15-миллилитровую коническую трубку. Затем добавьте в коническую трубку восемь миллилитров обычного физиологического раствора.
Закройте крышку и энергично встряхните тюбик, пока не останутся отделенные слои. Крайне важно вводить капсаицин в период от 12 до 48 часов после рождения. Введите раствор капсаицина в подкожную клетчатку по средней линии и задней части шеи новорожденной крысы Спрэг Доули.
Чтобы предотвратить остановку дыхания из-за инъекции капсаицина, новорожденных помещают в кислородную камеру до тех пор, пока дыхание не нормализуется. При необходимости надавливайте на грудную клетку новорожденных, чтобы стимулировать дыхание. Начните с подготовки пластиковых камер, оснащенных зеркалом, чтобы обеспечить полное покрытие для обзора, и отверстиями, позволяющими крысам дышать.
Поместите крыс в пластиковую камеру и накройте потолок камеры тяжелым предметом, чтобы крышка не открылась. Затем настройте цифровую видеокамеру, чтобы одновременно записывать как зеркальные, так и передние виды крыс. Затем запишите спонтанное поведение крыс в течение одного часа.
Просмотрите видеоклипы и подсчитайте количество царапающих поведений, таких как у крысы справа. И крыса в центре. Чтобы оценить поражения, определить степень и тяжесть дерматита в ушах и других частях тела крысы, находящейся под наркозом.
Определите размер единицы измерения протяженности поражения кожи как 0,25 сантиметра в квадрате. А тяжесть поражения кожи с помощью этой таблицы. Подготовьте короб из акрилового стекла, который имеет два соединителя с противоположных сторон.
Для циркуляции газа формальдегида выпускное отверстие должно быть расположено выше выпускного отверстия для забора газа. Подсоедините трубки к обоим разъемам. Проложите выпускную трубку к циркуляционному колпаку или наружу здания для выброса газа.
И подсоедините другую входную трубку к медицинскому кислородному регулятору. Поместите обычную клетку для крыс внутрь коробки из акрилового стекла. Посадите в клетку недельных крыс, а затем закройте коробку из акрилового стекла как можно плотнее, чтобы предотвратить утечку газа.
Наклейте пищевую пленку для обертывания камеры и закройте камеру прорезиненной крышкой для плотной герметизации. Добавьте 0,5% раствор формальдегида в баллон с увлажнителем, подключенный к медицинскому кислородному регулятору. Не забывайте, что работа с формальдегидом может быть крайне опасной.
И при выполнении этой процедуры всегда следует принимать меры предосторожности, такие как маски и перчатки. Далее включаем регулятор и устанавливаем расход на пять литров в минуту. Подвергайте крыс воздействию газа формальдегида в течение двух часов.
Здесь представлены репрезентативные фотографии воспаления кожи у крыс, получавших капсаицин. Здесь показано хронологическое развитие дерматита у крыс, получавших капсаицин. Это изображение отражает хронологическое развитие царапающего поведения у крыс, получавших капсаицин.
Это репрезентативное изображение рецидивирующих поражений кожи 16-недельных крыс, получавших капсаицин. Уровни IgE в сыворотке крови значительно повышены у животных, получавших капсаицин. Значительное повышение экспрессии мРНК IL-4 также наблюдается у животных, получавших капсаицин.
Здесь показано значительное повышение экспрессии мРНК IL-13 у животных, получавших капсаицин. Эти репрезентативные фотографии показывают атопический дерматит после пятой недели лечения с использованием 1,2 частей на миллион. И 0,8 частей на миллион формальдегида по сравнению с контролируемой обработкой воздухом.
Воздействие формальдегида в концентрации 1,2 частей на миллион, но не 0,8 частей на миллион формальдегида значительно усугубило зуд в модели атопического дерматита, обработанного капсаицином. Аналогичные результаты наблюдались при измерении дерматита. Повышенные уровни IgE в сыворотке крови наблюдались в модели крыс с болезнью Альцгеймера, обработанных капсаицином, получавших воздействие формальдегида 1,2 частей на миллион.
После этой процедуры другие материалы, такие как раствор гилкола, могут быть использованы для ответа на дополнительные вопросы, связанные с воздействием определенного вещества на атопический дерматит. После этих разработок этот метод проложил путь исследователям в области дерматологии к изучению роли факторов окружающей среды в патогенезе атопического дерматита.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье описываются методы индукции симптомов, напоминающих атопический дерматит, у крыс посредством неонатального введения капсаицина, а также изучения эффектов вдыхания формальдегида. Исследование направлено на более глубокое понимание патофизиологии атопического дерматита.
Экологические триггеры при атопическом дерматите остаются критически важным неизвестным фактором в трансляционной дерматологии, что влияет на прогностическую уверенность при разработке методов терапии. Данная модель на крысах позволяет систематически оценивать воздействие факторов окружающей среды, таких как формальдегид, на прогрессирование заболевания и ответ биомаркеров. Этот подход способствует снижению механистических рисков и служит основой для принятия решений на ранних этапах формирования портфеля разработок в области дерматологии.
Данная модель связывает этап предварительного поиска и доклиническую валидацию, позволяя проводить контролируемую проверку гипотез о влиянии факторов окружающей среды на прогрессирование атопического дерматита.