Модель Pentylenetetrazole индуцированной растопку мыши

Этот метод может помочь в глубоком анализе эпилепсии. Припадок вызывает гистологические изменения в головном мозге, которые могут быть связаны с нервно-психическими расстройствами развития. Основное преимущество этого метода заключается в том, что самоконверсивная доза PTZ может вызывать контролируемые приступы лучше, чем другие современные методы.

Начните подготовку к инъекции, растворив 2 миллиграмма на миллилитр PTZ в стерильном 0,9-процентном хлориде натрия. Взвесьте животное, затем поместите его в камеру наблюдения на 3-минутный период привыкания. Затем введите PTZ межбрюшинно с помощью шприца объемом 1 миллилитров, прикрепленного к игле 27 калибра, в левый или правый квадрант брюшной полости животного.

Наконец, понаблюдайте за животным после инъекции PTZ на предмет аномального поведения. Приобретите, по крайней мере, двух двух-шестимесячных мышей 129 SV того же пола, что и исследуемые мыши, чтобы они были незнакомыми мышами. Каждую незнакомую мышь необходимо содержать отдельно.

На каждую тренировку оставляйте мышь в клетке для привыкания на 15 минут. Очистите весь аппарат в обеих клетках, протерев поверхность 70% этанолом. Затем поместите пустые клетки в две боковые камеры трехкамерного аппарата и откройте двери между камерами.

Чтобы приучить мышь, поместите мышь в центральную камеру и позвольте ей свободно перемещаться по всему устройству, пока мышь не исследует обе клетки, плюс еще пять минут. После того, как животное переместится в центральную камеру, закройте дверцы и дайте мышке свободно перемещаться в центральной камере в течение пяти минут. В течение этого периода поместите одну из 129 мышей SV в клетку, чтобы она привыкла к клетке.

Сразу же после периода привыкания мыши-субъекта поместите клетку, содержащую мышь 129 SV, называемую клеткой Stranger One, в одну из боковых камер, а пустую клетку, называемую клеткой Object, поместите в другую боковую камеру. Откройте дверцу и следите за поведением испытуемой мыши. Позвольте мыши, о которой идет речь, свободно двигаться в течение 10 минут и запишите четыре поведенческих параметра.

Во-первых, время, проведенное в каждой камере, камере Незнакомца, камере объекта и центральной камере. Во-вторых, время, потраченное на изучение каждой клетки, клетки Незнакомца и клетки объекта. Номер три — количество входов в каждую камеру, а номер четыре — общее пройденное расстояние.

После того как мышь переместится в центральную камеру, закройте дверцы. Протерев клетки, начните анализ социальной новизны, поместив еще одну мышь 129 SV в одну из клеток, называемую клеткой Stranger Two, и поместите клетку Stranger Two в одну из камер. Поместите мышь Stranger One в другую клетку, называемую клеткой Stranger One, и поместите клетку Stranger One в другую камеру.

Наконец, откройте дверцу и следите за поведением испытуемой мыши. Дайте испытуемой мыши свободно двигаться в течение 10 минут и измерьте те же поведенческие параметры, которые описаны для анализа социальности. Начните с помещения мыши в кондиционирующий аппарат с определенными условиями.

Например, квадратный аппарат с прозрачными стенами из плексигласа, металлическим решетчатым полом, запахом этанола, яркостью 100 люкс и фоновым белым шумом 65 децибел. Обусловьте мышь ударом ногой с псевдослучайным моментом поражения электрическим током 0,1 миллиампера в течение двух секунд три раза в течение пяти минут. Затем верните мышь в домашнюю клетку после кондиционирования.

На следующий день после тренировки проведите оценку памяти, поместив мышь в то же устройство, что и в состоянии шока, и измеряя время замерзания в течение пяти минут. Позже в тот же день поместите мышь в новый прибор и измерьте время замерзания во время пятиминутной оценки. Наконец, сравните время замерзания между тем же условием и новым условием.

Результаты показали, что оценка судорог постепенно увеличивалась при инъекциях PTZ, в то время как инъекции физиологического раствора не вызывали судорог или аномального поведения. Кроме того, повторяющиеся припадки способствовали формированию аберрантных аксональных ветвей или прорастанию мшистых волокон и аномальной миграции гранулярных клеток в гиппокампе. Мыши, получавшие PTZ-терапию, показали нормальную социальность.

Мыши проводили больше времени в камере Незнакомца, чем в камере Объекта, и исследовали клетку Незнакомца больше, чем они исследовали клетку Объекта. Мыши, получавшие PTZ-терапию, продемонстрировали аномальную социальную новизну, что свидетельствует об ухудшении социальной памяти. Мыши, получавшие PTZ-терапию, также показали ухудшение памяти в тесте на страх.

После этой процедуры могут быть выполнены другие методы, такие как водный лабиринт Морриса или другие тесты на память, чтобы ответить на дополнительные вопросы о нарушенных способностях памяти, вызванных эпилептическим припадком. После своего развития этот метод прокладывает путь исследователям в области эпилепсии к изучению механизма нервно-психических расстройств развития, вызванных припадками, с использованием модельных животных.