Анализ поведения Arabidopsis thaliana роста в разных качествах свет

Общая цель этого визуального и молекулярного анализа фенотипов — сравнить рост растений при различных условиях освещения и различных генотипов. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области исследований растений, такие как акклиматизация к различным условиям освещения. Основное преимущество этой методики заключается в том, что она дает воспроизводимые и измеримые результаты.

Демонстрировать процедуру будет Франка Зайлер, техник в моей лаборатории. Для начала рассчитайте подходящий размер выборки и подготовьте необходимое количество горшков размером шесть на семь сантиметров с почвой и посадите в каждый по одному семечку. Затем яровизируйте семена при температуре четыре градуса Цельсия в течение двух дней.

Установите относительную влажность воздуха в климатической камере на уровне 65% и температуру на уровне 22 и 16 градусов Цельсия для 16-часового дневного цикла и восьмичасового ночного цикла. Затем отрегулируйте свет на всех уровнях с интенсивностью 200 микромолей на квадратный сантиметр и секунду. Используйте встроенный спектрометр для непрерывного мониторинга спектрального выхода.

Поместите растения в климатическую камеру, и накройте их прозрачной верхушкой, пока не выйдут хорошо развитые коталинины. Визуально осматривайте растения и регулярно записывайте данные о росте с помощью фотографий. Чтобы получить стабильные изображения, используйте штатив камеры и масштабную линейку для каждого снимка.

Сначала поместите растение в темноту на несколько минут. Затем установите импульсно-модулированный флуориметр и камеру на соответствующем расстоянии от растения. Вся розетка должна быть видна в окне реального времени.

Запустите программное обеспечение и выберите опцию mini, которая появится в окне выбора единицы измерения. Затем нажмите OK. Затем выберите синий цвет во всплывающем окне и нажмите OK.

Выберите опцию «Видео в реальном времени», поверните регулировочное кольцо объектива, чтобы сфокусировать изображение, и выберите определенную область растения. Чтобы выйти из текущего окна, нажмите на поле выхода в правом верхнем углу. Определите область по интересам (AOI) с настройками по умолчанию.

Круг и красное поле со средним значением FT пикселей, содержащихся в AOI, автоматически появятся в центре экрана. Вам необходимо удалить эту АОИ, прежде чем определять свою собственную. Затем примите настройки по умолчанию на вкладке справа.

Затем нажмите кнопку "Добавить" на вкладке "AOI" и поместите круг в область листа. Повторите этот процесс пять раз для каждого листа, выбирая несколько листьев на одно растение. Поставьте галочку в соответствующем поле с максимальным квантовым выходом PS 2, чтобы выбрать изображение FV/FM.

Примените насыщающую световую вспышку для измерения параметров фотосинтеза с помощью флуоресцентного анализа сжатия, нажав кнопку F0, FM. Найдите результаты на вкладке отчета. Отметьте все соответствующие флажки и экспортируйте их в соответствующее программное обеспечение для анализа.

В этом исследовании светодиодные лампы использовались для обеспечения стабильного количества и качества света при наблюдении и анализе роста растений и типов полых озер. Данные с растений собирали на 12, 21 и 28 день после шитья. На этом рисунке показаны средние значения квантовой урожайности PS 2 для 5 растений и 5

Статистически оценивались данные о растениях, выращенных под имитацией солнечного света, обогащенного синим или красным светом. На этом рисунке показаны средние значения квантовой урожайности, влияющие на PS 2, равные 5 растениям и 5 в день. Средние значения для растений, выращенных под синим и красным светом, были значительно выше, чем для растений, выращенных под имитацией солнечного света.

После установки светодиодные лампы могут обеспечивать стабильные или переменные условия освещения, экономя много энергии по сравнению с люминесцентными лампами. Во время эксперимента важно ежедневно браться за растения. После своего развития этот метод открывает путь исследователям в области исследований растений к изучению поведения роста при различных световых условиях с определенной длиной волны.

После просмотра этого видео вы должны иметь хорошее представление о том, как выращивать, и анализировать растения с точки зрения их визуального и молекулярного типа полы в количественном отношении.