14 марта 2018 г.
Микроорганизмов, таких как кишечная палочка , которые загрязняют мясные продукты вызывают болезни пищевого происхождения. Использование эфирных масел в процессе сушки мяса не были глубоко изучены. Здесь мы представляем новый метод применения эфирное масло тимьяна в мясо во время сушки для снижения микробной нагрузки в сушеное мясо.
Общая цель этого эксперимента состоит в том, чтобы оценить, может ли эфирное масло тимьяна, применяемое в паровой фазе, служить эффективным консервантом в процессе сушки мяса. Этот метод может помочь ответить на вопросы в области пищевой промышленности и безопасности, например, как эффективно применять натуральные консерванты вместо синтетических. Основные преимущества этой технологии заключаются в том, что она позволяет быстро и равномерно распределять эфирное масло тимьяна во время сушки мяса, а также в том, что все пары могут быть использованы в меньших объемах, чем при нанесении жидкого масла.
Использование этого метода может дать представление о повышении безопасности и качества сушеного мяса, а также может быть применено для обработки других пищевых продуктов против других неблагоприятных микроорганизмов. Как правило, люди, плохо знакомые с этим методом, будут испытывать трудности, потому что методы подсчета количества бактерий, используемые для подсчета количества бактерий, требуют правильно подготовленных пластин и практики. Приобретите короткую говяжью вырезку в местной мясной лавке и перевезите ее в лабораторию в герметичном пакете при температуре окружающей среды в течение 20 минут после покупки.
В ламинарном безопасном шкафу простерилизуйте внешнюю поверхность говяжьей мышцы с помощью 10-секундного нанесения 70% этанола, распыляемого из бутылки для выжимания. Затем с помощью стерильной техники вырезают внешнюю поверхность мышцы так, чтобы на препарате не осталось этанола. Затем упакуйте мышцу в герметичный пакет и заморозьте ее на один день при температуре минус 18 градусов по Цельсию.
На следующий день разморозьте замороженные мышцы при температуре четыре градуса Цельсия в течение шести часов. Затем в безопасном шкафу Laminar с помощью ножа для мяса нарежьте ломтики толщиной 0,5 сантиметра. И далее уменьшаем размер ломтиков до прямоугольных образцов размером 5х2,5 квадратных сантиметра.
Для хранения упакуйте образцы в полиэтиленовые пакеты и храните их в морозильной камере. В ламинарном безопасном шкафу приготовьте стандартизированную инокуляцию E.coli ATCC 25922 для инокуляции образцов мяса. Для прививки расположите не менее четырех образцов на листе алюминиевой фольги.
Затем загрузите столько же образцов на второй лист фольги, чтобы они служили неинокулированными контрольными листами. Затем привите каждый образец, нанеся 400 микролитров инокулюма на одну сторону и аккуратно распределив его по поверхности с помощью стерильного распределителя клеток. Затем дайте образцам высохнуть в течение 10 минут.
Затем переверните образцы пинцетом, и повторите процедуру в общей сложности 800 микролитров инокулюма на образец. После этого проверьте эффективность инокуляции двух инокулированных сырых образцов и двух неинокулированных контрольных образцов. А остальные образцы завернуть в фольгу.
Промойте сырые образцы в пептонной воде в течение 10 минут при комнатной температуре со скоростью встряхивания 140 об/мин. После промывки на планшете для микротитрования сделайте пять 10-кратных последовательных разбавлений воды для ванны, которая теперь содержит бактерии. Затем нанесите по пять микролитров капель каждого разведения с помощью многоканальной пипетки на пластины с агаром МакКонки и агаром для подсчета пластин методом капель 6x6.
Капли должны быстро впитаться в агар. Для выращивания разведений методом капель 6x6 убедитесь, что пластинчатый агар и пластины агара Мак-Конки надлежащим образом высушены, чтобы капли быстро впитались в агар. Затем культивируйте инокулированные пластины при температуре 37 градусов Цельсия в течение 24 часов.
Подготовьте сушилку для мяса для нанесения эфирного масла тимьяна парами. Пропитайте фильтровальную бумагу размером 12х20 сантиметров нужным объемом ТЕО, содержащим 79% тимола. Теперь возьмите оставленные в фольге образцы и перенесите их вместе с фильтровальной бумагой в подготовленную сушильную печь с ТЕО для сушки в течение шести часов.
Параллельно обрабатывайте контрольный набор образцов в печи для сушки мяса без ТЭО. После сушки, чтобы оценить выживаемость E.coli на образцах, обработанных бактериями, повторите ту же процедуру промывки образцов в пептонной воде с одним чередованием. В этом случае после 10-минутного встряхивания перенесите образцы из ванны в инкубатор при температуре 37 градусов Цельсия для шестичасовой предварительной инкубации с обогащением.
После предварительного обогащения сделайте пять 10-кратных разбавлений воды для ванны, как и раньше. Затем используйте метод капель 6x6, чтобы поместить разведения на детекторные планшеты и инкубировать планшеты в течение 24 часов. На следующий день определите колониеобразующие единицы на грамм мяса.
Исследуйте пластины на наличие мезофильных аэробных бактерий, которые проявляются в виде белых пятен на пластинчатом агаре, и подсчитайте типичные колонии E.coli на агаре Мак-Конки, которые выглядят как от красного до темно-розового. Чтобы проанализировать микробиологические данные, преобразуйте подсчеты в логарифм КОЕ на грамм и используйте анализ вариантов для определения основных эффектов лечения. В процессе сушки не вся кишечная палочка удаляется.
Некоторые бактерии переходят в жизнеспособное, но некультивируемое состояние. Таким образом, при неправильном хранении мяса при высокой температуре и/или влажности эти бактерии могут снова стать жизнеспособными и потенциально нанести вред потребителям. Обработка мяса различными дозами ТЕО во время сушки может полностью или частично устранить кишечную палочку.
Количество мезофильных аэробных бактерий и кишечных бацилл в образцах мяса определяли на планшетах PCA и MCA. При применении 1,5 миллилитров ТЭО не наблюдалось роста бактерий даже после шестичасовой фазы предварительного обогащения. Эта доза соответствует 0,028 миллилитра паров TEO на литр воздуха.
После просмотра этого видео вы должны хорошо понимать, как обрабатывать мясо паровой фазой эфирных масел во время сушки и оценить количество жизнеспособных бактерий в конечном продукте. В дополнение к этой процедуре могут быть выполнены другие методы, такие как сенсорная оценка и анализ GC, чтобы ответить на дополнительные вопросы о приемлемости для потребителя конечного продукта и количестве остатков эфирного масла тимьяна. Не забывайте, что работа с мясорубкой и болезнетворными бактериями может быть опасной, поэтому всегда следует принимать меры предосторожности, такие как ношение соответствующего защитного снаряжения и использование защитного шкафа Laminar.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данном исследовании изучается применение эфирного масла тимьяна в паровой фазе в процессе сушки мяса для снижения микробиологического обсеменения. Целью данного метода является повышение безопасности пищевых продуктов путем использования натурального консерванта в качестве альтернативы синтетическим вариантам.
В данном исследовании демонстрируется подход с использованием натурального консерванта — паров эфирного масла тимьяна — для снижения микробной обсемененности при сушке мяса, что позволяет решить проблемы безопасности пищевых продуктов при разработке белковых продуктов. Данный метод способствует снижению механистических рисков путем оценки антимикробной эффективности с помощью количественного анализа колониеобразующих единиц, обеспечивая прогностическую уверенность в стратегиях консервирования. Он представляет собой масштабируемую и воспроизводимую основу для оценки натуральных добавок в технологических цепочках переработки пищевых продуктов, что актуально для принятия решений на ранних этапах разработки рецептур и продления срока годности.
Данный метод интегрируется в рабочие процессы от ранних этапов поиска до доклинических исследований, предоставляя стандартизированный анализ для оценки эффективности консервантов, поддерживая идентификацию перспективных природных соединений и обеспечивая принятие обоснованных решений о дальнейшем продвижении на основе полученных данных.