В естественных условиях Обнаружение и анализ SUMOylation белка Rb в клетках человека

Общей целью данного эксперимента является обнаружение SUMOylation белков ретинобластомы в эндогенных и экзогенных условиях в клетках человека. Малые белки, связанные с убиквитином, или семейства SUMO, конъюгированы с остатками лизина белков-мишеней для регуляции различных клеточных процессов. Как правило, запустить SUMOylation белка в клетках сложнее из-за сложности SUMOylation in vivo.

В этом эксперименте обнаруживается SUMOилирование как эндогенных, так и экзогенных белков Rb. Хотя этот метод может дать представление о SUMOylation Rb-белках, он также подходит для обнаружения многих других белков-мишеней SUMO в клетках. Для начала добавьте 25 миллилитров DMEM, содержащего один процент пенициллина стрептомицина, и инкубируйте клетки HEK293 при температуре 37 градусов Цельсия в течение 72 часов.