Ошибка очистки проверки в фармацевтической промышленности из-за душевный поверхности из нержавеющей стали
11 августа 2017 г.
Как крупный вклад в низкой и переменных возмещений в уборке проверки было отмечено отсутствие четко определенной процедурой, которая постоянно чистить поверхности купона. Эта рукопись описывает правильный протокол очистки купоны из нержавеющей стали.
Общей целью данной работы является получение высоких и воспроизводимых результатов восстановления фармацевтических остатков с поверхности купонов из нержавеющей стали путем применения передовых методов аналитической очистки малых молекул, терапевтических белков и антител. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области проверки чистоты в фармацевтической промышленности, например, почему проверка очистки производственного оборудования не проходит. Основное преимущество данного исследования заключается в том, что в нем показана процедура правильной очистки поверхности талонов из нержавеющей стали, используемая для валидации аналитического метода.
Чтобы начать этот эксперимент, приготовьте образцы растворов препарата, растворенного в разбавителе по выбору, после расчета предела очистки для препарата. Очистите талоны из нержавеющей стали, промыв их водой и дважды протерев поверхность в течение 10-15 секунд. Затем повторите этот этап промывки и протирания метанолом, чтобы удалить остатки отложений.
Чтобы выполнить расширенный подход к очистке с использованием растворов для очистки на месте, погрузите купоны в воду с высокопроизводительной жидкостной хроматографией или ВЭЖХ и произведите ультразвуковую обработку в течение двух минут. Погрузите купоны в 0,1%-ный раствор щелочного моющего средства в воду класса ВЭЖХ и обработайте ультразвуком на две минуты. Снова погрузите купоны в воду ВЭЖХ и повторите двухминутное ультразвуковое исследование.
Затем погрузите их в 0,1%-ный раствор кислотного моющего средства в воду ВЭЖХ и обработайте ультразвуком в течение двух минут. Закончите двухминутной ультразвуком в воде ВЭЖХ. Далее, с помощью двустороннего скотча, закрепите купоны из нержавеющей стали на дно пластикового стакана объемом 250 миллилитров.
Держите стакан во время процедуры, чтобы облегчить прокалывание и взятие мазка и избежать несчастных случаев. С помощью пипетки прямого вытеснения введите определенный объем лекарственного препарата в желаемой концентрации и с желаемой формулой в виде вихревого узора на поверхности купона. Как только поверхность купона высохнет, опустите сухой тампон во флакон с двумя миллилитрами разбавителя.
Прижмите тампон к внутренней стороне флакона, чтобы удалить излишки растворителя. Ровными, перекрывающимися движениями из стороны в сторону плотно протрите поверхность купона одной стороной влажного тампона, пока не будет протерта общая тестовая площадь в 50 квадратных сантиметров. Используйте ту же сторону тампона, чтобы повторить процесс протирания.
Промокните каждый из четырех краев купона дважды. Поверните купон на 90 градусов и используйте другую сторону тампона, теперь поворачивая направление протирания на 90 градусов. Повторите очистку с этой стороны тампона таким же образом, дважды протерев все четыре края купона.
После протирания поверхности с помощью ножниц разрежьте головку тампона в флаконе с растворителем. После этого повторите всю процедуру взятия мазка с помощью второго тампона, при этом поворачивая купон на 90 градусов в том же направлении, которое было выбрано ранее. Затем проработайте ультразвуком флакон, содержащий две головки тампона, в течение пяти минут.
Затем переведитефлакон в течение 10 секунд. Наконец, перелейте раствор во флакон с ВЭЖХ и пометьте его как рабочий раствор. Для извлечения образца приготовьте контрольные растворы, смешав 200 микролитров каждого купонного раствора или раствора образца с 1 800 микролитрами разбавителя.
Используйте эти растворы для проведения хроматографии в соответствии с текстовым протоколом. Рассчитайте восстановление рабочего раствора тампона на основе относительной площади под пиками рабочего и контрольного растворов. Повторите этот процесс для трех купонов, чтобы рассчитать среднее извлечение и относительное стандартное отклонение.
До того, как купоны были очищены, результаты восстановления для разных уровней пиков были противоречивыми, независимо от активного фармацевтического ингредиента или соотношения вспомогательных веществ АФИ, разных аналитиков или даже разных дней для одного и того же аналитика. Большинство результатов восстановления имели высокое относительное стандартное отклонение. Наблюдаемая вариабельность восстановления не была устранена при корректировке нескольких различных параметров, включая метод взятия мазка, разбавитель, спайковый растворитель, pH спайка и разбавителя, спайковый метод и метод экстракции.
Разница между индивидуальным восстановлением на каждой поверхности купона и средним восстановлением показывает, что среднее восстановление отличается от одной поверхности купона к другой, поэтому весьма вероятно, что наблюдаемая изменчивость обусловлена различиями между поверхностями купонов. После очистки купонов, описанной в этом протоколе, результаты восстановления были воспроизводимы от одного испытания к другому, с минимальной разницей в восстановлении между купонами. Проведенная здесь купонная очистка привела к тому, что извлечение превысило 90%Кроме того, относительные значения стандартного отклонения для каждого пикового уровня были приемлемыми и меньше, чем результаты, полученные до очистки.
После освоения очистка купонов может быть выполнена менее чем за 30 минут, если она выполнена правильно. Пытаясь выполнить эту процедуру, важно помнить, как правильно проводить скачки и восстанавливаться, не теряя интересующий вас анализ. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как правильно очищать поверхности из нержавеющей стали для получения высоких и воспроизводимых извлечений остатков.
После своего развития этот метод проложил путь исследователям в фармацевтической промышленности к предоставлению надежных данных об очистке производственных процессов.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Обзор
В данном исследовании рассматриваются проблемы верификации очистки от фармацевтических остатков с образцов из нержавеющей стали. В работе представлен валидированный протокол для достижения высокого и воспроизводимого процента извлечения остатков.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Валидация очистки фармацевтического оборудования
- Разработка аналитических методов
- Методы очистки поверхностей
Теоретические основы
- Верификация очистки имеет решающее значение в фармацевтической промышленности.
- Непоследовательность процедур очистки приводит к вариабельности показателей степени извлечения.
- Для валидации обычно используются образцы из нержавеющей стали.
- Правильные методы очистки необходимы для получения точных аналитических результатов.
Цель исследования
- Разработать надежный протокол очистки купонов из нержавеющей стали.
- Повысить степень извлечения остатков фармацевтических препаратов.
- Устранить недостатки в процессах верификации очистки.
Используемые методы
- Приготовление рабочих растворов лекарственных средств в выбранном разбавителе.
- Расчет пределов чистоты для конкретных лекарственных средств.
- Промывание образцов из нержавеющей стали водой.
- Протирание поверхности салфеткой в течение 10–15 секунд.
- Повторное промывание и протирание метанолом для удаления остатков.
Основные результаты
- Описанный метод эффективно очищает поверхности из нержавеющей стали.
- Были достигнуты высокие и воспроизводимые показатели извлечения остатков фармацевтических препаратов.
- Данный протокол решает ключевые проблемы при верификации очистки.
- Улучшено понимание процессов очистки в фармацевтическом контексте.
Выводы
- Применение правильного протокола очистки повышает степень извлечения.
- Данное исследование создает основу для будущих работ по верификации очистки.
- Надлежащие методы очистки имеют решающее значение для валидации аналитических методов.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для отрасли
Нестабильные результаты проверки чистоты, вызванные вариативностью извлечения остатков с поверхностей из нержавеющей стали, представляют собой значительный риск в фармацевтическом производстве, что может привести к ложноотрицательным результатам валидации очистки и поставить под угрозу безопасность продукции. В данном исследовании недостаточно тщательная очистка поверхностей определена как основной источник вариабельности; также представлен стандартизированный протокол безразборной мойки (CIP), который обеспечивает высокий (>90%) и воспроизводимый уровень извлечения как малых молекул, так и крупных биомолекул массой до 50 000 Da. Создание надежной процедуры очистки аналитических образцов-купонов позволяет точно оценивать процессы мойки, обеспечивая принятие решений по санитарной обработке оборудования на основе данных и снижая риск перекрестного загрязнения.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Ранние этапы поиска и валидация мишени
- Научная ценность: Гарантирует, что данные о степени извлечения остатков отражают истинное присутствие аналита, а не вариативность, вызванную влиянием поверхности, что способствует точной интерпретации поведения соединения при первичном скрининге.
- Практическая ценность: Обеспечивает воспроизводимый этап подготовки купонов, который сводит к минимуму межиндивидуальную вариабельность между аналитиками и внутридневную вариабельность при измерении степени извлечения остатков.
Скрининг и разработка анализа
- Научная ценность: обеспечивает стабильное извлечение как низкомолекулярных лекарственных препаратов (<1,000 Da), так и крупных биомолекул (до 50,000 Da), что позволяет единообразно применять метод в различных кампаниях по скринингу различных модальностей.
- Операционная ценность: обеспечивает низкое относительное стандартное отклонение (Srel ≤4%) после очистки методом CIP, гарантируя точность и надежность анализа остаточных количеств при высокопроизводительном скрининге.
Трансляционные и доклинические исследования
- Научная ценность: способствует переносу результатов аналитических исследований от этапа открытия к доклиническим стадиям, обеспечивая стандартизированный метод подготовки поверхности, который снижает вероятность ошибочного приписывания различий в степени извлечения факторам состава или биологическим факторам.
- Практическая ценность: облегчает сопоставимость данных по верификации очистки между различными исследованиями благодаря четко определенной, воспроизводимой процедуре очистки купонов.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Данный метод интегрируется в рабочий процесс поиска и разработки в качестве критического этапа предварительной обработки для проведения анализов по проверке чистоты; он выполняется после внесения соединений и перед стадией извлечения с помощью тампонов и хроматографического анализа, что гарантирует, что измеренные показатели извлечения отражают истинные уровни остатков, а не артефакты недостаточной очистки поверхности.
- Биология открытий: устраняет шум, связанный с поверхностью, в данных по извлечению, что позволяет исследователям сосредоточиться на интерпретации истинной «липкости» соединений или эффектов формуляции на ранних этапах разработки.
- Скрининг: обеспечивает готовность анализа за счет предоставления последовательных поверхностей с высоким уровнем извлечения, что позволяет надежно оценивать соединения с различными физико-химическими свойствами.
- Аналитика: позволяет получать количественные измерения извлечения с низкой вариабельностью (Srel ≤4%), что обеспечивает точное сравнение условий очистки и влияния формуляции.
- Трансляционные исследования: обеспечивает преемственность данных верификации очистки от ранних этапов разработки до доклинических стадий путем стандартизации ключевой переменной — чистоты поверхности — во всех исследованиях.
- Корпоративное повторное использование: устанавливает многократную стандартизированную процедуру подготовки образцов из нержавеющей стали, которую можно внедрить в нескольких лабораториях и проектах, что снижает методологический дрейф и повышает целостность данных.
Операционное и корпоративное влияние
- Научная ценность: Повышает достоверность прогнозов при верификации очистки за счет дифференциации истинных уровней остатков и вариабельности, вызванной свойствами поверхности, что снижает механистическую неоднозначность при оценке процесса очистки.
- Эксплуатационная ценность: Повышает стандартизацию и воспроизводимость анализов по верификации очистки благодаря четко определенной процедуре CIP на основе соникации, которая сводит к минимуму вариации, зависящие от оператора.
- Стратегическая ценность: Способствует принятию более обоснованных решений о целесообразности («go/no-go») при разработке рецептур и технологических процессов путем предоставления надежных данных об очистке, тем самым снижая риски биологического загрязнения на поздних этапах.
- Влияние на портфель: Позволяет осуществлять приоритезацию кандидатов в препараты и производственных процессов с учетом рисков на основе аргументированных результатов верификации очистки с низкой вариабельностью.
Особенности реализации
- Требуется обучение правильной технике мазков, времени ультразвуковой обработки и правилам работы с растворами для обеспечения согласованного выполнения этапов очистки и извлечения.
- Зависит от наличия воды степени чистоты для ВЭЖХ, ультразвуковых ванн, щелочных и кислотных моющих растворов, а также дозаторов с положительным вытеснением для точного внесения проб.
- Необходима межкомандная стандартизация времени очистки, концентраций растворов и схемы проведения мазков для обеспечения воспроизводимости результатов в разных лабораториях и сменах.
- При применении протокола к образцам разной геометрии или материалов могут потребоваться корректировки, хотя метод валидирован для поверхностей из нержавеющей стали, используемых при аналитической валидации.
- Практические ограничения включают необходимость осторожного обращения для предотвращения повторного загрязнения после очистки и важность полного высушивания образцов перед внесением проб во избежание эффекта разбавления.
