6 июня 2018 г.
Запись Intracavernosal давления (ИКП) является важным методом для оценки эректильной функции экспериментальных животных. Здесь подробный протокол свидетельствует для записи процедуры ПМС катетеризация пенис голеней и затем электрически стимулирования кавернозных нервов в крыс.
Общей целью этой процедуры является проверка эректильной функции крыс путем катетеризации голени и регистрации внутрикавернозного давления после стимуляции кавернозных нервов. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области мужской эректильной дисфункции, такие как оценка методов лечения и лекарств от эректильной дисфункции. Таким образом, одним из преимуществ этой методики является то, что она обеспечивает более точную оценку эректильной функции и рефлексов, динамического изменения кровотока, связанного с эректильной реакцией.
Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение, поскольку катетеризация сложна для освоения, поскольку небольшая площадь белой белой оболочки crus corpus cavernosum затрудняет введение иглы в penis crura. Чтобы подготовиться к операции, сделайте пару биполярных электродов для регистрации внутрикавернозного давления. Слегка загните концы электродов и отрегулируйте расстояние между ними с точностью до одного-двух миллиметров.
Затем подключите электроды к стимулятору с помощью двух зажимов типа «крокодил». Далее соберите катетерную систему. Во-первых, используйте трубку для подключения иглы для подкожных инъекций 23-го калибра к трехстороннему запорному крану.
Затем подключите запорный кран к преобразователю давления. Далее прикрепите 10-миллилитровый шприц, загруженный гепариновым раствором, к третьему положению запорного крана. Затем заполните всю систему гепариновым солевым раствором и проверьте на герметичность.
Далее поднимите иглу на 20 сантиметров и откалибруйте регистрирующую систему на 20 сантиметров воды. После калибровки отрегулируйте высоту иглы и проверьте точность работы записывающей системы. При необходимости повторяйте калибровку до тех пор, пока точность не подтвердится.
Затем переведите крыс из помещения для животных в операционную и дайте им акклиматизироваться в комнате не менее 30 минут. Тем временем простерилизуйте хирургические инструменты с 70% этанолом и подготовьте необходимые хирургические материалы. Через 30 минут подготовьте первую крысу к операции.
Обезболите его пентобарбиталом натрия и подождите от пяти до 10 минут. Затем ущипните крысы за пальцы ног и проверьте отсутствие рефлекса, чтобы подтвердить надлежащую анестезию. Затем сбрейте шерсть с живота и шеи и положите крысу лежа на хирургическую доску.
Теперь протрите открытые участки кожи тремя чередующимися скрабами с 10% повидон-йодом, а затем 70% этанолом. Также наносите офтальмологическую мазь, чтобы предотвратить пересыхание глаз. Затем приступайте к операции.
Перед изоляцией кавернозного нерва катетеризируйте левую сонную артерию в соответствии с текстовым протоколом. Начните изоляцию нерва с подтяжки кожи и мышц живота с помощью щипцов. Затем ножницами сделайте разрез по средней линии от нижней части живота к половому члену.
Далее аккуратно отодвиньте кишечник в сторону в верхнюю часть брюшной полости. Затем обхватите мочевой пузырь парой щипцов и вытащите его из брюшной полости. Теперь найдите вентральные доли простаты, которые расположены на вентральной части мочеиспускательного канала.
Затем обнажите дорсальную долю простаты, вытянув вентральные доли, семенной пузырь и семявыносящий проток. Теперь найдите точку сращения семявыносящих протоков и простаты. Затем отделите пространство между простатой и семявыносящими протоками.
Продолжайте, осторожно обнажая фиброзную капсулу, расположенную сзади от точки соединения предстательной железы и семявыносящих протоков. Затем найдите большой тазовый ганглий и кавернозные нервы, расположенные на поверхности простаты. Теперь тщательно просушите область кавернозных нервов тампоном или папиросной бумагой, а затем тщательно изолируйте и зацепите правый кавернозный нерв биполярными электродами.
Чтобы продолжить операцию, разрежьте небольшой разрез на коже полового члена ножницами, а затем осторожно обнажите кожу ствола полового члена. Затем обнажите достаточно ткани, чтобы рассечь поперечнополосатую мускулатуру полового члена. Теперь найдите верхнюю ветвь лобковой кости.
Затем обнажите бульбоспонгиозную мышцу, которая покрывает луковицу спонгиоса. Далее с помощью изогнутых щипцов отделите бульбоспонгиозную мышцу от седалищной мышцы. Продолжайте с осторожной изоляции седалищной мышцы.
Затем разрежьте седалищную мышцу, чтобы обнажить белую белую оболочку crus corpus cavernosum. Теперь проведите катетеризацию. Внимательно следите за анатомическим направлением crus corpus cavernosum и аккуратно введите иглу через белую оболочку в кавернозную оболочку.
Расположение иглы имеет решающее значение для успеха операции, поэтому в качестве теста введите небольшое количество гепаринизированного физиологического раствора. Это должно привести к небольшому выпуклости полового члена, если игла была введена правильно. Далее, не изменяя положение иглы и не нарушая соединительную трубку, осторожно отпустите иглу.
Затем осмотрите область на предмет утечки. Если ничего не обнаружено, приступайте к стимуляции нерва и анализу данных. Описанный тест регистрации ВЧД был использован для выявления пожилых крыс с эректильной дисфункцией, чтобы помочь количественно оценить влияние потенциального лечения или лекарств на эректильную функцию.
Типичная кривая ответа ВЧД в группе с эректильной дисфункцией была значительно ниже, чем кривая в контрольной группе. Обычно для статистического анализа выбирали самый высокий ICP. После расчета отношения ВЧД к среднему артериальному давлению, объединенные данные пяти крыс показали, что соотношение в возрастной группе значительно снизилось по сравнению с контрольными группами.
Помимо этих двух ключевых параметров, пикового ВЧД, плато ВЧД, времени детумесценции, продолжительности ответа и площади под кривой, все они значительно снизились у пожилых крыс, таким образом, данные полны количественных измерений, отражающих эректильную функцию. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как эффективно выполнять регистрацию ВЧД на животных. Не забывайте, что при попытке этой процедуры важно не забывать использовать гепарин, чтобы обеспечить беспрепятственность канюльной трубки.
После освоения этой техники ее можно выполнить примерно за два часа, если она выполнена правильно.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье представлен подробный протокол измерения внутрикавернозного давления (ВКД) у крыс для оценки эректильной функции. Метод включает катетеризацию ножки кавернозного тела и электрическую стимуляцию кавернозных нервов.
Регистрация внутрикавернозного давления (ВКД) у грызунов обеспечивает количественную, физиологически значимую оценку эректильной функции, что позволяет проводить механизм-ориентированную оценку терапевтических кандидатов в доклинических исследованиях эректильной дисфункции (ЭД). Этот метод способствует валидации мишеней и идентификации ведущих соединений, предоставляя динамические гемодинамические данные, которые отражают механизмы эректильного ответа, что снижает зависимость от суррогатных конечных точек. Его интеграция в процессы поиска новых лекарств повышает прогностическую уверенность при снижении рисков разработки средств терапии эректильной дисфункции перед переходом к исследованиям на более поздних этапах.
Регистрация ICP вписывается в континуум исследований: от валидации мишени и идентификации соединений-лидеров до доклинических испытаний эффективности, обеспечивая гемодинамическое фенотипирование, которое служит основой для принятия решений о целесообразности дальнейшей разработки терапевтических средств для лечения ЭД.