Высокопроизводительного скрининга для наследования на основе белков в S. cerevisiae

Общая цель этого высокопроизводительного фенотипирования дрожжей заключается в скрининге белков, которые нарушают длительную фенотипическую память о пропущенной экспрессии, в качестве прокси для наследования на основе белка. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области дрожжей Прион, такие как, сколько белков может быть незаконно наследование этого типа. Основное преимущество этого метода заключается в том, что вы можете непредвзято проверять многие белки и пути.

Начните эту процедуру с выращивания соответствующих дрожжевых клеток в 96-луночном планшете при температуре 30 градусов Цельсия, как описано в текстовом протоколе. Визуально осмотрите культуры, чтобы убедиться, что культуры насыщены, клетки должны быть видны на глаз, на дне каждой лунки. Используйте робота для работы с жидкостями для подготовки 384 луночных планшетов, содержащих 45 микролитров соответствующей среды на лунку.